Диссертация (1140408), страница 9
Текст из файла (страница 9)
В поле зрения появляются многочисленныемакрофаги, обеспечивающие фагоцитирование частиц серебра.На 7 сутки послеоперационного периода воспалительная реакция наэндопротез при визуальном осмотре раны сохранялась только при имплантации«Плазмофильтр» - сохранялась небольшая гиперемия в области кожного шва.52Приимплантации«Эсфил»реакциятканиасептического воспаления стадии экссудации -соответствуетреакциинаблюдается отек, сильнаякруглоклеточная инфильтрация продолжает сохраняться. Площадь инфильтратадовольно обширная (0,73±0,03 мм2), клеточный состав преимущественнопредставлен клетками-нерезидентами - нейтрофилами и лимфоциты. Значениеклеточного индекса 0,52±0,02 (таблица 5). Индекс пролиферации составил26,09%.При использовании эндопротеза «Унифлекс» наблюдаются начальныеэтапы формирования соединительнотканной капсулы.
На нитях протеза в полезрения преобладают клетки фибробластического ряда. Степень дифференцировкифибробластов убывает по направлению снаружи (от самых наружных слоёвкапсулы)внутрь(кволокнамимпланта)(рисунок15А).Поэтомувнепосредственной близости от них оказываются наиболее молодые формыфибробластов, имеющие классическую трапециевидную или треугольную формутела с умеренно базофильной цитоплазмой. Их ядра крупные, изобилующиеэухроматином (светлые) и имеют хорошо различимое и крупное ядрышко.Количество Ki-67-положительных клеток было 21,48%.В поле зрения преобладают лимфоциты и макрофаги.
Наблюдаетсяактивный неоангиогенез, многочисленные тучные клетки преимущественно II иIII типов, вокруг вновь образованных сосудов (рисунок 15Б).Рисунок 15 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс»» на7 сутки эксперимента в стерильных условиях. Окр. Ван Гизон. А - ув. х200. Б - ув.х40053При имплантации эндопротеза «Плазмофильтр» обращает на себя вниманиеяркая выраженность реакции ткани на имплант.
В поле зрения встречаетсябольшое количество тучных клеток в стадии накопления секрета, лежащие внепосредственной близости от нитей импланта. Их соседями являютсялимфоциты, содержание которых – 29,3±0,49%. Площадь инфильтрата снизиласьпрактически на 20% по отношению к предыдущему сроку эксперимента (таблица3). Клеточный состав инфильтрата представлен многочисленными лимфоцитами,нейтрофилами и макрофагами (таблица 4). Индекс пролиферации составил34,63%.Приизучениимикропрепаратов,полученногопослеимплантацииэндопротеза «Эсфил Ag» сохраняется круглоклеточная инфильтрация, чтоговорит о продолжении фазы асептического воспаления.
Это подтверждаетсядостаточно большой площадью инфильтрата – 0,53±0,14 мм2 и значениемклеточного индекса меньше единицы – 0,89±0,02. Элементы серебра назначительном расстоянии от нитей эндопротеза. Около нитей эндопротезарасполагаютсяклеткифибробластическогоряда,находящиесявстадиипролиферативной активности, их количественный состав был равен 31,9%, аколичество Ki-67-положительных клеток было 36,92%.Вокруг эндопротеза «Унифлекс Ag» в соединительной ткани присутствуюткроме многочисленных клеток фибробластического ряда, единичные лимфоциты,макрофаги и нейтрофилы (Рис. 16А).
Индекс митотической активности был равен45,35%.В поле зрения вокруг нитей протеза и непосредственно между нимивстречаются гигантские многоядерные клетки, но их размеры не большие,количество слабо базофильных ядер, расположенных в оксифильной цитоплазме,варьирует от 2 до 4 (рисунок 16Б). Преимущественным отличием от остальныхгрупп, является, не сколько количественный, столько качественный составкомпонентов клеточного индекса. Клеточный индекс при использовании«Унифлекс Ag» отличается от «Эсфил Ag» на 0,27 (таблица 5).54Рисунок 16 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс Ag»»на 7 сутки эксперимента в стерильных условиях.
Окр. Г+Э. А - ув.х 100. Б - ув.х200Таблица 5 - Соотношение компонентов клеточного индексана 7-и сутки эксперимента при использовании различных эндопротезов встерильных условиях, M ±, у.е.ЭндопротезФиброцитыФибробластыМакрофагиУнифлекс AgЭсфил AgПлазмофильтрУнифлексЭсфил16,6±0,303,4,517,3±1,113,4,510,9±0,371,2,57,5±0,651,2,38,9±0,731,2,318,7±0,393,4,514,6±0,454,513,1±0,291,4,54,6±0,221,2,3,510,6±0,741,2,3,418,5±0,42315,3±0,40323,4±0,511,2,524,6±1,661,2,514,8±0,583,4ЛимфоцитыНейтрофилы21,4±0,404,5 24,8±1,084,526,1±0,364,5 26,7±0,744,529,3±0,494,5 23,5±0,614,59,3±1,131,2,3 54,0±1,391,2,37,0±1,011,2,3 58,7±0,891,2,3Клеточныйиндекс1,16±0,022,3,4,50,89±0,02 1,4,50,89±0,04 1,4,50,58±0,031,2,30,52±0,021,2,3Примечание: статистически значимые отличий при р≤0,05 по сравнению с эндопротезом:4Унифлекс Ag, 2 – Эсфил Ag, 3 –Плазмофильтр, –Унифлекс, 5 –Эсфил.\Такимобразом,реактивныеизменениясоединительной1–тканисоответствуют завершению стадии экссудации и началу стадии пролиферации.Максимальные значения клеточного индекса при использовании «Унифлекс Ag»свидетельствуют о преобладании клеток резидентов и как результат активацииколлагеногенеза.
Наличие гигантских многоядерных клеток вокруг нитейпротезов с активностью является закономерным ответом на попадание в тканьмолекул серебра. При этом на большей площади инфильтрата вокруг этихпротезов в непосредственной близости к нитям протеза в поле зренияпреобладают клетки фибробластического ряда.55На 14 сутки послеоперационного периода при имплантации эндопротеза«Эсфил» сформирована недостаточно зрелая соединительнотканная капсула(таблица 6), площадь воспалительного инфильтрата меньше на 21,9% (таблица 3),по сравнению с предыдущим сроком.Таблица 6 - Динамика изменения толщины соединительнотканной капсулы,сформированной вокруг нитей эндопротезов, M±, мм2ЭндопротезУнифлекс AgЭсфил AgПлазмофильтрУнифлексЭсфил7-есутки0,16±0,02 3,50,15±0,140,12±0,0310,15±0,040,13±0,03114-есутки0,37±0,02 3,4,50,33±0,023,4,50,25±0,021,20,27±0,021,20,24±0,021,221-есутки0,46±0,01 3,4,50,40±0,013,4,50,31±0,011,20,32±0,021,20,30±0,031,230-есутки1,1±0,024,50,97±0,094,50,9±0,064,50,84±0,011,2,30,72±0,011,2,3Примечание: статистически значимые отличий при р≤0,05 по сравнению с эндопротезом:4Унифлекс Ag, 2 – Эсфил Ag, 3 –Плазмофильтр, –Унифлекс, 5 –Эсфил.1–В поле зрения преобладают фиброциты и фибробласты.
Встречаютсяединичные лимфоциты и макрофаги (таблица 5). Анализируя клеточный иволокнистый компонент соединительнотканной капсулы, хорошо видно, что онинаходятся в равных соотношениях. Тучные клетки встречаются редко,преимущественно I и II типов (рисунок17, 18).Рисунок 17 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Эсфил» на 14сутки эксперимента в стерильных условиях.
Окр. Г+Э. А - ув. х 200. Б - ув. х 40056Рисунок 18 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Эсфил» на 14сутки эксперимента в стерильных условиях. Окр. Г+Э. Ув. х 400Вокруг эндопротеза «Унифлекс» плотность клеток меньше, по сравнению стем же эндопротезом в условиях инфицирования. С наружной сторонынаблюдается формирование соединительнотканной капсулы. В поле зренияпреимущественно фибробласты (12,7±0,36) и фиброциты (8,4±0,96), макрофаги(26,3±2,35), многочисленные нейтрофилы (44,7±3,02).
Индекс пролиферациисоставил 20,42%.С внутренней стороны капсулы встречаются гигантские многоядерныеклетки, имеющие в своем составе 2-3 слившихся ядра, и многочисленныефибробласты (рисунок 19).57Рисунок 19 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс»» на14 сутки эксперимента в стерильных условиях. Окр. Г+Э. А - ув. х 200. Б - ув. х400Пригистологическом«Плазмофильтр»морфологическиевисследованиинепосредственнойпризнакиместблизостиэкссудативнойкфазыфиксациинитямпротезанаблюдаютсявоспаления.Здесьобнаруживаются большое количество клеток-нерезидентов в количестве 44%(таблица 4).
На небольшом расстоянии от нитей протеза воспалительная реакциятканименеевыражена.Площадьвоспалительно-клеточногоинфильтратасоставила 0,35±0,02 мм2. В таких участках отмечается большое количествопролиферирующих фибробластов различной степени зрелости.
Наряду с этим,здесь же, определяются макрофаги и гигантские многоядерные клетки.При микроскопии препаратов с использованием «Эсфил Ag» быловыявлено, что вокруг нитей протеза образована тонкая соединительнотканнаякапсула, непосредственно прилегающего к нитям протеза, волокна которой приокраске по Маллори ярко базофильные (рисунок 20).58Рисунок 20 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Эсфил Ag» на14 сутки эксперимента в стерильных условиях.
Окр. по Маллори. Ув. х 400Вперипротезнойзонебольшоеколичествопоперечносрезанныхкровеносных капилляров.Площадь клеточного инфильтрата составила 0,31±0,02 мм2. Состав данногослояпредставленклетками-резидентами:фиброцитами(20,8±0,41),фибробластами (27,4±0,42) и немногочисленными макрофагами (13,2±0,29).Количество Ki-67-положительных клеток было 44,89% (рисунок 21).59Рисунок 21 - Экспрессия Ki-67 в области имплантации эндопротеза «ЭсфилAg» на 14 сутки эксперимента в стерильных условиях.
Иммуногистохимическаяреакция, DAB. Ув. х400Следует отметить, что при имплантации эндопротеза «Унифлекс Ag», средивсех исследуемых клеточных форм во внутреннем слое капсулы фибробласты ифиброциты составляют 54,3. Очевидное преобладание в инфильтрате клетокрезидентов и, как следствие, высокое значение клеточного индекса (таблица 7)является морфологическим подтверждением смены фаз с экссудативной напролиферативную. При этом количество Ki-67 положительных клеток было41,26%.
Обращает на себя внимание выраженная реакция макрофагов, активнофагоцитирующих частицы серебра (рисунок 22).60Рисунок 22 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс Ag»на 14 сутки эксперимента в стерильных условиях. Окр. Г+Э. А – ув. х 200. Б - ув.х 400Таблица 7 - Соотношение компонентов клеточного индексана 14-е сутки эксперимента при использовании различных эндопротезов встерильных условиях, M ± , у.е.ЭндопротезФиброцитыУнифлекс AgЭсфил AgПлазмофильтрУнифлексЭсфил28,9±0,373,4,520,8±0,413,4,514,8±0,611,212,7±0,361,211,7±0,741,2ФибробластыМакрофагиЛимфоцитыНейтрофилыКлеточныйиндекс25,4±0,333,4,5 14,6±0,493,4,5 16,1±0,453,4,5 15,0±1,06 2,3,4,5 2,23±0,092,3,4,527,4±0,423,4,5 13,2±0,293,4,5 15,0±0,943,4,5 23,6±0,95 1,4,51,59±0,05 1,53,4,51,21,2,4,51,4,518,6±0,6122,6±0,5723,1±0,6520,9±0,641,19±0,061,51,21,21,2,31,2,38,4±0,9626,3±2,357,7±1,1544,7±3,021,44±0,041,59,2±0,721,220,9±0,921,24,4±0,701,2,353,8±1,061,2,3 0,72±0,02 1,2,3,4,Примечание: статистически значимые отличий при р≤0,05 по сравнению с эндопротезом:4Унифлекс Ag, 2 – Эсфил Ag, 3 –Плазмофильтр, –Унифлекс, 5 –Эсфил.1–Таким образом, по истечению 2-недельного нахождения импланта надапоневрозом образование соединительнотканной капсулы наблюдается во всехсериях эксперимента, за исключением серии с использованием эндопротеза«Плазмофильтр».На 21-й день имплантации протеза «Эсфил» вокруг его волоконсформирована достаточно зрелая соединительнотканная капсула.















