Диссертация (1140393), страница 12
Текст из файла (страница 12)
12, рис.35).Дисперсионный факторный анализ показал достоверную зависимостьморфометрических параметров микроструктуры щитовидной железы от видатиреоидной патологии с вероятностью 99.9% (Р<0.001).Таким образом, анализ полученных данных показал, что при каждомвиде патологии щитовидная железа имеет характерные особенности своеймикроструктуры, которые необходимо учитывать при проведении дифференциальной диагностики.Узловой нетоксический зоб характеризуется малым размером клеток иядра, низким ядерно-цитоплазматическим индексом, плоской формой клеток,вытянутым нормохромным ядром, умеренной интрафолликулярной пролиферацией эпителия, гомогенным коллоидом и диффузной лимфоидной инфильтрацией (рис. 36).Узловой токсический зоб характеризуется наименьшим размером клеток и ядра, минимальным ядерно-цитоплазматическим индексом, кубическойформой клеток, округлым нормохромным ядром, очаговой интрафолликулярной пролиферацией эпителия, сетчатым коллоидом, выраженной краевойвакуолизацией коллоида, очаговой лимфоидной инфильтрацией, и кровоизлияниями (рис.
37).Рис. 36. Макро-микрофолликулярный нетоксический зоб. Уплощенный фолликулярный эпителий с уплощенными и овальными ядрами; гомогенныйплотный коллоид. Окраска гематоксилином – эозином, 400.Рис. 37. Макро-микрофолликулярный токсический зоб. Фолликулы малогоразмера, выстланные кубическим эпителием; единичные уплощенные клетки.Окраска гематоксилином – эозином, 400.90Рис.
38. Диффузный токсический зоб. Фолликулы выстланы высоким цилиндрическим и кубическим эпителием. Окраска гематоксилином – эозином,400.Рис. 39. Диффузный токсический зоб. Сосочковая пролиферация эпителия;гомогенный коллоид. Окраска гематоксилином – эозином, 400.91Рис. 40. Аутоиммунный тиреоидит. Участок микрофолликулярного строенияс плотным гомогенным коллоидом, выраженной лимфоидной инфильтрацией, формированием лимфоидных фолликулов со светлыми центрами размножения.
Окраска гематоксилином – эозином, 100.Рис. 41. Аденома щитовидной железы. Участок микрофолликулярного строения с гиперхромными ядрами; выраженная диффузная инфильтрация стромы. Окраска гематоксилином – эозином, 400.92Рис. 42. Рак щитовидной железы. Участок фолликулярного строения; полиморфные светлые анаплазированные клетки с фигурами митоза.
Окраска гематоксилином – эозином, 400.Рис. 43. Рак щитовидной железы. Выраженные папиллярные структуры.Окраска гематоксилином – эозином, 200.93Диффузный токсический зоб характеризуется средним размером клетоки ядра, довольно высоким ядерно-цитоплазматическим индексом, кубической формой клеток, округлым нормохромным ядром, редкой интрафолликулярной пролиферацией эпителия, гомогенным коллоидом, и краевой вакуолизацией коллоида (рис.
38, 39).Аутоиммунный тиреоидит характеризуется небольшим размером клеток и ядра, средним ядерно-цитоплазматическим индексом, плоской формойклеток, округлым нормохромным ядром, гомогенным коллоидом и выраженной лимфоидной инфильтрацией (рис. 40).Аденома щитовидной железы характеризуется большим размером клеток и ядра, высоким ядерно-цитоплазматическим индексом, кубическойформой клеток, округлым гиперхромным ядром, диффузной интрафолликулярной пролиферацией эпителия и плотным коллоидом (рис. 41).Рак щитовидной железы характеризуется наибольшим размером клетоки ядра, максимальным ядерно-цитоплазматическим индексом, полиморфными клетками, округлым гиперхромным ядром, выраженной диффузной интрафолликулярной пролиферацией эпителия и папиллярными структурами скороткими широкими сосочками (рис.
42, 43).3.3. Иммуногистохимическое исследование фолликулярныхопухолей щитовидной железыС целью дифференциальной диагностики фолликулярных опухолейразной степени злокачественности было проведено морфометрическое исследование щитовидных желез, пораженных фолликулярным раком и фолликулярной аденомой с определением количественных параметров.Количественные параметры фолликулярных опухолей достоверно различаются по размерным характеристикам клеток и ядер.
Высота тиреоидногоэпителия при фолликулярной аденоме (7,47±0,11 мкм) на 13% меньше, чемпри фолликулярном раке (8,61±0,07 мкм) (р < 0,05). Объем тиреоидной клет-94ки при фолликулярном раке на 38% больше, чем при аденоме (561,16±12,48 и405,68±15,17 мкм3, соответственно) (р < 0,05), а объем ядра при фолликулярном раке на 44% превышает этот параметр при фолликулярной аденоме(270,43±8,23 и 188,09±7,53 мкм3, соответственно) (р < 0,05). При этом различия в средних размерах фолликулов и площади коллоида не превышаютошибку среднего для этих параметров, что усложняет задачу дифференциальной диагностики (таб. 13).Таблица 13Количественные характеристики фолликулярных опухолейГруппаВысота клетки (мкм)Ширина клетки (мкм)Объем клетки (мкм3)Высота ядра (мкм)Ширина ядра (мкм)Объем ядра (мкм3)Объем цитоплазмы (мкм3)Ядерноцитоплазматический индексСредний продольныйразмер фолликулов (мкм)Средний поперечныйразмер фолликулов (мкм)Средний продольныйразмер коллоида (мкм)Средний поперечныйразмер коллоида (мкм)Средняя площадь фолликулов (мкм2)Средняя площадь коллоида (мкм2)рФолликулярнаяаденома7,47±0,118,26±0,13405,68±15,176,73±0,127,25±0,12188,09±7,53217,58±11,66Фолликулярныйрак8,61±0,079,09±0,07561,16±12,487,77±0,098,11±0,10270,43±8,23290,73±10,53<0,05>0,05<0,05>0,05>0,05<0,05<0,050,93±0,050,97±0,05<0,05126,0±4,9128,7±4,7>0,05110,8±4,1113,3±4,1>0,05118,5±4,9120,0±4,7>0,05103,3±4,1104,6±4,1>0,0511419,08±870,5211879,29±829,66>0,0510066,65±824,4910289,53±771,53>0,05Полуколичественные параметры фолликулярных опухолей не имеютярко выраженных различий, оба типа патологий имеют округлые фолликулы,центрально расположенное ядро, гомогенный коллоид с выраженной краевойвакуолизацией, фолликулярные раки отличаются большим числом гиперхромных ядер.95В связи со сложностью дифференциальной диагностики фолликулярного рака и фолликулярной аденомы становится актуальным поиск новыхметодов дифференциальной диагностики фолликулярных образований щитовидной железы.
В настоящее время одним из наиболее перспективных в данном направлении является выполнение иммуногистохимического исследования, в ходе которого проводится определение экспрессии потенциальныхмаркеров.Для подтверждения значимости иммуногистохимических маркеров вдиагностике фолликулярных образований были использованы наиболее популярные маркеры: галектин-3, цитокератин-19, HBME-1.Окрашивание антителами к галектину-3 показало его экспрессию опухолевыми клетками с накоплением галектина-3 в цитоплазме опухолевыхклеток (до 60% клеток) и в фолликулярных клетках, прилежащих к опухолевому очагу (15% клеток). При этом, оценка экспрессии галектина-3 при аденоме щитовидной железы показала меньший уровень накопления галектина3 в клетках (15-25% клеток) (рис.
44, 45).Оценка экспрессии HBME-1 в клетках фолликулярного рака показывает его преимущественное накопление в строме и капсуле с незначительнымраспространением в опухолевых клетках (36% клеток). В исследуемых случаях фолликулярной аденомы только в одном случае отмечалась экспрессияHBME-1 в единичных клетках (2% клеток) (рис. 46, 47, 48).Накопление цитокератина-19 отмечалось во всех случаях фолликулярного рака и фолликулярной аденомы, различаясь интенсивностью экспрессии. При этом накопление цитокератина преимущественно наблюдалось вцитоплазме фолликулярных тироцитов и у клеток фолликулярного рака оценивалось как очень интенсивное, в то время как клетки фолликулярной аденомы характеризовались умеренной экспрессией этого белка (рис. 49, 50).96Рис.
44. Фолликулярный рак. Интенсивная экспрессия галектина-3 в опухолевых клетках. Иммуногистохимическая реакция с антителами к галектину-3,400.Рис. 45. Фолликулярная аденома. Экспрессия галектина-3 средней интенсивности. Иммуногистохимическая реакция с антителами к галектину-3, 400.97Рис. 46. Фолликулярный рак. Экспрессия HBME-1 в капсуле опухолевого узла. Иммуногистохимическая реакция с антителами к HBME-1, 200.Рис. 47.
Фолликулярный рак. Экспрессия HBME-1 в клетках опухолевого узла. Иммуногистохимическая реакция с антителами к HBME-1, 400.98Рис. 48. Фолликулярная аденома. Экспрессия HBME-1 в единичных клеткахопухолевого узла. Иммуногистохимическая реакция с антителами к HBME-1,200.Рис. 49. Фолликулярный рак. Экспрессия цитокератина-19 в клетках опухолевого узла.
Иммуногистохимическая реакция с антителами к цитокератину19, 400.99Рис. 50. Фолликулярная аденома. Экспрессия цитокератина-19 средней интенсивности. Иммуногистохимическая реакция с антителами к цитокератину19, 400.Таким образом, отмечена повышенная экспрессия всех исследованныхантигенов в клетках при фолликулярном раке, но при этом, поскольку многиеиз них выявляются также и при фолликулярной аденоме, то недостаточнаяспецифичность не позволяет использовать только один изолированный маркер, поскольку в этом случае повышается риск неправильной диагностикифолликулярной опухоли. Комплексное использование иммуногистохимических маркеров позволяет в значительной мере повысить точность дифференциальной диагностики опухолей щитовидной железы со сходным морфологическим строением до 83%, специфичность маркеров при их совместномиспользовании составляет 97%, чувствительность возрастает до 74%.3.4.
Математическое моделирование тиреоидной патологииВ целях поиска объективных критериев морфологической диагностикитиреоидной патологии был применен дискриминантный анализ полученныхморфометрических параметров.100В результате анализа были рассчитаны 6 дискриминантных уравнений,позволяющих классифицировать новые случаи тиреоидной патологии в 6групп, соответствующих изучаемым. Полученные дискриминантные уравнения можно представить в следующем виде:10W j ( Ai , j X i ) C ji 1Где Wj - значение дискриминантной функции (j=1..6);Аi,j - коэффициент j-й дискриминантной функции при i-м морфометрическом показателе;Хi - морфометрический параметр (i=1..60);Cj - постоянная j-й дискриминантной функции.Подстановка экспериментальных морфометрических параметров во всешесть уравнений дает 6 величин W1 - W6.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
