Диссертация (1140388)
Текст из файла
ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ПЕРМСКИЙГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИАКАДЕМИКА Е.А.ВАГНЕРА» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯРОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИНа правах рукописиЛИТВИНОВ ВАЛЕРИЙ ВИКТОРОВИЧМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙАКТИВНОСТИ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО КАТИОННОГО ПЕПТИДАВАРНЕРИНА ПРИ КАТЕТЕР-АССОЦИИРОВАННОЙСТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ14.03.02 – Патологическая анатомияДиссертацияна соискание ученой степеникандидата медицинских наукНаучные руководители:доктор медицинских наук,профессор Г.Г.Фрейнд,кандидат медицинских наук,доцент В.П.КоробовПермь 20152ОГЛАВЛЕНИЕСтр.СПИСОК ТЕРМИНОЛОГИЧЕСКИХ СОКРАЩЕНИЙ5ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………… 6ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………... 151.1.Проблема катетер-ассоциированных инфекций……………………...
151.2.Этиология и патогенез катетер-ассоциированных инфекций……… 151.3.Классификация катетер-ассоциированных инфекций………………1.4.Значение материал катетера и его обработки в развитии катетерассоциированных инфекций………………………………………….1.5.Проблемамоделированиепатологическихпроцессов1920ивозможности моделирования катетер-ассоциированной инфекции..221.6.Моделирование катетер-ассоциированной инфекции ……………… 231.7.Реакция окружающих тканей на повреждение при моделированиикатетер-ассоциированных инфекций…………………………………271.8.Антибактериальные пептиды…………………………………………311.9.Механизм действия антибактериальных пептидов на бактерии…… 331.10. Воздействие антибактериальных пептидов на бактериальныепленки………………………………………………………………….341.11. Возможности применения антибактериальных пептидов………….351.12. Низкомолекулярный катионный пептид варнерин………………….371.13. Заключение…………………………………………………………….39ГЛАВА 2.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ……………………………………... 412.1.Лабораторные животные………………………………………………. 412.2.Изучение процесса образования биопленок на венозных катетерах.. 412.3.Моделирование катетер-ассоциированной инфекции вэксперименте…………………………………………………………… 422.3.1. Определение дозы циклофосфамида, вызывающего3иммуносупрессию……………………………………………………... 432.3.2. Моделирование катетер-ассоциированной инфекции наиммуносупрессированных животных………………………………..442.3.3.
Моделирование катетер-ассоциированной инфекции уиммуносупрессированных животных на фоне действиянизкомолекулярного катионного пептида варнерина………………442.4.Морфологические методы исследования……………………………. 472.5.Морфометрическое исследование……………………………………. 502.6.Статистический анализ………………………………………………..50ГЛАВА 3. МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОДЕЛИКАТЕТЕР-АССОЦИИРОВАННОЙ ИНФЕКЦИИ БЕЗИММУНОСУПРЕССИИ И НА ФОНЕ ИММУНОСУПРЕССИИ………… 523.1.Первая группа: морфологическая характеристика модели катетерассоциированной инфекции у белых мышей с интактной иммуннойсистемой………………………………………………………………..523.1.1.
Первая подгруппа: имплантация животным отрезков стерильныхкатетеров……………………………………………………………….523.1.2. Вторая подгруппа: имплантация животным отрезков катетеров спредварительно выращенными на них биопленками стафилококков 543.1.3. Третья подгруппа: имплантация животным отрезков стерильныхкатетеров с однократным введением взвеси стафилококков в зонуимплантации……………………………………………………………3.1.4. Четвертаястерильныхподгруппа:катетеровимплантациясежесуточнымживотнымвведениемотрезковвзвесейстафилококков в зону имплантации………………………………….3.2.5759Вторая группа: морфологическая характеристика модели катетерассоциированной инфекции белых мышей с иммуносупрессией…..
633.2.1. Первая подгруппа: имплантация животным отрезков стерильныхкатетеров……………………………………………………………….6343.2.2. Вторая подгруппа: имплантация животным отрезков катетеров спредварительно выращенными на них биопленками стафилококков 673.2.3. Третья подгруппа: имплантация животным отрезков стерильныхкатетеров с однократным введением взвеси стафилококков в зонуимплантации……………………………………………………………3.2.4. Четвертаяподгруппа:стерильныхкатетеровимплантациясежесуточнымживотным71отрезковвведениемвзвесейстафилококков в зону имплантации………………………………….74ГЛАВА 4.
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОДЕЛИКАТЕТЕР-АССОЦИИРОВАННОЙИНФЕКЦИИНАИММУНОСУПРЕССИИВВЕДЕНИИЖИВОТНЫМПРИФОНЕНИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО КАТИОННОГО ПЕПТИДА ВАРНЕРИНА... 824.1.Первая подгруппа: имплантация стерильных отрезков катетеровпредварительно обработанных варнерином…………………………4.2.Втораяподгруппа:предварительнобиопленкамиимплантациявыращеннымистафилококковиотрезковнаснихкатетеровсдвухсуточнымиежесуточнымвведениемварнерина………………………………………………………………4.3.8285Третья подгруппа: имплантация предварительно обработанныхварнерином отрезков катетеров и однократное введение взвесистафилококков…………………………………………………………4.4.89Четвертая подгруппа: имплантация отрезков стерильных катетеровс ежесуточным введением взвесей стафилококков и варнерина…… 92ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ……………………………….101ВЫВОДЫ……………………………………………………………………..118ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ……………………………………..119СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………1205СПИСОК ТЕРМИНОЛОГИЧЕСКИХ СОКРАЩЕНИЙАБП – антибактериальные пептидыКАИ – катетер-ассоциированная инфекцияКОЕ – колониеобразующая единицаМКАТ – моноклональное антителоМФ/ГФ – макрофагально-гранулоцитарный коэффициентCD - The Cluster of Differentiation, молекулы дифференцировки лимфоидныхклетокCD3 – рецепторы Т-лимфоцитовCD20 – рецепторы B-лимфоцитовCD34 – рецепторы клеток эндотелияCD56 – рецепторы макрофаговGV - генцианвиолетIL – interleukin, интерлейкинLB - lysogeny broth, литическая среда для роста культуры бактерийMTS - водорастворимый тетразолийn – число наблюденийOD - optical density, оптическая плотностьReady-to-use – готовое для использования (не требующее дополнительныхразведений)TNF-α – tumor necrosis factor-α, фактор некроза опухоли-альфаVimentin–виментин,белокмезодермального происхожденияQuorum sensing – чувство кворумапромежуточныхфиламентовтканей6ВВЕДЕНИЕАКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫКатетер-ассоциированные инфекции (КАИ) являются причиной более 60%госпитальных бактериемий и до 37% всех нозокомиальных инфекций вевропейских странах [119, 186].
Важнейшим следствием бактериальногообсеменения установленных пациентам катетеров и имплантов является развитиесепсиса, частота которого по разным источникам достигает 20-55% [6, 35, 69, 119,220].Наиболее частой причиной бактериальной колонизации катетеров (до 90%случаев) является распространение микроорганизмов кожных покровов по каналуустановленного катетера на его наружной поверхности. В этом случаепреобладающие в составе микрофлоры кожи коагулазонегативные стафилококкиимеют преимущество в качестве инфицирующих агентов перед другимимикроорганизмами [210]. При использовании катетеров в течение длительногопериода(домесяца иболее) наблюдаетсяиихинтралюминальноеинфицирование [19, 132, 171,].
Более редким (до 10%) является гематогенноеобсеменениекатетеров,характерноедляполучающиххимиотерапиюонкологических больных. [55, 96, 119, 170]ОсобенностямиКАИявляютсягетерогенностьвызывающейихмикрофлоры, тенденции к хронизации воспалительного процесса и низкаяэффективность консервативного лечения [72].Впоследнеевремяинтересисследователейкизучениюпроблеминфицирования имплантатов и катетеров связан с концепцией формированиябиопленок бактерий на искусственных поверхностях [90, 129], как своего родазащитного механизма, обеспечивающего оптимальные возможности развития приприкреплении их к поверхностям различных материалов [74, 134, 173, 181].Моделирование КАИ чаще всего осуществляется на лабораторных мышах,реже на крысах.Предложены различные способы моделирования катетер-ассоциированной инфекции. Обычно отрезок катетера помещают подкожно в7областьспинылибобоковойповерхностибрюшкаживотныхиливнутрибрюшинно [74, 134, 173, 181].
Чаще всего целью моделирования КАИявляется изучение метаболизма клеточных элементов биопленок и исследованиеответных иммунных реакций тканей и органов животных на введение катетера.Какправило,дляэтогоиспользуетсякомплексмикробиологических,цитологических и иммунологических методов [73, 82, 85]. Работы, целью которыхявляласьморфологическаяоценкаокружающихкатетертканей–немногочисленны [85, 125, 134]. Учитывая выраженное повышение устойчивостибактерий в биопленках к антибиотикам, для предупреждения образования такихструктур и их расщепления в последние годы интенсивно исследуютсявозможности применения новых химических препаратов, в том числе, новыхантибактериальных низкомолекулярных пептидных соединений [13, 41, 124].В Лаборатории биохимии развития микроорганизмов Института экологии игенетики микроорганизмов Уральского отделения РАН из сред культивированиябактерийS.warneriIEGMKL-1былвыделеннизкомолекулярныйантибактериальный катионный пептид варнерин.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
