Диссертация (1140386), страница 9
Текст из файла (страница 9)
В связи с этим они получили названиепсевдопилорической метаплазии.53Рисунок 14. Болезнь Крона. Хронический илеит с очагами псевдопилорическойметаплазии. Окраска гематоксилином и эозином х100.В группе НК изменения в слизистой оболочке подвздошной кишкихарактеризовались дистрофическими изменениями эпителия ворсин, при этомворсины сохраняли свои структурные характеристики, обнаруживалисьизменения отдельных ворсин в виде их незначительного укорочения.Воспалительныеизмененияхарактеризовалисьочаговымповышениемплотности клеточного инфильтрата с признаками активности в 8 из 12 случаев,которые носили очаговый и слабовыраженный характер. Обращало на себявнимание присутствие крупных участков лимфоидной ткани, в большинствеслучаев представленной крупными сливающимися лимфоидными фолликуламис реактивными центрами.54Рисунок 15.
Неклассифицированный колит. Незначительная деформация ворсин,очаговое повышение плотности клеточного инфильтрата, крупные сливающиесялимфоидные фолликулы с реактивными центрами. Окраска гематоксилином иэозином х100.В контрольной группе биопсийный материал подвздошной кишки, как правило,включал в себя слизистую оболочку только с собственной пластинкой, но вомногих случаях можно было увидеть подслизистый слой. Слизистая оболочкасостояла из ворсин, которые были либо в виде стройных пальцевидныхструктур, расположенных перпендикулярно мышечному слою, либо в виденаклоненных листовидных образований.
У основания ворсин располагалиськрипты – трубчатые железы, которые достигают мышечного слоя, аоткрываются между ворсинками. Основу собственной пластинки составляларыхлая волокнистая соединительная ткань. Собственная пластинка содержалагладкомышечные клетки, фибробласты, артериолы, венулы, капилляры,лимфоциты, нервные волокна и широкий спектр клеток, участвующих ввоспалительном ответе (рисунок 16). Ниже криптовой зоны располагалисьбокаловидные клетки, а по направлению к основанию крипт – находилисьединичные трапециевидные клетки с эозинофильными гранулами в апикальнойчасти (клетки Панета) и энтерохромафинные клетки (К.Sjojund и др.
1983)55Рисунок 16.Контрольная группа. Слизистая оболочка подвздошной кишки свысокими пальцевидными ворсинами, эпителий без признаков повреждения, наотдельных ворсинах уплощен, в собственной пластинке обнаруживаются одиночныекрупные лимфоидные фолликулы. Плотность и состав клеточного инфильтратасобственной пластинки не изменены. Окраска гематоксилином и эозином х100Сравнительная морфологическая характеристика поражения подвздошнойкишки в исследованных группах представлена в таблице 5.56Таблица 5. Сравнительная характеристика морфологических измененийподвздошной кишки в исследуемых группах.МорфологическиеБК (n=44)НК(n=22)признакиКонтрольнаягруппа(n=42)Лейкоцитыв 40/44(91%)8/22(36%)0/42эпителии ворсинДистрофические44/44(100%) 22/22(100%) 0/42изменениявэпителии ворсинДеформация ворсин41/44(93%)Повышение44/44(100%) 18/22(81%)0/42Деформация крипт40/44(91%)7/22(31%)0/42Криптит34/44(77%)7/22(31%)0/42Крипт-абсцессы24/44(55%)2/22(9%)0/42Перикриптальные5/44(11%)0/220/42Микрогранулемы6/44(14%)0/220/42Саркоидоподобные13/44(30%)0/220/4230/44(68%)18/22(81%)37/42 (88%)9/22(40%)0/42клеточногоинфильтратасобственнойпластинкигранулемыгранулемыЛимфоидныефолликулыбезреактивных центров57Лимфоидныефолликулы20/44(46%)18/12(81%)33/42(79%)32/44(73%)18/12(81%)38/42(90%)0/220/420/220/42среактивнымицентрамиЛимфоидныескопленияПсевдопилорическая 18/44(41%)метаплазияГиперкриния30/44(68%)Таблица 6.
Распределение чувствительности, специфичности и точностирассмотренных морфологических признаков в исследуемых группах.Морфологический признакчувствительность специфичностьточностьЛейкоциты в эпителии ворсин90,91%100%95,35%эпителии ворсин100,00%100%100,00%Деформация ворсин93,18%100%96,51%пластинки100,00%100%100,00%Деформация крипт90,91%100%95,35%Криптит77,27%100%88,37%Крипт-абсцессы54,55%100%76,74%Перикриптальные гранулемы11,36%100%54,65%Дистрофические изменения вПовышениеклеточногоинфильтратасобственной58Микрогранулемы13,64%100%55,81%Саркоидоподобные гранулемы 29,55%100%63,95%68,18%12%40,70%реактивными центрами45,45%21%33,72%Лимфоидные скопления72,73%10%41,86%метаплазия40,91%100%69,77%Гиперкриния68,18%100%83,72%Лимфоидные фолликулы безреактивных центровЛимфоидныефолликулысПсевдопилорическаяРезультаты ИГХ исследования с моноклональными антителами к CD68.Для поиска и выявления микрогранулем, а также для характеристикимакрофагов и гистиоцитов в слизистой оболочке подвздошной кишки мырешили использовать ИГХ исследование с антителом к CD68 для.В контрольной группе в слизистой оболочке подвздошной кишки CD68позитивныегистиоциты-макрофагирасполагалисьнепосредственноподбазальной мембраной покровного эпителия и формируют защитный клеточныйиммунный барьер слизистой оболочки.
Для структуры барьера характерноравномерное распределение клеток без формирования очаговых скоплений. Внорме макрофаги-гистиоциты можно обнаружить в центральных отделахлимфоидных фолликулов, в этом случае отмечается их гнездное расположениев виде отдельных клеток, которые при окраске гематоксилином и эозиноммогут иметь характеристику так называемого звездного неба. При болезниКрона в собственной пластинке слизистой оболочки обнаруживались очаговые59скопления с тесным компактным расположением позитивных клеток.Мы попробовали оценить биоптаты по наличию, количеству и размерамCD68 позитивных клеточных скоплений.Все обнаруженные CD68 позитивные скопления оценивались как мелкиеили крупные (до 10 клеток или занимающее площадь стромы неизменнойворсины расценивалось как мелкое, больше чем выше описанное – крупное).
Изоценки и подсчета исключались краевые участки и деформированные ворсины.Обязательно отмечалось расположение скоплений в зоне лимфоидной ткани(лимфоидных скоплений) или вне ее.Таблица 7. Обнаружение CD68-позитивных скоплений в биоптатах слизистойоболочки подвздошной кишки при проведении иммуногистохимическойреакции с антителом CD68.Результаты ИГХ исследованияБКНККонтрольнаягруппаОдиночныемелкие 3030крупные 1500мелкие 42017017/220/42скопленияОдиночныескопленияМножественныескопленияСливающиеся инфильтраты 5из гистиоцитов-макрофаговОтсутствиеCD68позитивныхклеточных 14/44скоплений60Отсутствие CD68 позитивных клеточныхскопленийСливающиеся инфильтраты изгистиоцитов-макрофаговМножественные мелкие скопленияОдиночные крупные скопленияОдиночные мелкие скопления05Контрольная группа1015НК202530354045БКРисунок 18.
Частота обнаружения CD68 позитивных скоплений в исследуемыхгруппах.У больных БК отмечалось более высокое содержание скоплений CD68позитивных клеток. Только при болезни Крона можно было обнаружить какмелкие, так и крупные скопления (которые в большинстве случаевсоответствовали саркоидным гранулемам), а также сливающиеся крупныенеправильной формы инфильтраты из гистиоцитов-макрофагов. Одиночныемелкие скопления мы смогли обнаружить и в отдельных случаях у больных сНК.В биоптатах слизистой оболочки подвздошной кишки с помощью ИГХ реакциис антителом CD68 мы смогли подтвердить наличие гранулем, а в сложных исомнительных случаях дополнительно обнаружить гранулемы и отдельнорасположенные гигантские многоядерные клетки.61Рисунок 19. Болезнь Крона.
Повышение содержания CD68 позитивных гистиоцитов ввоспалительном инфильтрате и субэпителиальных отделах с формированиемодиночных мелких скоплений. Иммуногистохимическая реакция с моноклональнымантителом CD68 х100.Рисунок 20. Болезнь Крона. Повышение содержания CD68 позитивных гистиоцитов ввоспалительном инфильтрате и субэпителиальных отделах с формированием крупныхсливающихся скоплений. Иммуногистохимическая реакция с моноклональнымантителом CD68 х100.62Рисунок 21. Болезнь Крона. Обнаружение CD68 позитивной гигантскоймногоядерной клетки в зоне лимфоидного скопления. Иммуногистохимическаяреакция с моноклональным антителом CD68 х100.Рисунок 22. Контрольная группа.
Равномерное распределение отдельных CD68позитивных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки и в зонелимфоидного фолликула. Иммуногистохимическая реакция с моноклональнымантителом CD68 х100.Таким образом, ИГХ реакция с антителом к CD68 позволила точнее оценитьколичество и характер распределения гистиоцитов-макрофагов. Подтвердитьналичие гранулем, включая микрогранулемы, гистиоцитарные гранулемы и63отдельные гигантские многоядерные клетки. Обнаружить сливающиесянеправильнойформыскоплениягистиоцитов-макрофагов,которыепорезультатам нашего исследования обнаруживались исключительно при болезниКрона.ОбсуждениеРезультаты гистологического исследования биопсий подвздошной кишки невсегда позволяют установить диагноз БК, однако, по данным, полученным входе нашего исследования, в большинстве случаев они играют ключевую рольв диагностике БК – диагноз может быть поставлен на основе толькогистологических характеристик, даже в случае отсутствия обнаружениямакроскопических изменений при эндоскопическом исследовании.Для морфологической верификации необходимо проводить исследование т.н.«лестничных» биопсий подвздошной и толстой кишки.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
