Автореферат (1140372), страница 3
Текст из файла (страница 3)
агаровой основы (Колумбийский агар) иготовили на водяной бане; раствор автоклавировали в течение 15 мин при температуре 120оС; 100 мл готового бараньего гемоглобина подогревали на водяной бане до 500о С.После извлечения из автоклава раствор со средой остужали примерно до 50 оС, а затемсмешивали с добавлением 2 мл ростовой добавки «IsoVitalex», 1 мл селективной добавки игемоглобином.Идентификацию выделенных микробов проводили по культуральным, морфологическим,тинкториальным и биохимическим свойствам. По результатам первичного посева и данныхмикроскопиипроводилидифференциациюкультурнаграмположительныеиграмотрицательные кокки или палочки. Для идентификации грамположительных кокков наосновании характера роста на кровяном агаре, данных морфологии и наличия каталазнойактивности использовали тест-систему «BBL CRYSTAL GPID» (Бектон-Диккенсон, США).
Дляидентификации грамотрицательных бактерий, ферментирующих и неферментирующихглюкозу, использовали тест-систему «BBL CRYSTALE/NFID» (Бектон-Диккенсон, США). Дляопределения подвижности культур проводили посевы на полужидкий агар. Для приготовлениябактериальной суспензии использовали 18-24 часовые культуры микробов, выросшие накровяном агаре.В настоящее время большинство исследований при определении чувствительностимикробов к антибиотикам руководствуются стандартами Национального комитета поклиническим лабораторным стандартам США (NCCLS) и отечественными методическимиуказаниями МЗ РФ: МУК 4.2.1890-04.
Вследствие этого, исследования по чувствительности8микробов к АМП и интерпретацию полученных результатов проводили в соответствии с этимирекомендациями. Использовали стандартизированный метод оценки — диско-диффузионный.Диско-диффузионный метод (метод Кирби-Бауэра) основан на феномене ингибицииантибиотиком поверхностного, видимого роста микробов на плотной (агаровой) питательнойсреде. Для тестирования чувствительности выделенных штаммов УПМ к антибиотикамиспользовали:агар Мюллера-Хинтона II (Бектон-Диккенсон, США);агар Мюллера-Хинтона II (Бектон-Диккенсон, США) с 5% крови барана;Для приготовления инокулюма использовали 18-20-ти часовые агаровые культуры или5-6 часовые бульонные культуры исследуемых микробов, из которых готовили бактериальныесуспензии, соответствующие стандарту мутности 0,5 по МакФарланду, что, примерно,составляет 1,5х108 КОЕ/мл.
Коммерческими стерильными ватными тампонами наносилиинокуляты на чашки Петри с питательными средами. Параллельно из инокулята делали высевна плотные питательные среды для проверки чистоты культуры. Инокулированные чашкиинкубировали в атмосферных условиях при температуре 350С в течение 18-20 часов. Чашки сагаром Мюллера-Хинтона II с добавлением 5% крови инкубировали в СО2-инкубаторе.Приопределении чувствительности использовали стандартизированные качественные диски фирмBio-RadTM и BDTM (США). Для внутреннего контроля качества определения чувствительности влаборатории использовали контрольные штаммы микробов. В данном исследованиииспользовались контрольные штаммы Американской коллекции типовых культур (АТСС).Статистические методы исследованияСтатистический анализ проводился в системе статистического анализа SAS (программныйпакет SAS Institute, США, версия 8.02 для WindowsXP). Описание количественных признаковпредставлено в виде среднего значения ± стандартное квадратическое отклонение.Описательная статистика была выполнена для всех анализируемых показателей в зависимостиот типа переменной: при анализе качественных показателей определялась частота и доля % отобщего числа случаев, при анализе количественных показателей – среднее арифметическое,стандартное отклонение, минимальное и максимальное значение, медиана.
Расчет проводилсядля каждой группы пациентов, и для всех в целом. Достоверность различий средних величиноценивалась с использованием t-критерия Стьюдента. Для выявления степени взаимосвязимежду изучаемыми параметрами использовался χ2- критерий. «Нулевая гипотеза» оботсутствии различий между сравниваемыми выборками отвергалась при уровне значимостиp<0,05.ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫВозбудители нозокомиальных пневмоний у онкохирургических пациентов и ихчувствительность к антибиотикамВозбудители нозокомиальных пневмоний у онкохирургических пациентовИз образцов БАЛ было выделено 312 изолятов микроорганизмов, из них: 140 штаммовграмотрицательных, 78 штаммов грамположительных бактерий и 94 штамма грибов родаCandida. Спектр выделенных микроорганизмов представлен на рисунке 1 и в табл. 1-4.9Грамположительныебактерии 25%Грамотрицательныебактерии ; 45%Грибы родаCandida; 30%Рисунок 1.
Удельный вес различных микроорганизмов в микробном пейзаже нижних дыхательных путей у больных НПКак видно из приведенных данных, наиболее частыми возбудителями НП у онкологическихбольных хирургического профиля являлись грамотрицательные бактерии (44,8%), на второмместе оказались грибы рода Candida (30,2%), а грамположительные бактерии выделялись лишьу каждого четвертого пациента, обследованного нами (25%).Таблица 1.Грамотрицательные микроорганизмы, выделенные от больных с НПМикроорганизмКоличество штаммовабс.%Pseudomonas аeruginosa5438Acinetobacter spp.2619Klebsiella spp.2619Escherichia coli2216Sternotrophomonas maltophilia64Serratia spp.64Всего:140100Как показали дальнейшие исследования, среди грамотрицательных микроорганизмовдоминировали неферментирующие грамотрицательные бактерии: Pseudomonas aeruginosa,Acinetobacter spp., Stenotrophomonas maltophilia, которые выделялись у 38%, 19% и 6% (соответственно) больных.
Энтеробактерии - Klebsiella spp. и E. сoli - встречались у 19% и 16%(соответственно) обследованных нами больных.10Таблица 2.Грамположительные микроорганизмы, выделенные от больных с НПМикроорганизмКоличество штаммовEnterococcus faecalisабс.32%41Staphylococcus aureus2431Staphylococcus epidermidis1215Streptococcus pyogenes1013Всего:78100Как показали наши исследования, среди грамположительных бактерий преобладали E.faecalis и S. aureus (41% и 31%, соответственно); несколько реже возбудителями НП являлись S.epidermidis и S. pyogenes (15% и 13%, соответственно).Таблица 3.Дрожжевые грибы, выделенные от больных с НПМикроорганизмКоличество штаммовCandida albicansабс.54%57Candida tropicalis1415Candida glabrata1415Candida crusei1213Всего:94100Среди грибов наиболее часто встречалась C.
albicans (57%), гораздо реже встречались C.tropicalis (14%), C. glabrata (14%), C. crusei (12%).В 13% случаев(20 пациентов), НП была вызвана ассоциацией микроорганизмов.Количество и структура микробных ассоциаций представлена в таблице 4.Таблица 4.Варианты микробных ассоциаций при НП у онкохирургических больныхВозбудительP.aeruginosa+ C.
albicansE.coli + E.faecalisP.aeruginosa + E.coli + E.faecalisP.aeruginosa + E.coliE.faecalis + P.aeruginosa + S. maltophilia11Всегоn%6621130301055E.faecalis+ S.maltophiliaA. baumani + P.aeruginosaE.coli + S.aureusE.coli + K.pneumoniaeИтого1111205555100Чувствительность возбудителей нозокомиальных пневмоний к антимикробнымпрепаратамВсе полученные нами данные об активности антибактериальных и антифунгальныхпрепаратов в отношении выделенных микроорганизмов представлены в таблицах 5 – 7.Таблица 5.Активность антибактериальных препаратов в отношенииграмотрицательных неферментирующих бактерийБактерии Категория Цефуроксим Цефотаксим Цефтазидим Цефепим Имипенемчувствительности, %P.aeruginosaS.maltophiliaAcinetobacter spp.БактерииPs.aeruginosaS.maltophiliaAcinetobacter spp.S--5090,790,7IRS--50-9,3-9,3-IRS19,219,25050505010061,5IR80,880,8505038,5Категория Ампициллин Тикарциллин/Гентамицин Амикацин Ципрофлоксацинчувствител /клавуланатьности, % сульбактамS-25,9-5050IRS-74,1--50-50-IRS--11,516,783,311,516,783,37,7IR100505088,588,592,3Такимобразом,наибольшуюактивностьвотношениинеферментирующихграмотрицательных бактерий продемонстрировали противомикробные препараты следующих12групп - цефалоспорины 4 поколения (цефепим), карбапенемы (имипенем).
Антимикробныепрепаратыдругих групп(цефалоспорины 3 поколения, ингибиторзащищенныеполусинтетические пенициллины, фторхинолоны, аминогликозиды) показали гораздо меньшуюактивность.Таблица 6.Активность антибактериальных препаратов в отношениибактерий группы кишечной палочкиБактерии Категория Цефуроксим Цефотаксим Цефтазидим Цефепим Имипенемчувствительности, %KlebsiellaS2580,8100100spp.IR7519,2E.
coliS5061,690,9100IR5038,49,1SerratiaS5083,3100spp.IR1005016,7Бактерии Категория Ампициллин/ Тикарциллин Гентамицин Амикацин Ципрофлоксацинчувствитель сульбактам /ности, %клавуланатKlebsiellaS757510084,6spp.IR252515,4E. coliS81,890,986,410090,9I9,19,1R9,113,69,1SerratiaS83,310083,3100100spp.I16,7R16,7Из приведенных в таблице данных следует, что высокую активность в отношении бактерийгруппы кишечной палочки демонстрировали практически все клинически значимые группыантибактериальных препаратов - цефалоспорины 3 и 4 поколения (цефтазидим, цефепим),карбапенемы (имипенем), аминогликозиды (амикацин, гентамицин), ингибиторзащищенныеполусинтетические пенициллины (ампициллин/сульбактам, тикарциллин/клавуланат). Высокийуровень устойчивости отмечался к цефалоспоринам 2 поколения (цефуроксим).13Таблица 7.Активность антибактериальных препаратов в отношенииграмположительных бактерийБактерии Категория Эритромицин Клиндамицин Доксициклин Оксациллин Левофлоксацинчувствительности, %E.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
