Диссертация (1140276), страница 20
Текст из файла (страница 20)
В эксперименте приишемическом инсульте (30-минутная окклюзия средней мозговой артерии споследующей реперфузией) с использованием самцов Faim2-дефицитных мышейпоказано, что ЭПО уменьшает гибель нейронов в очаге повреждения [186].Эффект ЭПО более выражен в разовой дозе 5 000 ЕД/кг (трехкратно) посравнению с дозой 90 000 ЕД/кг и опосредован стимуляцией фосфатинозитол-3киназа/Akt пути (PI3K/Akt), который регулирует экспрессию Faim2.(б) ЭПО стимулирует функцию нейронов и улучшает их жизнеспособностьчерез активацию кальциевых каналов и высвобождение нейромедиаторов.Возникает вполне закономерный вопрос о механизме возможного прямогонейротропного действия ЭПО, учитывая, что ЭПО – это крупные молекулымассой 34 кДа, которые обычно не пересекают гематоэнцефалический барьер.Однако в отношении ЭПО принято считать, что он способен проникать черезгематоэнцефалический барьер с помощью специфических рецепторов наповерхности эндотелиоцитов церебральных сосудов [117].
Указанные рецепторыдля ЭПО экспрессируются в физиологических условиях и в гораздо большейстепени – в условиях церебральной ишемии. Так, при экспериментальномишемическом инсульте максимальная экспрессия ЭПО на ранних этапахвыявляется в области пенумбры и в меньшей степени в области «ядра» инфаркта,позднее – преимущественно в реактивных астроцитах и в меньшей степени в123капиллярах пенумбры [229].
Показано, что эффекты ЭПО в нервной ткани, покрайней мере, частично зависят от ее прайминга провоспалительнымицитокинами, например, ТНФ-альфа [280, 281]. Интересно, что наличие в очагеишемического повреждения таких провоспалительных цитокинов, как ТНФальфа, усиливает защитные эффекты ЭПО и VEGF на нейроны послеишемического повреждения [272].(в)ЭПО активирует созревание и дифференцировку олигодендроглии ипролиферацию астроцитов, а также оказывает антиапоптический эффект наклетки микроглии [269].3.Учитывая, что ведущим механизмом нарушения неврологическогостатуса при ИКГМ является ограничение кровотока в коре головного мозга вобласти кровоснабжения средней мозговой артерии (пре- и постцентральнаяизвилины),необходимоотметитьспособностьЭПОстимулироватьнеоангиогенез.
В церебральных капиллярах имеется большое количестворецепторов к ЭПО. Выявлена способность ЭПО дозозависимо стимулироватьмитоз эндотелиальных клеток [293].4. Антиоксидантный эффект ЭПО в нервной ткани. ЭПО являетсяантагонистом глутамата, увеличивает активность антиоксидантных ферментов,регулируетпродукциюсвободнорадикальныеиндуцированнуюнейромедиаторов,процессыактивацию[216,247].тормозитЭПОNMDA-рецепторов,NO-зависимыеингибируетснижаягипоксия-темсамымэксайтотоксичность и активацию кальций-глутаматного каскада.
ЭПО приводит кистощению запасов железа, в условиях активации эритропоэза основнымпотребителемкотороговыступаютэритроидныеклетки-предшественникикостного мозга. Дефицит железа является фактором ограничения реакцийсвободнорадикального окисления и повреждения нейронов, особенно в моментреперфузии.5.ПротивовоспалительныйэффектЭПО.Одинизмеханизмовнейропротекторного действия ЭПО при ишемии головного мозга связан сповышениемэкспрессииматрикснойметаллопротеиназы-2иактивации124пролиферативных процессов и неоангиогенеза на этапе восстановления тканей[302,303].РанеенейропротекторныеОсиковымэффектыМ.В.ЭПОвисоавторамиотношениизафиксированыкогнитивногоипсихофизиологического статуса, функциональной активности вегетативнойнервной системы у больных с терминальной стадией хронической болезни почек[53, 55].
ЭПО при ХПН проявляет противовоспалительную активность – снижаетконцентрациюпровоспалительныхцитокинов,лабораторныепризнакисистемного воспалительного ответа.Однако следует учитывать, что применение ЭПО как нейропротекторногоагента при церебральной ишемии значительно ограничивают побочные эффекты,прежде всего, развитие артериальной гипертензии и тромбозов через 2–16 недельпосле применения, причем независимо от количества эритроцитов в крови, а всвязи с увеличением концентрации внутриклеточного кальция и сниженияпродукции оксида азота (II) [277].
В этом отношении интерес могут представлятьпрепаратыкарбамилированногоЭПО,которыйневзаимодействуетсклассическим ЭПО-рецептором , но сохраняет цитопротекторные свойства [136].В условиях применения ЛИ при экспериментальной ИКГМ интегральныйпоказатель неврологического статуса повышается на 3 сутки и восстанавливаетсятолько к 30 суткам наблюдения; максимальный эффект на ориентировочноисследовательское поведение зафиксирован на 14 и 30 сутки, вертикальнаяактивность восстанавливается начиная с 7 суток, исследовательская активность –на 30 сутки.
Таким образом, восстановление неврологического статуса наступаетпозднее по сравнению с эффектом применения ЭПО при ИКГМ.При экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИ в очагеповреждения во все сроки наблюдения увеличивается количество интактныхнейронов, экспрессия VEGF, снижается – нейронов с хроматолизом и клетоктеней; на 7, 14 и 30 сутки увеличивается количество мелких кровеносных сосудови сокращается площадь инфаркта. Максимальная выраженность эффектов ЛИнаблюдается на 30 сутки.
По данным корреляционного анализа, количествомелких кровеносных сосудов в очаге повреждения нарастает по мере увеличения125экспрессии VEGF. Итак, нейропротекция в условиях применения ЛИ фиксируетсяв очаге ишемии мозга на более поздних этапах.В условиях применения ЛИ при ИКГМ на 7 и 14 сутки снижается в кровиобщее количество лейкоцитов за счет лимфоцитов, частично восстанавливаетсяобщее представительство лейкоцитов и лимфоцитов. Количество эритроцитов идругие показатели «красной крови» не изменяются, сохраняются признакианемии.По результатам собственного исследования, а также по данным литературы,механизм нейропротекторного действия ЛИ при ишемических поражениях ЦНСможет быть представлен несколькими компонентами.1. Стимуляция неоангиогенеза в нервной ткани за счет повышенияэкспрессии VEGF, что наиболее выражено в эндотелиоцитах мелких кровеносныхсосудов [16, 17, 19, 20, 139, 153].2.
Активация метаболизма и предотвращение гибели нейронов и астроглиив очаге повреждения [220]. ЛИ через изменение состояния цитоплазмы нейронов(переход цитогеля в цитозоль) и повышение концентрации Са2+ приводит кактивации Са2+-зависимых ферментов, синтезу факторов роста и другихцитокинов [47, 48]. Для ускорения нейропластических процессов после ишемииЦНС имеет значение улучшение дренирования ликвора после лазеротерапии [244,245].3. Активация функции митохондрий и утилизации кислорода в нейронах[159].
В том числе в связи с повышением активности ферментов дыхательнойцепи, а также опосредованно через повышение деформабильности эритроцитов,сродства гемоглобина к кислороду, через уменьшение вязкости крови и какследствие улучшение доставки кислорода в очаг ишемического повреждениямозга.4. Полагают, что применение ЛИ после церебральной ишемии ограничиваетвоспалительный процесс, инфильтрацию очага лейкоцитами, площадь вторичнойальтерации (пенумбры) [253]. Возможно, это связано с антиоксидантнымэффектом ЛИ, фиксируемым по снижению содержания МДА, повышению126активностиферментовантиокислительнойзащиты–СОД,каталазы,глутатионпероксидазы [179].Учитывая нейропротекторный эффект ЭПО и ЛИ как монотерапии приИКГМ, мы провели исследование эффективности комбинированного примененияЭПО и ЛИ.При экспериментальной ИКГМ в условиях комбинированногоприменения ЭПО и ЛИ во все сроки наблюдения увеличивается, а с 14 сутокнаблюденияполностьювосстанавливаетсяинтегральныйпоказательневрологического статуса; на 3, 7, 14 сутки частично, а на 30 сутки полностьювосстанавливаетсяориентировочно-исследовательскоеповедениеживотных.Показатель микроциркуляции в очаге ишемического повреждения увеличиваетсяво все сроки наблюдения и полностью восстанавливается на 14 и 30сутки эксперимента.
Итак, неврологический статус и микроциркуляция в очагеишемии восстанавливаются в те же сроки, что и в условиях монотерапии ЭПО, ноне ЛИ.При экспериментальной ИКГМ в условиях комбинированного примененияЭПО и ЛИ в очаге повреждения во все сроки наблюдения увеличиваетсяколичество интактных нейронов, глиоцитов, мелких кровеносных сосудов,снижаетсяколичествоплощадьинфаркта.хроматолизом,Количествоклеток-тенейа мелких кровеносныхКоличествомелкихна3014инейроновиЛИколичестваинфарктаКромевосстановлениевпервыенавсехклеток-теней,нейронов,срокахсосудовстановитсяповрежденныхтого,интактныхкровеносныхсуткиначинаетсяхроматолизом,нейроновнаблюдениясчастично,сосудов – с 7 суток полностью восстанавливается.ложнооперированных животных.ЭПОсраньше,идажеколичествобольше,чемглиоцитоввгруппеИтак, при комбинированном применениимелкихкровеносныхнейроновчемзафиксированоприисосудов,сокращениемонотерапииувеличениеЭПОколичестваснижениеплощадиилиЛИ.глиоцитовв очаге ишемического повреждения, что может иметь значение в трофике ирегенерации зоны повреждения.127При экспериментальной ИКГМ в условиях комбинированного примененияЭПО и ЛИ в крови на 3, 7, 14 сутки повышается количество эритроцитов,снижается средний эритроцитарный объем, на 7 и 14 сутки повышаетсяконцентрация гемоглобина и гематокрит; максимальные изменения показателейнаблюдаются на 7 сутки.
Количество эритроцитов, концентрация гемоглобинаи гематокрит полностью восстанавливаются с 3 суток наблюдения. На 3,7, 14 сутки в крови снижается общее количество лейкоцитов за счетнейтрофиловилимфоцитов,данныепоказателина3и7суткивосстанавливаются частично, а на 14 и 30 сутки – полностью. Итак,системныегематологическиеизмененияприИКГМкорригируютсяуже на 3 сутки эксперимента для «красной крови» и на 14 суткидляколичествалейкоцитов,что,вероятно,отражаетпозитивныйход событий в очаге ишемии, нейропротекцию и ограничение площадиинфаркта.Полученныерезультатыпоклиническим,морфологическимизменениямприпредполагаемыемеханизмынейропротекторногоЛИотраженынаинструментальным,экспериментальнойинтегральнойсхемеИКГМ,действия(рисунок9).атакжеЭПОКакивидно,общим в механизме нейропротекторного действия как ЭПО, так и ЛИвыступаетмелкихулучшениекровеносныхколичестваинтактныхснижениеколичествачастичномумикроциркуляциисосудоввнейроноввосстановлениюочагеилейкоцитовзасчетувеличенияповреждения,восстановлениеуменьшениеплощадивчтокрови,неврологическогоиколичестваинфаркта,приводиткэтологическогостатуса.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
