Диссертация (1140276), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Количество интактных нейронов, нейронов схроматолизом,клеток-тенейнавсехсрокахнаблюдениявосстанавливается, а количество мелких кровеносных сосудовчастичнос 7 сутокполностью восстанавливается. При этом количество мелких кровеносных сосудови количество глиоцитов в очаге ишемического повреждения на 14 и 30 суткиэксперимента становится больше, чем в группе ложнооперированных животных.Отметим, что в условиях комбинированного применения ЭПО и ЛИ впервыезафиксировано увеличение количества глиоцитов в очаге ишемическогоповреждения, чего не наблюдалось в условиях монотерапии ЭПО илимонотерапии ЛИ.РезультатыоценкиэкспрессииVEGFвочагеповрежденияприэкспериментальной ИКГМ в условиях комбинированного применения ЭПО и ЛИпредставлены в таблице 28. На 3 сутки наблюдения экспрессии VEGF в очаге110статистически значимо возрастает на 59% (по медиане относительно животных сИКГМ без терапевтического воздействия), на 7 сутки – на 54%, на 14 сутки – на43%, на 30 сутки – на 43%.
По сравнению с группой ложнооперированныхживотных экспрессия VEGF при ИКГМ в условиях комбинированногоприменения ЭПО и ЛИ значимо (р<0,01) возрастает во все сроки наблюдения.Такимобразом,приэкспериментальнойИКГМвусловияхкомбинированного применения ЭПО и ЛИ экспрессия VEGF в очагеишемического повреждения возрастает и становится выше, чем в группеложнооперированных животных на 3, 7, 14 и 30 сутки наблюдения.Таблица 28Влияние комбинированного применения эритропоэтина и лазерногоизлучения на экспрессию VEGF в очаге повреждения приэкспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3], количество клеток / у.е.
площади)Группыживотных1. Ложнооперированные2. ИКГМ3 сутки7 сутки14 сутки8,50[7,00; 9,00]13,50[12,75; 15,0]9,50[8,00; 10,00]19,50[18,0; 20,25]10,0010.00[8,75; 11,25] [10,00; 12,00]30,0039,50[28,75; 31,00] [38,00; 41,25]5. ИКГМ + ЭПО +ЛИ21,50[20,75; 23,0]32,00[32,0; 38,0]43,0056,50[41,75; 44,25] [49,75; 59,25]Различия(критерий Манна–Уитни)P1-2<0,001P1-5<0,001P2-5<0,001P1-2<0,001P1-5<0,001P2-5<0,001P1-2<0,001P1-5<0,001P2-5<0,0130 суткиP1-2<0,001P1-5<0,001P2-5<0,0013.4.4 Влияние комбинированного применения эритропоэтина и лазерногоизлучения на гематологические показатели крови при экспериментальнойишемии коры головного мозгаПервоначально исследовали влияние комбинированного применения ЭПО иЛИ при ИКГМ на показатели «красной крови».
Результаты представлены втаблице 29. На 3 сутки эксперимента в крови значимо увеличивается количество111эритроцитов на 51% (по медиане относительно группы животных с ИКГМ безтерапевтического воздействия), снижается средний эритроцитарный объем на11%, другие показатели статистически значимо не изменяются. 7 суткинаблюдения характеризуются повышением в крови количества эритроцитов (на72%), концентрации гемоглобина (на 28%), гематокрита (на 22%), снижениемсреднего эритроцитарного объема (на 20%). На 14 сутки экспериментаувеличивается количество эритроцитов (на 39%), концентрация гемоглобина (на6%), снижается средний эритроцитарный объем (на 19%).
На 30 суткиэксперимента все исследуемые показатели «красной крови» статистическизначимо не изменяются.При сравнении с группой ложнооперированных животных на 3 суткиэкспериментальной ИКГМ в условиях комбинированного применения ЭПО и ЛИзначимо (р<0,01) повышается гематокрит, средняя концентрация гемоглобина вэритроцитах, на 7 сутки экспериментаповышается количество эритроцитов,снижается средний эритроцитарный объем, на 14 сутки повышается количествоэритроцитов, снижается средний эритроцитарный объем, среднее содержаниегемоглобина в эритроците, на 30 сутки нет значимых отличий.Влияние комбинированного применения ЭПО и ЛИ при ИКГМ напоказатели «белой крови» представлено в таблице 30.
Как видно, на 3 суткиэксперимента в крови статистически значимо снижается общее количестволейкоцитов (на 25% по медиане относительно группы животных с ИКГМ безтерапевтического воздействия), количество нейтрофилов (на 33%), количествомоноцитов (на 20%). На 7 сутки наблюдения выявлено снижение общегоколичества лейкоцитов (на 61%), количества нейтрофилов (на 55%), количествамоноцитов (на 62%). Аналогичные по направленности изменения зафиксированына 14 сутки эксперимента: снижение общего количества лейкоцитов (на 33%),количества нейтрофилов (на 38%), количества моноцитов (на 36%). На 30 суткидостоверно снижается только количество нейтрофилов (на 47%). Количествотромбоцитов в крови значимо не изменяется во все сроки наблюдения.Таблица 29Влияние комбинированного применения эритропоэтина и лазерного излучения на гематологические показателипри экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)7 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)14 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)RBC,1012/л5,59[4,12-7,01]7,65[5,74-8,91] *5,9510,24[5,21-6,74] [8,12-11,87] *8,44[7,81-8,97]9,02[8,33-9,79]9,64[9,12-10,53]HGB,г/л130,7[121,2-155,1]148,2[133,4-158,6]35,2[33,5-42,1]39,3[33,2-45,9]155,7[151,0157,3]47,8[44,2-49,7]162,1[155,6167,8]49,0[46,1-50,7]159,4[141,9-172,1]HCT,%123,2[121,0127,3]40,1[38,2-46,7]MCV,фл62,96[57,13-72,0]55,84[52,0369,24] *20,37[18,08-23,65]158,2[147,7161,3] *48,9[38,8-49,4]*11,79[10,1512,96] *165,2[143,1177,4] *49,7[44,2-54,8]48,8[44,2-54,9]63,1950,6255,7245,1853,9551,22[44,01[52,01[48,64-54,17][57,83[48,24[50,8174,39]59,16] *61,11]53,21] *58,81]17,21MCH,22,5118,4717,8818,0415,1418,29пг[19,04-23,97][15,22[17,19-20,35][17,42[14,72-19,54][18,02[16,14-20,01]19,88]21,53]22,31]MCHC,35,1336,6529,1332,0132,5234,9832,9933,15г/дл[31,87-37,92] [32,22-39,78][26,15[27,96-32,91][30,41[31,55-35,41][29,73[30,49-35,41]33,21]35,89]31,72]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 1; RBC – эритроциты, HGB – гемоглобин, HCT – гематокрит,MCV – средний объем эритроцита, MCH – среднее содержание гемоглобина в эритроците, MCHC – средняя концентрациягемоглобина в эритроцитах.Таблица 30Влияние комбинированного применения эритропоэтина и лазерного излучения на гематологические показателипри экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])ПоказателиWBC,109/лNeu,109/лLymph,109/лMon,109/лPLT,109/л3 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)16,27[13,3724,08]12,31[11,5114,01] *3,052,02[2,53[1,76-2,99] *8,27]9,8612,37[12,01- [8,12-12,87] *17,62]0,510,46[0,46[0,35-1,11]0,99]596638[554-672][589-649]7 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО+ЛИ (n=10)(n=5)14 суткиГруппа 5.Группа 2.ИКГМИКГМ+ЭПО(n=5)+ЛИ (n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 5.ИКГМИКГМ+ЭПО+ЛИ (n=10)(n=5)28,45[19,6431,42]11,03[9,7312,89] *12,53[11,2216,75]8,48[7,33-10,22] *8,88[8,02-11,46]7,71[5,31-9,07]4,74[3,95-6,22]2,13[1,69-3,01] *2,41[1,91-2,92]1,48[1,21-2,11] *1,92[1,38-2,77]1,49[1,11-2,05] *22,98[18,3429,92]0,47[0,46-0,99]8,55[6,12-9,34] *9,81[8,21-14,02]6,33[5,47-7,84] *6,67[5,21-8,94]5,88[4,69-6,69]0,64[0,41-0,93]0,41[0,29-0,68]0,62[0,41-0,94]0,31[0,20-0,41]0,41[0,28-0,93]622[595-654]614[572-648]641[605-682]592[541-664]651[583-697]612[579-682]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; WBC – лейкоциты, Neu – нейтрофилы, Lymph – лимфоциты, Mon –моноциты, PLT – тромбоциты.114По сравнению с группой ложнооперированных животных на 3 и 7 суткиИКГМ в условиях комбинированного применения ЭПО и ЛИ наблюдаютсяследующие отличия: повышение в крови общего количества лейкоцитов,количества лимфоцитов и моноцитов, на 7 и 14 сутки – повышение количествамоноцитов, на 30 сутки – повышение количества нейтрофилов.Такимобразом,приэкспериментальнойИКГМвусловияхкомбинированного применения ЭПО и ЛИ в крови на 3, 7, 14 сутки повышаетсяколичество эритроцитов, снижается средний эритроцитарный объем, на 7 и 14сутки повышается концентрация гемоглобина и гематокрит; максимальныеизменения показателей наблюдаются на 7 сутки эксперимента.
Количествоэритроцитов,концентрациягемоглобинаигематокритполностьювосстанавливаются с 3 суток наблюдения. На 3, 7, 14 сутки в крови снижаетсяобщее количество лейкоцитов за счет нейтрофилов и лимфоцитов, данныепоказатели на 7 сутки восстанавливаются частично, а на 14 и 30 суткиэксперимента – полностью.Полученные нами результаты при экспериментальной ИКГМ в условияхкомбинированного применения ЭПО и ЛИ в целом являются отражениемотмеченного в разделах 3.2 и 3.3 нейропротекторного действия как ЭПО, так иЛИ по отдельности и демонстрируют синергичный эффект ЭПО и ЛИ,применяемых в комбинации. Так, частичное или полное восстановлениеневрологическогоиэтологическогостатусасвязанысулучшениеммикроциркуляции, увеличением количества мелких кровеносных сосудов в очагеишемического повреждения, в том числе в связи с повышением экспрессии VEGFиактивациейнеоангиогенеза.Улучшениекислородообеспечениязоныишемического повреждения головного мозга приводит к увеличению in situколичестваинтактныхнейроновиглиоцитов,снижениюколичестваповрежденных нейронов (с хроматолизом, клеток-теней), сокращению площадиинфаркта.
Уменьшение площади основной зоны ишемии, а также зоны пенумбрыприводит к снижению выраженности системных гематологических проявлений,прежде всего нейтрофильного лейкоцитоза, а также восстановлению количества115эритроцитов и эритроцитарных индексов, в том числе за счет эритропоэтическогоэффекта ЭПО.Выводы по разделу 3.41.При экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЭПО и ЛИ вовсе сроки наблюдения увеличивается, а с 14 суток наблюдения полностьювосстанавливается интегральный показатель неврологического статуса; на 3, 7, 14сутки частично, а на 30 сутки полностью восстанавливается ориентировочноисследовательскоеповедениеживотных;показательмикроциркуляцииувеличивается во все сроки наблюдения и полностью восстанавливается на 14 и30 сутки эксперимента.2.ПриэкспериментальнойИКГМвусловияхкомбинированногоприменения ЭПО и ЛИ в очаге повреждения во все сроки наблюденияувеличивается количество интактных нейронов, глиоцитов, мелких кровеносныхсосудов, снижается количество нейронов с хроматолизом, клеток-теней, площадьинфаркта.
Количество интактных нейронов, нейронов с хроматолизом, клетоктеней на всех сроках наблюдения частично, а мелких кровеносных сосудов – с 7суток полностью восстанавливается. Количество мелких кровеносных сосудов иколичество глиоцитов на 14 и 30 сутки становится больше, чем в группеложнооперированных животных.3.ПриэкспериментальнойИКГМвусловияхкомбинированногоприменения ЭПО и ЛИ в крови на 3, 7, 14 сутки повышается количествоэритроцитов, снижается средний эритроцитарный объем, на 7 и 14 суткиповышается концентрация гемоглобина и гематокрит; максимальные измененияпоказателей наблюдаются на 7 сутки.
Количество эритроцитов, концентрациягемоглобина и гематокрит полностью восстанавливаются с 3 суток наблюдения.На 3, 7, 14 сутки в крови снижается общее количество лейкоцитов за счетнейтрофилов и лимфоцитов, данные показатели на 3 и 7 сутки восстанавливаютсячастично, а на 14 и 30 сутки – полностью.116ЗАКЛЮЧЕНИЕИшемическийинсультидругиецереброваскулярныезаболеванияпредставляют серьезную медико-социальную проблему как в РФ, так и в мире.Заболеваемость ишемическим инсультом не имеет тенденции к снижению, вноситсущественный вклад в смертность и инвалидизацию населения.В последние годы достигнут значительный прогресс в пониманиимолекулярных механизмов ишемического и реперфузионного повреждениянейронов.Сначалацеребральнаяишемияразличнойпродолжительностивызывает нарастающее нарушение функциональной активности, а затемструктуры нейронов вплоть до гибели путем некроза или апоптоза.
В частности,при гипоксии активация анаэробного гликолиза и внутриклеточный лактат-ацидозприводят к цитотоксическому отеку, нарушению функции ионных насосовцитоплазматической мембраны, активации процессов свободнорадикальногоокисления.Указанныеизмененияпрогрессируютприабсолютномэнергодефиците, приводящем к необратимому электролитному дисбалансу игибели нейронов. Важным механизмом повреждения нейронов выступаетглутаматная эксайтотоксичность, когда в условиях энергодефицита возникаетдеполяризация пресинаптической мембраны аксонов, нарушается ионныйтранспорт, сопряженныйсглутаматом иаспартатом, чтоприводит квысвобождению глутамата и аспартата из нервных окончаний и запуску глутаматкальциевогокаскада,повышениюконцентрациисвободногокальциявцитоплазме и активации кальций-зависимых процессов.Активация процессов свободнорадикального окисления является еще однимключевым механизмом повреждения нейронов при церебральной ишемии–реперфузии, запускаемая лактат-ацидозом, а также активацией и продукциейАФКнейтрофиламиэндотелиоцитамичерезизпериферическойсистемукровипослереперфузии,ксантиноксидаза/ксантиндегидрогеназавусловиях гипоксии.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
