Диссертация (1140276), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Отметим, что максимальная выраженность эффектов ЛИпри экспериментальной ИКГМ наблюдается на 30 сутки наблюдения. Полноговосстановления исследуемых морфометрических показателей не происходит, вовсе сроки эксперимента наблюдаются статистически значимые (p<0,01) отличия сгруппой ложнооперированных животных по количеству интактных нейронов,нейронов с хроматолизом и клеток-теней, количеству мелких кровеносныхсосудов и площади инфаркта.Далее мы исследовали в очаге ишемического повреждения головного мозгаэкспрессию VEGF (таблица 21).
Во все сроки наблюдения зафиксированоувеличение экспрессии VEGF: на 3 сутки – на 26% (по медиане по сравнению сгруппой животных с ИКГМ без терапевтического воздействия), на 7 сутки – на49% (по медиане), на 14 сутки – на 35% (по медиане), на 30 сутки – на 37% (помедиане). Кроме этого, по экспрессии VEGF значимые (p<0,01) отличиязафиксированы и с группой ложнооперированных животных во все срокинаблюдения.95Таблица 21Влияние лазерного излучения на экспрессию VEGF в очаге повреждения приэкспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3], количество клеток / у.е. площади)Группыживотных1.
Ложнооперированные2. ИКГМ4. ИКГМ + ЛИ3 сутки7 сутки14 сутки30 сутки8,50[7,00; 9,00]9,50[8,00; 10,00]10,00[8,75; 11,25]10.00[10,00; 12,00]13,5019,50[12,75; 15,0] [18,0; 20,25]17,0029,00[16,0; 17,25] [27,75; 30,0]30,00[28,75; 31,00]40,50[39,0; 42,0]39,50[38,00; 41,25]54,00[50,75; 55;25]P1-2<0,001P1-3<0,001P2-4<0,01P1-2<0,001P1-3<0,001P2-4<0,001Различия(критерий Манна–Уитни)P1-2<0,001P1-3<0,001P2-4<0,001P1-2<0,001P1-3<0,001P2-4<0,001При проведении корреляционного анализа между количеством мелкихкровеносных сосудов и экспрессией VEGF при ИКГМ в условиях применения ЛИвыявлено, что на 3 сутки эксперимента значимая связь не наблюдается (R=0,34;p>0,05), на 7 сутки – сильная положительная связь (R=0,77; p<0,05), на 14 сутки –слабая положительная связь (R=0,48; p<0,05), на 30 сутки – сильная средней силысвязь (R=0,53; p<0,05).Итак, при экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИ в очагеповреждения во все сроки наблюдения увеличивается количество интактныхнейронов, экспрессия VEGF, снижается количество нейронов с хроматолизом иклеток-теней; на 7, 14, 30 сутки наблюдения увеличивается количество мелкихкровеносных сосудов и сокращается площадь инфаркта, на правах тенденцииувеличивается количество глиоцитов.
Максимальная выраженность эффектов ЛИна морфологию очага повреждения наблюдается на 30 сутки эксперимента.Количество мелких кровеносных сосудов в очаге повреждения ассоциировано сэкспрессией VEGF.963.3.4 Влияние лазерного излучения на гематологические показателикрови при экспериментальной ишемии коры головного мозгаИзменения количественного состава клеток в крови являются отражениемформирования очага ишемического повреждения при экспериментальной ИКГМ.Как было отмечено в разделе 3.1, при экспериментальной ИКГМ у крыс на 3, 7, 14сутки наблюдается лейкоцитоз за счет увеличения количества нейтрофилов,моноцитов, лимфоцитов, на 3 и 7 сутки снижается количество эритроцитов,гемоглобина, гематокрита, на 7 сутки снижается среднее содержание гемоглобинав эритроците и средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах.В условиях применения ЛИ при экспериментальной ИКГМ на 3 сутки ненаблюдается значимых изменений в крови общего количества лейкоцитов,количестванейтрофилов,лимфоцитов,моноцитоватакжеколичестватромбоцитов (таблица 22).
На 7 сутки наблюдения статистически значимоснижается общее количество лейкоцитов (на 25% по медиане по сравнению сгруппой животных с ИКГМ без терапевтического воздействия), наблюдаетсятенденция к снижению количества лимфоцитов; количество других лейкоцитов, атакже тромбоцитов в крови достоверно не изменяется.
На 14 сутки экспериментаобщее количество лейкоцитов в крови снижается (на 20% по медиане) за счетснижения представительства лимфоцитов (на 24% по медиане). Наконец, на 30сутки эксперимента не зафиксировано статистически значимых изменений вкрови количества лейкоцитов и тромбоцитов.По сравнению с ложнооперированными животными наблюдаются значимые(p<0,01) отличия по общему количеству лейкоцитов на 3, 7, 14 сутки, поколичеству нейтрофилов – на 3, 7, 14, 30 сутки, по количеству лимфоцитов – на 3,7, 14 сутки, по количеству моноцитов – на 3, 7 сутки эксперимента. Такимобразом, в условиях применения ЛИ при ИКГМ на 7 и 14 сутки снижается вкрови общее количество лейкоцитов преимущественно за счет лимфоцитов,полученные результаты позволяют говорить о частичном восстановлении общего97представительства лейкоцитов и лимфоцитов в крови на 7 и 14 суткиэксперимента.Результаты исследования влияния ЛИ на показатели «красной крови» приэкспериментальной ИКГМ представлены в таблице 23.
Как видно, на 3, 7, 14, 30сутки не зафиксировано статистически значимого влияния на количествоэритроцитоввкрови,концентрациюгемоглобина,гематокрит,среднийэритроцитарный объем, среднее содержание гемоглобина в эритроците исреднюю концентрацию гемоглобина в эритроцитах. По сравнению с группойложнооперированных животных на 3 и 7 сутки эксперимента снижаетсяколичество эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, на 3, 7 и 14 сутки снижаетсясредний эритроцитарный объем, а на 3 сутки – среднее содержание гемоглобина вэритроците и средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах. Таким образом,нами не выявлено значимого влияния ЛИ при экспериментальной ИКГМ напоказатели «красной крови».Полученные результаты при оценке гематологических показателей приэкспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИ, по всей видимости,являются отражением событий в очаге повреждения: так, уже на 7 суткиувеличиваетсяколичествомелкихувеличиваетсяэкспрессияVEGF,кровеносныхчтососудов,благоприятнона14суткисказываетсянакровоснабжении и кислородообеспечении нервной ткани (микроциркуляция вочаге повреждения возрастает на 14 сутки).
Как следствие, уменьшается областьвторичнойальтерации(пенумбры),увеличиваетсяколичествоинтактныхнейронов; количество нейронов с хроматолизом, клеток-теней, то есть площадьинфаркта сокращается, а интенсивность деструктивных процессов уменьшается –на это меньше реагируют фагоциты периферической крови при восстановлениикровотока, меньше выделяется аутокоидов в кровоток, реакция миелоидногоростка костного мозга снижается и наблюдается меньшее количество лейкоцитовв кровотоке.Безусловно, уже на данном этапе возникает вопрос о возможных вариантахмеханизма нейропротекторного действия ЛИ при экспериментальной ИКГМ.Таблица 22Влияние лазерного излучения на гематологические показатели при экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)7 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)WBC,109/л16,27[13,3724,08]3,05[2,53-8,27]15,14[14,0218,27]2,89[3,11-5,94]28,45[19,6431,42]4,74[3,95-6,22]21,75[17,6427,19] *3,95[3,71-5,57]12,53[11,22-16,75]11,08[10,2614,47]0,81[0,55-1,24]22,98[18,3429,92]0,47[0,46-0,99]16,74[15,2225,14]0,73[0,51-1,14]9,81[8,21-14,02]Mon,109/л12,37[12,0117,62]0,51[0,46-0,99]PLT,109/л596[554-672]627[547-664]622[595-654]589[555-621]Neu,109/лLymph,109/л14 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)10,12[9,4312,05] *1,88[1,61-2,34]8,88[8,02-11,46]9,97[7,25-10,84]1,92[1,38-2,77]2,07[1,31-2,65]6,67[5,21-8,94]7,31[6,18-7,99]0,41[0,29-0,68]7,45[6,219,02] *0,45[0,31-0,59]0,31[0,20-0,41]0,53[0,31-0,87]641[605-682]612[588-649]651[583-697]687[612-714]2,41[1,91-2,92]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; WBC – лейкоциты, Neu – нейтрофилы, Lymph – лимфоциты,Mon – моноциты, PLT – тромбоциты.Таблица 23Влияние лазерного излучения на гематологические показатели при экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)7 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)14 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=5)(n=10)RBC,1012/л5,59[4,12-7,01]4,98[4,34-6,74]5,95[5,21-6,74]6,52[6,01-6,98]8,44[7,81-8,97]9,12[8,45-9,76]9,02[8,33-9,79]HGB,г/л130,7[121,2155,1]35,2[33,5-42,1]133,4[129,1144,2]34,2[32,1-39,7]123,2[121,0127,3]40,1[38,2-46,7]139,6[128,8141,1]41,9[38,8-45,4]155,7[151,0-157,3]159,6[153,4162,8]46,4[43,8-51,2]162,1[155,6-167,8]62,96[57,1372,0]22,51[19,0423,97]35,13[31,8737,92]65,37[59,1473,55]24,98[20,3725,04]37,88[33,1239,64]63,19[57,8374,39]18,47[15,2219,88]29,13[26,1531,72]65,26[58,7669,22]19,97[17,1221,08]31,08[28,0332,66]55,72[50,81-61,11]52,88[48,1259,16]17,88[17,3222,08]34,01[31,1634,87]53,95[52,01-58,81]HCT,%MCV,флMCH,пгMCHC,г/дл47,8[44,2-49,7]18,04[17,42-21,53]32,52[30,41-33,21]49,0[46,1-50,7]18,29[18,02-22,31]32,99[29,73-35,89]10,28[9,9311,07] *166,5[161,2177,1]49,8[45,7-52,8]49,98[49,1156,23]17,04[17,0223,08]34,08[31,1336,74 ]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; RBC – эритроциты, HGB – гемоглобин, HCT – гематокрит,MCV – средний объем эритроцита, MCH – среднее содержание гемоглобина в эритроците, MCHC – средняя концентрациягемоглобина в эритроците.100По данным обзорной работы по нейропротективным подходам в леченииишемического инсульта, в настоящее время в доступной литературе представленоболее 1 000 экспериментальных отчетов и более 100 клинических испытаний вэтой области [8, 152, 230, 236, 237].Большинствофармакологическихагентов,продемонстрировавшихэффективность на доклиническом этапе, например, блокаторы кальциевыхканалов, цитиколин, агонисты ГАМК, магнезия и др.
не подтвердили своюэффективность при проведении метаанализа [249, 251, 300]. Большое вниманиесрединефармакологическихтранскраниальнойлазернойметодовтерапиинейропротекцииближнегоинфракрасногоуделяетсядиапазона,гипербарической оксигенотерапии, гипотермии и др. В отношении ЛИвысказывается предположение о так называемой фотобиостимуляции нервнойткани, которая ускоряет восстановление мозга в период ишемии и реперфузии,что было подтверждено рандомизируемыми контролируемыми исследованиями[189, 298, 307, 308]. Особо подчеркивается, что в настоящее время ведутсяинтенсивные поиски оптимальных нейропротекторных подходов в ведущихмировых центрах инсульта для применения в клинической практике. Полагают,чтонаибольшуюкомплексногоэффективностьпримененияпримогутпродемонстрироватьишемическихподходыпораженияхЦНСфармакологических препаратов и нефармакологических методов. В этомотношенииперспективнымможетоказатьсяиспользованиесистемногоприменения ЭПО и ЛИ.
В связи с этим, на следующем этапе работы исследовалинейропротекторные аспекты комбинированного применения ЭПО и ЛИ приэкспериментальной ИКГМ.Выводы по разделу 3.31. В условиях применения ЛИ при экспериментальной ИКГМ интегральныйпоказатель неврологического статуса повышается на 3 сутки и восстанавливаетсяк30суткамнаблюдения;максимальныйэффектнаориентировочно-исследовательское поведение зафиксирован на 14 и 30 сутки, вертикальная101активность восстанавливается начиная с 7 суток, исследовательская активность –на 30 сутки.2.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
