Диссертация (1140276), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Кроме того, в отношении нейропротекторного действия ЭПОпри ИКГМ нельзя исключить другие механизмы действия ЭПО, в частности,80активацию эритропоэза и увеличение кислородной емкости крови, улучшениекислородообеспечения нейронов, а также ограничение лейкоцитарной экспансииочага ишемического повреждения в коре больших полушарий головного мозга.Оба фактора могут иметь значение в нейропротекции и нейротрофике,уменьшении зоны пенумбры в очаге церебральной ишемии. Эти предположенияявились предметом дальнейшего исследования при экспериментальной ИКГМ вусловиях применения ЭПО.3.2.4 Влияние эритропоэтина на гематологические показатели кровипри экспериментальной ишемии коры головного мозгаЭПО является известным фактором для пролиферации, дифференцировки,ограничения апоптоза эритроидных клеток-предшественниц в костном мозге.Главным эффектом ЭПО является снижение скорости апоптоза эритроидныхклеток-предшественниц в костном мозге, на которые ЭПО оказывает действиечерез поверхностные рецепторы [131, 288].
Максимальное представительстворецепторов ЭПО обнаруживается на КОЕ-Э и пронормобластах, в процессеэритропоэза количество рецепторов снижается, а ретикулоцит и эритроцит неимеют их совсем. Однако в настоящее время ЭПО рассматривается какмультипотентный гемопоэтический фактор, а также регулятор функциональнойактивности клеток крови, прежде всего, лейкоцитов (регулятор адгезии,хемотаксиса, поглотительной и киллинговой способности фагоцитов), ингибиторапоптоза циркулирующих лимфоцитов и обладающий другими свойствамифактор [100].Применение ЭПО при экспериментальной ИКГМ приводит к изменениюгематологическихКакпоказателей,чтоотраженовидно, в условиях применениятенденциягемоглобинавтаблицахЭПО на 3сутки15и16.наблюдаетсяк увеличению количества в крови эритроцитов, концентрацииизначимоеувеличениегематокритана14%.Таблица 15Влияние эритропоэтина на гематологические показатели при экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)7 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)RBC,1012/л5,59[4,12-7,01]5,95[5,21-6,74]7,01[5,22-7,94]14 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)9,928,44[8,92[7,81-8,97]13,34] *155,7171,5[162,2[151,0-157,3]194,1] *49,247,8[47,8-53,1] * [44,2-49,7]30 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)12,329,0211,04[8,33-9,79][10,02[10,2214,34] *12,37] *HGB,130,7143,1123,2179,8162,1185,2[121,0г/л[121,2[134,0[168,9[155,6-167,8][171,7155,1]151,2]127,3]196,2] *192,9] *HCT,35,240,240,151,249,052,8%[33,5-42,1] [38,4-46,9] * [38,2-46,7][48,5[46,1-50,7] [50,3-56,3] *55,2] *51,1255,72MCV,62,9658,4863,1947,1153,9549,89[50,81-61,11]фл[57,13[55,33[57,83[47,0[39,52[52,01-58,81] [47,26-54,83]72,0]64,52]74,39]54,15] *51,88] *MCH,22,5120,9218,4717,1118,0416,0818,2918,06пг[19,04[19,14[15,22[15,45[17,42-21,53][14,21[18,02-22,31] [17,44-21,77]22,13]19,88]18,23]23,97]19,71] *33,6132,52MCHC,35,1334,7529,1335,2232,9934,44г/дл[31,87[32,07[26,15[31,45[30,41-33,21][32,24[29,73-35,89] [30,94-36,03]37,92]36,95]31,72]35,19]36,91]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; RBC – эритроциты, HGB – гемоглобин, HCT – гематокрит, MCV– средний объем эритроцита, MCH – среднее содержание гемоглобина в эритроците, MCHC – средняя концентрациягемоглобина в эритроците.Таблица 16Влияние эритропоэтина на гематологические показатели при экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])ПоказателиWBC,109/л3 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)16,27[13,3724,08]13,28[12,4016,23]7 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)14 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 3.ИКГМИКГМ +(n=5)ЭПО (n=10)28,45[19,6431,42]12,14[9,2214,74] *12,53[11,22-16,75]9,42[8,1111,51] *8,88[8,02-11,46]8,01[7,57-8,58]1,92[1,38-2,77]1,22[0,94-1,54] *6,67[5,21-8,94]6,52[5,72-7,06]0,31[0,20-0,41]0,38[0,24-0,65]651[583-697]692[631-738]Neu,109/л3,052,13[2,53-8,27] [1,20-2,95] *4,74[3,95-6,22]2,56[1,79-3,34] *2,41[1,91-2,92]Lymph,109/л10,78[8,23-15,60]9,81[8,21-14,02]0,44[0,33-0,62]22,98[18,3429,92]0,47[0,46-0,99]9,25[4,26-7,24] *Mon,109/л12,37[12,0117,62]0,51[0,46-0,99]0,39[0,21-0,49]0,41[0,29-0,68]1,55[1,022,42] *7,49[6,757,87] *0,37[0,28-0,53]PLT,109/л596[554-672]567[534-621]622[595-654]577[521-618]641[605-682]592[574-652]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; WBC – лейкоциты, Neu – нейтрофилы, Lymph – лимфоциты,Mon – моноциты, PLT – тромбоциты.83Более выраженные, статистически значимые изменения зафиксированы на 7 суткиэксперимента: увеличение количества эритроцитов в крови (на 67% по медианеотносительно группы животных с ИКГМ), концентрации гемоглобина в крови (на39%), увеличение гематокрита (на 22,5%), снижение среднего эритроцитарногообъема (на 19%).Аналогичнаятенденцияпонаправленностиизмененийпоказателей«красной крови» наблюдается на 14 сутки: увеличение количества эритроцитов вкрови (на 49% по медиане относительно группы животных с ИКГМ),концентрации гемоглобина в крови (на 15,5%), увеличение гематокрита (на 7,1%),снижение среднего эритроцитарного объема (на 15,4%), а также снижениесреднего содержания гемоглобина в одном эритроците (на 11,1%).
На 30 суткинаблюдения количество эритроцитов в крови возрастает на 22,2%, концентрациягемоглобина – на 14,1%, гематокрита – на 6,1%.Таким образом, при экспериментальной ИКГМ применение ЭПО всуммарной дозе 15 000 МЕ/кг приводит к увеличению количества эритроцитов,гемоглобина, гематокрита на 7, 14, 30 сутки эксперимента, снижению среднегоэритроцитарного объема на 7 и 14 сутки, снижению среднего содержаниягемоглобина в одном эритроците на 14 сутки эксперимента. Максимальнаявыраженность эритропоэтического эффекта ЭПО наблюдается на 7 суткиэксперимента, т. е.
через 5 суток после последнего введения ЭПО.Показательно, что по сравнению с группой ложнооперированных животныхпри экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЭПО количествоэритроцитов, концентрация гемоглобина в крови, гематокрит снижены (p<0,01) на3 сутки, увеличены (p<0,01) – на 7, 14, 30 сутки эксперимента; снижены (p<0,01)средний эритроцитарный объем на 7, 14 и 30 сутки, среднее содержаниегемоглобина в одном эритроците на 14 сутки эксперимента. Полученные данныепозволяют говорить не только о коррекции зафиксированного ранее сниженияколичества эритроцитов, гемоглобина, гематокрита на 3 и 7 сутки ИКГМ, но и обувеличении содержания эритроцитов и гемоглобина на 7, 14, 30 суткиэксперимента и увеличении таким образом кислородной емкости крови84(объемного содержания кислорода в артериальной крови) и как следствиекислородообеспечения нервной ткани.Снижение среднего эритроцитарного объема на 7 и 14 сутки, а такжеснижение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците на 14 суткиэксперимента отражает активацию эритропоэза, увеличение синтеза клетокпредшественниц эритроидного ряда костного мозга, выход ретикулоцитов вкровь, увеличение относительного содержания ретикулоцитов среди эритроцитовкрови.
Как известно, ретикулоцит имеет меньший размер (объем) и меньшеесодержание (концентрацию) гемоглобина в цитоплазме по сравнению со зрелымиэритроцитами.Влияние ЭПО на количественный состав лейкоцитов в крови приэкспериментальной ИКГМ видно из представленной выше таблицы 16. На 3 суткиэксперимента значимо снижается количество в крови нейтрофилов, на правахтенденции снижается общее количество лейкоцитов и количество лимфоцитов.На 7 и 14 сутки наблюдения снижается общее количество лейкоцитов за счетснижения представительства в крови нейтрофилов и лимфоцитов.
На 30 суткиэкспериментадостовернонеобщееколичестволейкоцитовизменяются, зафиксированоиколичествотолько снижениелимфоцитовколичестванейтрофилов.Отметим, что по сравнению с группой ложнооперированных животных приэкспериментальной ИКГМ в условиях применения ЭПО на 3, 7 и 14 суткинаблюдения общее количество лейкоцитов, количество нейтрофилов и количестволимфоцитов повышено, а на 30 сутки не имеет значимых отличий.Таким образом, применение ЭПО при экспериментальной ИКГМ приводитк снижению количества нейтрофилов в крови во все сроки наблюдения (3, 7, 14,30 сутки), а также к снижению общего количества лейкоцитов и количествалимфоцитов на 7 и 14 сутки эксперимента, что позволяет говорить о частичномвосстановлении представительства лейкоцитов в крови на 3, 7 и 14 сутки и ополном восстановлении – на 30 сутки наблюдения.85Полагаем, что полученные результаты изменений количества лейкоцитов вкрови в определенной мере связаны с нейропротекторными свойствами ЭПО вочаге повреждения, улучшением кислородообеспечения области церебральнойишемии и как следствие уменьшением площади инфаркта, зоны пенумбры, чтообусловливает меньшую выраженность реакции миелоидного ростка костногомозга на повреждение нервной ткани, а значит меньшее количество лейкоцитов вкрови, прежде всего, нейтрофилов.В свою очередь, снижение количества нейтрофилов в крови приэкспериментальной ИКГМ разрывает один из circulus vitiosus в патогенезесиндромацеребральнойишемии–реперфузии,таккакэтоограничиваетколичество поступающих в область повреждения нервной ткани нейтрофилов изкрови после восстановления кровотока и соответственно их повреждающийэффект на нейроны в связи с синтезом и секрецией агрессивных цитотоксическихфакторов, таких как активные формы кислорода, ферменты и др.Выводы по разделу 3.21.ПриэкспериментальнойИКГМвусловияхпримененияЭПОинтегральный показатель неврологического статуса, оцениваемый по шкалеGarcia J.
H., восстанавливается частично на 3 и 7 сутки, полностью – к 14 суткамнаблюдения,ориентировочно-исследовательскоевосстанавливается частично на 3, 7поведениекрыси 14 сутки, полностью – к 30 суткамнаблюдения. ЭПО восстанавливает показатель микроциркуляции в очагеишемического повреждения на 14 и 30 сутки наблюдения.2.ПриэкспериментальнойИКГМвусловияхпримененияЭПОустановлено, что в очаге ишемического повреждения на 3, 7, 14, 30 суткинаблюдения увеличивается представительство интактных нейронов и мелкихкровеносных сосудов, снижается количество нейронов с хроматолизом и клетоктеней, снижается площадь инфаркта, не изменяется экспрессия VEGF.3.
При экспериментальной ИКГМ применение ЭПО в суммарной дозе15 000 МЕ/кг приводит к увеличению количества эритроцитов, гемоглобина,86гематокритана7,14,30суткиэксперимента,снижениюсреднегоэритроцитарного объема на 7 и 14 сутки, снижению среднего содержаниягемоглобина в одном эритроците на 14 сутки эксперимента. Максимальнаявыраженность эритропоэтического эффекта ЭПО наблюдается на 7 суткиэксперимента. В условиях применения ЭПО снижается количество нейтрофилов вкрови во все сроки наблюдения, общее количество лейкоцитов и количестволимфоцитов – на 7 и 14 сутки эксперимента, что позволяет говорить о частичномвосстановлении представительства лейкоцитов в крови на 3, 7 и 14 сутки и ополном восстановлении – на 30 сутки.3.3 Нейропротекторные аспекты применения лазерного излученияпри экспериментальной ишемии коры головного мозга3.3.1 Влияние лазерного излучения на неврологический и этологическийстатус крыс при экспериментальной ишемии коры головного мозгаЛазерное излучение непрерывного инфракрасного диапазона (длина волны970 нм, мощность 1 Вт) в дистанционном режиме работы эффективноприменяетсяпридегенеративногопораженияхгенеза[159,ЦНС193,194,ишемического,220,253].травматического,Однакомеханизмнейропротекторного действия ЛИ до конца не ясен, а полученные разнымиисследователями результаты зачастую противоречат друг другу, что обусловленоиспользованием различных источников и режимов лазерного излучения, объектовклинического и экспериментального исследования, толщины костей черепа,степени гидратации нервной ткани и других факторов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
