Диссертация (1140276), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Повышение концентрации провоспалительныхцитокинов, в том числе ТНФ-альфа, ИЛ-1, ИФН-гамма и др., угнетает эритропоэзкак напрямую, так и через снижение синтеза эритропоэтина в почках. Активациярезидентных макрофагов печени, селезенки, костного мозга приводит к захватуциркулирующих эритроцитов и усилению гемолиза. Еще один механизм можетбыть связан с нарушением метаболизма железа.
Провоспалительные цитокины,активируя синтез гепсидина в печени, приводят к блокаде белка ферропортина вкишечнике и макрофагах, что соответственно угнетает поступление трансферринав кровь из энтероцитов, угнетая таким образом всасывание железа и выходтрансферрина из макрофагов для повторного использования железа в организме.Полагаем, что на начальных этапах ИКГМ (3 сутки) анемия преимущественнообусловлена усилением гемолиза, позднее (7 сутки) – угнетением эритропоэза инарушением метаболизма железа.Нами проведена оценка концентрации эритропоэтина в крови приэкспериментальной ИКГМ. Результаты представлены в таблице 9.
Как видно, на 3сутки зафиксировано статистически значимое снижение концентрации ЭПО всреднем на 22% относительно группы ложнооперированных животных. На 7, 14,30 сутки эксперимента концентрация ЭПО в крови значимо не изменялась. Повсей видимости, гипоэритропоэтинемия является отражением описанных вышеизменений(снижениясинтезаЭПОвпочкахвусловияхповышенияконцентрации провоспалительных цитокинов в крови) и вносит вклад вформирование анемии при ИКГМ.По данным литературы, как лейкоцитоз, так и анемия являютсяпрогностически неблагоприятными факторами при инсульте [101, 160, 180, 206,291]. Показано, что анемия более чем в три раза увеличивает риск смерти послеперенесенного инсульта.
У больных с инсультом патогенез анемии может быть68многофакторным и включать нарушение обмена железа, синтез про- ипротивоспалительных цитокинов и дизрегуляцию эритропоэза, нарушениефункции почек, потерю крови и др. В эпидемиологическом исследовании ChangY. L. et al. на 204 372 пациентах убедительно продемонстрирована связь междуанемией и ишемическими инсультами, но не обнаружено связи между анемией исубарахноидальным/внутримозговым кровоизлиянием [126]. Мета-анализ 6исследований с участием 3 810 больных с ишемическим инсультом показал, чтоанемия является независимым предиктором смерти [160].
При этом многиеисследователи подчеркивают отсутствие четких подходов в лечении анемии прицереброваскулярных заболеваниях.Таблица 9Концентрация эритропоэтина в сыворотке при экспериментальной ИКГМ(Me [Q1-Q3], пг/мл)Группа 1.Ложнооперированные(n=5)Группа 2.ИКГМ3 сутки(n=5)Группа 2.ИКГМ7 сутки(n=5)Группа 2.ИКГМ14 сутки(n=5)Группа 2.ИКГМ30 сутки(n=5)2155,3[1561,72286,1]1681,6[1223,12186,1] *2005,2[1322,22579,8]2358,1[1737,22964,8]2137,6[1683,53435,1]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 1.Снижение кислородообеспечения нейронов является одним из ведущихфакторов формирования области пенумбры и расширения зоны ишемическогоповреждения. Снижение концентрации ЭПО, как было отмечено выше, вноситопределенный вклад в формирование анемии при ИКГМ.
По всей видимости,экзогенное введение ЭПО в этом отношении за счет стимуляции эритропоэзапозволит увеличить доставку кислорода в головной мозг.Намипроведенкорреляционныйанализмеждупоказателяминеврологического статуса (сумма баллов по шкале Garcia J.
H.) и количествомэритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, нейтрофилов в крови при ИКГМ.69Установлена прямая средней силы связь между показателем неврологическогостатуса и количеством эритроцитов и концентрацией гемоглобина в крови на 3сутки (соответственно R=0,52; R=0,54; p<0,01), 7 сутки (соответственно R=0,61;R=0,65;p<0,01).Выявленаобратнаясильнаясвязь между показателемневрологического статуса и количеством лейкоцитов и количеством нейтрофиловв крови на 3 сутки (соответственно R= - 0,75; R= - 0,81; p<0,01), 7 сутки(соответственно R= - 0,83; R= - 0,86; p<0,01).Учитывая вышесказанное, а также участие ЭПО в метаболизме нервнойткани, его потенциальные антиоксидантные, антиапоптогенные свойства, участиев неоангиогенезе, патогенетически обоснованным может быть применениеэкзогенногоЭПОприИКГМ.Кромеэтого,обнаруженныеранееиммуномодулирующие, в том числе противовоспалительные, эффекты ЭПО притермической травме, хронической почечной недостаточности могут являтьсяпредпосылкой для применения ЭПО не только с целью коррекции анемии,нейропротекции, но и регуляции воспалительных реакций [54, 56, 57, 58, 59, 60,61, 62, 63].Выводы по разделу 3.11.ВдинамикеэкспериментальнойИКГМвочагеповреждениянаблюдаются дистрофия и некроз нейронов и нейроглии, образование клетоктеней и амебовидных астроцитов, фрагментация и распад миелиновых волокон,формирование глиосоединительнотканного рубца, что сопровождается от 3 к 30суткам эксперимента снижением количества интактных нейронов, мелкихсосудов, появлением нейронов с хроматолизом, появлением и увеличениемколичества клеток-теней, площади инфаркта, повышением экспрессии VEGF.
Вдинамике экспериментальной ИКГМ количество мелких сосудов в очагеишемического повреждения ассоциировано с экспрессией VEGF.2. При экспериментальной ИКГМ на всех сроках наблюдения фиксируетсяочаговый неврологический дефицит в виде двигательных, чувствительных истато-координаторныхрасстройств,угнетаетсяориентировочно-70исследовательская активность животных; снижается микроциркуляция в очагеИКГМ, показатель частично восстанавливается к 30 суткам эксперимента.3. При экспериментальной ИКГМ у крыс на 3, 7, 14 сутки наблюдаетсялейкоцитоз за счет увеличения количества нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов,на 3 и 7 сутки снижается количество эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, на 7суткиснижается среднее содержание гемоглобина в эритроците и средняяконцентрация гемоглобина в эритроцитах. На 3 сутки ИКГМ снижаетсяконцентрация ЭПО в крови.
Установлена ассоциация между показателемневрологического статуса по шкале Garcia J. H. и количеством эритроцитов,лейкоцитов, нейтрофилов, концентрацией гемоглобина в крови.3.2 Нейропротекторные аспекты применения эритропоэтина приэкспериментальной ишемии коры головного мозга3.2.1 Влияние эритропоэтина на неврологический и этологический статускрыс при экспериментальной ишемии коры головного мозгаДля оценки нейропротекторного эффекта системного применения ЭПО приИКГМ на первом этапе исследовали клиническую картину на 3, 7, 14, 30 сутки попоказателям неврологического статуса и этологического статуса.При исследовании неврологического статуса у крыс по шкале Garcia J. H.выявлено, что на 3 сутки наблюдения интегральный показатель статистическизначимо увеличивался на 3, 7, 14 сутки наблюдения и не отличался на 30 сутки отзначений в группе животных с ИКГМ.
Прирост интегрального показателя на 3сутки составил по медиане 67%, на 7 сутки – 50%, на 14 сутки – 25%относительно группы животных с ИКГМ. Отметим, что, несмотря на увеличениеинтегральногопоказателя,оннедостигалзначенийвгруппеложнооперированных животных на 3 и 7 сутки наблюдения. Таким образом,максимальный эффект ЭПО на неврологический статус у крыс наблюдается на 3 и717 сутки ИКГМ, а на 14 и 30 сутки фиксируется восстановление неврологическогостатуса (таблица 10).Таблица 10Влияние эритропоэтина на неврологический статус приэкспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3], баллы)Группыживотных1. Ложнооперированные2. ИКГМ3 сутки7 сутки1818[17,00-18,00] [18,00-18,00]14 сутки30 сутки18[18,00-18,00]18[18,00-18,00]6[5,00-7,25]9[8,00-10,5]12[11,0-13,0]15[14,0-16,25]3. ИКГМ + ЭПО10[9,50-11]13,5[12-15]15[13,75-16,25]17[15,75-18,0]Различия(критерийМанна–Уитни)P1-2<0,001P1-3<0,001P2-3<0,001P1-2<0,001P1-3<0,001P2-3<0,001P1-2<0,001P2-3<0,001P1-2<0,001При изучении поведенческой активности крыс с ИКГМ в условияхприменения ЭПО в тесте «открытое поле» получены результаты, представленныев таблице 11.
На 3 сутки эксперимента установлено только статистическизначимое повышение горизонтальной активности животных, вертикальнаяактивность и исследовательская активность возрастали на правах тенденции,количество актов груминга и фекальных болюсов значимо не изменялось. На 7сутки наблюдения при ИКГМ в условиях применения ЭПО увеличиваласьгоризонтальная активность (на 17% по медиане), вертикальная активность (на133% по медиане) и исследовательская активность животных (на 50% помедиане).На14суткиэкспериментальнойИКГМукрысвозрасталагоризонтальная активность (на 81% по медиане), вертикальная активность (на150% по медиане) и исследовательская активность животных (на 100% помедиане).
Аналогичные по направленности изменений результаты полученыТаблица 11Влияние эритропоэтина на показатели теста «открытое поле» при экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 сутки7 суткиГруппа 2.ИКГМ(n=10)Группа 3.ИКГМ +ЭПО (n=10)Группа 2.ИКГМ(n=10)Группа 3.ИКГМ +ЭПО (n=10)ГА,актов7,0[6,0; 8,0]12,5[11,0;13,25] *12,0[11,5;12,75]ВА,актов4,0[3,0; 5,0]5,0[4,0; 5,25]3,0[1,75; 4,0]7,0[6,0; 7,0] *ИА,актов2,0[2,0; 3,0]4,0[3,0; 4,0]4,0[3,75; 5,0]Гр,актов1,0[1,0; 2,0]2,0[1,0; 2,0]ФБ,кол-во1,0[1,0; 2,0]1,0[1,0; 2,0]14 суткиГруппа 2.ИКГМ(n=10)30 суткиГруппа 3.ИКГМ +ЭПО (n=10)Группа 2.ИКГМ(n=10)Группа 3.ИКГМ +ЭПО (n=10)14,5[13,0; 14,5] *10,5[8,75;11,25]16,5[15,75;17,0] *3,0[2,75; 4,25]7,5[6,0; 8,25] *5,0[4,75; 6,0]8,5[8,0; 9,0] *6,0[5,0; 7,0] *3,0[3,0; 4,0]6,0[5,75; 6,25] *4,0[3,0; 5,0]8,0[7,0; 9,0] *2,0[1,0; 2,0]2,0[1,5; 2,0]1,5[1,0; 2,0]2,0[1,75; 2,0]2,0[1,0; 2,25]3,0[3,0; 4,0]1,0[1,0; 2,0]1,0[0,75; 2,0]2,0[1,0; 3,0]1,0[1,0; 2,0]1,0[1,0; 2,0]0,5[0,0; 1,0]14,08,0[13,0; 14,5] * [7,75; 8,75]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; ГА – горизонтальная активность, ВА – вертикальнаяактивность, ИА – исследовательская активность, Гр – груминг, ФБ – фекальные болюсы.73на 30 сутки наблюдения: увеличение горизонтальной активности (на 57% помедиане), вертикальной активности (на 70% по медиане) и исследовательскойактивности животных (на 100% по медиане).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
