Диссертация (1140232), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Показано, что ФС повышает точность (полокализациииинтраэпителиальнойраспространению)неоплазии(CIN)диагностикипосравнениюцервикальнойсобычнымицитологическими и кольпоскопическими методами.5) Экзогенное введение фотосенсибилизаторов для диагностики и ФДТтерапии чревато осложнениями в виде аллергических реакций, отека Квинке,ограничении работоспособности пациентов на этапе их реабилитации.Единичные исследования по ФД рака эндометрия были выполнены в конце 90х годов прошлого столетия. В этих работах использовалась индуцированнаяфлюоресцентная спектроскопия с применением 5-АЛК.
[65,145,163,196].Были получены некоторые положительные и обнадеживающие результаты.[179,202].В последнее время флюоресцентную диагностику часто называют«оптической» биопсией тканей. Это, по-видимому, связано с интеграциейЛКД и проводимой под её контролем ФДТ с компьютерными программами,позволяющими в режиме экспресс-диагностики «on-line» и не инвазивнополучать объективную и адекватную патологическому процессу информациюв течение 1-3 мин. В том числе информацию о сущности и характерепатологического процесса в различных тканях и органах репродуктивнойсистемы. Однако реальные исследования на этот счет единичны и проведенына аппаратуре с низкой аналитической чувствительностью (что, собственно и52вынуждает авторов исследований и клинических наблюдений для повышениячувствительности метода и спектральной визуализации тканей использоватьнебезопасные экзогенно вводимые фотосенсибилизаторы) [4, 7, 132, 133].Именнопоэтомукомпонентов)реальноеизучение(безвведениякаких-либометаболических,маскирующихморфометрическихифункциональных характеристик тканей в норме и при патологии зачастуюзатруднены, а их результаты часто противоречивы и сложны дляинтерпретации.
Это обусловлено возникающей разнородностью оптическихсвойств тканей, их изменением «ex vivo» накоплением продуктов распада инекроза, распадом Hb, накоплением продуктов ПОЛ и т. д. [8, 27].Проводится изучение и обсуждение вопроса о глубине детекции(«оптической биопсии») при лазерной диагностике, в том числе при аутофлюоресцентной диагностике.
Показано, что глубина проникновения в тканивозбужденного лазерного излучения в ближнем УФ- диапазоне составляетпорядка 0, 2 мм, при возбуждении в зеленой области – не более 1, 0 мм.Ограничениедиагностическихвозможностей,помнениюнекоторыхисследователей, связано с наличием эритроцитов и распределением Hb кровив тканях, который активно поглощает свет в этом диапазоне длин волн.Возбуждение флюофоров в красном и инфракрасном диапазоне (622-780 ни)имеет выраженное преимущество, т. к. мало зависит от качества поверхностии кровенаполнения объекта исследования.
Глубина проникновения света с λ630 нм в ткани составляет 1-3 мм, с λ 700-850 нм – 2-8 мм [164]. Некоторыеавторы считают, что аутофлюоресценция тканей злокачественных опухолей вкраснойобластиспектраобусловлена,преждевсего,эндогеннымипорфиринами, содержание которых изменено при разных патологическихпроцессах (гиперплазия, воспаление) [148 156 170].В клиническом аспекте (по диагностике) в гинекологической практикеизвестныисследованияположительныепорезультатыфлюоресцентнойфотодинамическойдиагностикетерапиипри(ФД)илечении53патологических процессов вульвы – дистрофии, лишае, раке. Однако все ещенедостаточно изучены методами ФД патологические процессы органовмалого таза, отсутствует их база данных, которую можно было быиспользовать в качестве референсных показателей при оценке нормы ипатологии, эффективности лечения и реабилитации пациенток по основнымпатогенетическиобоснованнымпоказателям(аэробный/анаэробныйтипморфометрическим(активностьструктурированностьсоответствиеметаболизматканей),метаболическихтканей:иметаболическимоксигенацияклеточнойфункциональнымитканей),пролиферации,(микроциркуляция,морфометрическихпоказателейменструальному циклу).В литературе имеются единичные данные о ФД эндометриоза, миомыматки в эксперименте и клинической практике [63,141 160].Клинические результаты:Лидс и соавт.
(2000) опубликовалирезультаты применения 5-АЛК при ФДТ маточных кровотечений [48]. Врезультате интенсивность аномальных маточных кровотечений уменьшалась.Данные морфологического исследования показали признаки атрофииэндометрия с одновременной частичной регенерацией желез эндометрия.Данное исследование показало возможность выполнение фотодинамическойтерапии (ФДТ) с использованием 5-АЛК.ВдоступнойфлюоресцентнойлитературесоставляющейвозможностииФДТупримененияженщинсЛКД,еёбесплодием,гиперпластическими процессами эндометрия и хроническим эндометритоммы не обнаружили.Фото-иммунная терапия предусматривает использование значительноменьших энергий для возбуждения фотосенсибилизатора в тканях.
РазработкаиприменениеметодовЛКД(флюоресцентнойи/илирамановскойсоставляющей), фото-ингибирующей и фото-иммунной терапии в различных54областях медицины, в том числе для сохранения и поддержаниярепродуктивногоОтличительныеоперативность,здоровьяженщины,достоинствавысокаяявляютсяэтихтехнологийвозможностьихкрайне–непримененияактуальным.инвазивность,уженщинсгиперпластическими процессами эндометрия, а также с бесплодием иневынашиванием.
Однако эти медицинские технологии в методическом иметодологическом аспекте все еще недостаточно разработаны для женщин сбесплодием, гиперпластическими процессами эндометрия и хроническимэндометритом. В тоже время социально, клинически и, как следствие,стратегическиважныморганосберегающихявляетсятехнологийразработкадляивнедрениеновейшихлечениямолодыхженщин,преисполненных чувством материнства, страдающих заболеваниями органоврепродукции и несостоятельных в беременности и родах.Перспективные медицинские ЛКД и ФИТ-технологии, особенно прикомплексномихиспользованиидлядиагностикиилечениягиперпластических процессов эндометрия и хронического эндометрита уженщин с бесплодием не применяли, что и послужило мотивацией длянастоящего исследования в интересах науки и практики, врача и, главнымобразом, пациенток.55ГЛАВА 2МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯДля достижения поставленной цели и решения задач исследование былоразделенона2части–экспериментальнуюиклиническую.Экспериментальная часть, целью которой была разработка метода лазернойконверсионной диагностики гиперпластических процессов эндометрия иобъемной фото-ингибирующей и фото-стимулирующей терапии, выполняласьна базе НИЦ Первого МГМУ им.
И М. Сеченова (Зав.- Проф. Е.И. Эрнес).Клиническая часть исследования проводилась на базе клиники акушерства игинекологии им. В. Ф. Снегирева и клиники репродуктивного здоровья Артэко (дир. д. м. н. Е. А. Калинина).2. 1. Обоснование выбора аппаратуры, методов исследования иалгоритмов лечения.АППАРАТУРА.Дляисследованийиспользовалиаппаратно-программный комплекс Ин Спектр с оптоволоконным датчиком (файбер).Образцы аппаратуры, их предназначение и клиническое применениепредставлены на рисунках 1, 2, 3.56Рисунок 1. Образцы аппаратуры для лабораторных исследований иклинических наблюдений.Рисунок 2. Программное обеспечение Ин Спектр.57Рисунок 3.
Области медицинского применения АПК Ин Спектр.ОБОСНОВАНИЕ МЕТОДИКИИсходяизпредставленнойконцепции,приэкспериментально-теоретическом обосновании новой медицинской технологии, в качествемодельного объекта использовали культуру микробных тел (три видалинейные штаммы стафилококка, стрептококка и устойчивого к современнымантибиотикам клинического штамма синегнойной палочки)-20 тест образцов(из них 5 контрольная группа) и культуру карциномы Эрлиха (45 тест образцови 15-контрольная группа).Для исследования использовали лабораторных мышей -60 тестобъектов, которым внутрибрюшинно вводили 0.1 мл культуральногоматериала)Этапы пробоподготовки фотосенсибилизатора (хлорофилл содержащийпрепарат - содержит магний-порфирин, аналогичный по составу железопорфирину гемоглобина) включали в себя:581) Выбор фотосенсибилизатора с наибольшим квантовым выходомлюминесценции при его резонансном облучении (этот этап включаетподбор зондирующего лазерного излучения)2) Подбор оптимальных параметров дозы облучения при диагностике илечении заболеваний (этап включает подбор таких параметров излучения ирегистрации сигнала, которые не искажают сигнал за время записи и неповреждают здоровые клетки).3) Выбор фотосенсибилизатора с наибольшим квантовым выходомлюминесценции при его резонансном облучении (этот этап включаетподбор зондирующего лазерного излучения)4) Выбор оптимальных параметров дозы облучения при диагностике илечении заболеваний (этап включает подбор таких параметров излучения ирегистрации сигнала, которые не искажают регистрируемый сигнал завремя записи и не повреждают здоровые клетки)5).
Оптимизация доказательной базы в том, что влияние кислорода безприсутствия лазерного облучения не приводит к изменению интенсивностилюминесцентного свечения препарата хлорофилла, т.е не вызывает (неактивирует) фото-ингибирующую реакцию.6). Активация препарата лазерным излучением. Описание явленияактивации.7) Исследование действия активированного препарата на антимикробнуюактивность (на модели тест объектов микробов-представлены ниже).8) Исследование действия, активированного хлорофилл содержащегопрепарата на клетки карциномы Эрлиха (на тест объектах животныхлабораторные мыши).599) Анализ результатов исследования, как обоснование возможности егоклиническогоприменения.Разработкаалгоритмовиметодикиклинического применения активированного препарата (отражены в разделеклинические методики ЛКД).Подробное описание результатов экспериментально-теоретическогообоснования,примененияактивированногохлорофиллсодержащегопрепарата для клинического применения при лечении гиперпластическихпроцессов эндометрия представлено в разделе собственных результатовисследования.2.
2 ПАЦИЕНТЫОбследованные 126 женщин были разделены на 2 группы, - основную(80) и группу сравнения (46), сопоставимых по возрасту с документальноподтвержденным отсутствием гиперплазии эндометрия и хроническогоэндометрита.Все женщины обратились в клинику в связи с бесплодием с цельюэкстракорпорального оплодотворения (ЭКО).Критерием включения было первичное или вторичное бесплодие,гиперплазия эндометрия и хронический эндометрит.Критерием исключения стали атипическая гиперплазия эндометрия, ракэндометрия или отказ женщины от участия в программе исследования.Основойдляформированиягруппбылклиническийиверифицированный морфологический диагноз ГЭ и ХЭ.Анализ внутри групп проводился в зависимости от морфологическоговарианта ГЭ, морфологических особенностей ХЭ и сочетанных формзаболеваний.60К репродуктивному возрасту относили (согласно классификации, ВОЗ)женщин 18-47 лет.Оценку репрезентативности групп определяли по формулам оценкирепрезентативности для количественных и качественных признаков принеодинаковом числе наблюдений в группах.На каждую пациентку заполнялась карта и электронная база данных,которая в дальнейшем позволяла анализировать данные, имевшие отношениек результирующему диагнозу, тактике ведения и лечения пациенток – возраст,жалобы или их отсутствие, семейный анамнез, наличие и характер теченияэкстрагенитальных заболеваний и их влияние на основное заболевание.Особое внимание уделялось гинекологическому анамнезу – менструальнойфункции, началу и активности половой жизни, возрасту наступлению первойсамостоятельной беременности и её исходу –родам или прерыванию, способупрерывания, осложнениям после искусственного аборта, - кровотечениям,задержкам частей плодного яйца, повторным выскабливаниям, а такжепроводимому лечению, составу и его продолжительности.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
