Диссертация (1140232), страница 11
Текст из файла (страница 11)
4 Метод диагностики ЛКДЛазерная раман - флюоресцентная диагностика и одномоментнаябиостимулирующая терапия проводили под объективным контролем, которыйвключал в себя: Индикацию клеточной пролиферативной активности эндометрия(оцениваетсяпопоказателямнормированнойинтенсивностилюминесценции тканей эндометрия площадь под кривые флюоресценции) Оценку интенсивности микроциркуляции поверхностных слоевэндометрия (оценивается по показателям нормированного на интактнуюкожу внутренней поверхности бедра обратно отраженного сигналалазерного излучения от тканей эндометрия – дно полости матки, еёсередина и внутренний зев- в норме=3 отн.
ед.) Оценку интенсивности аэробного и анаэробного метаболизма(оценивается по показателям индекса аэробности-отношение площади подкривой флюоресценции 665±5нм к 695+_5нм-в норме 1. 1-1. 5 отн. Ед.) Оценку нормальных и измененных тканей при воспалительных инеопластических процессах (доброкачественных и злокачественныххарактеризуется высокими показателями интенсивности флюоресценциинесоответствующимиднюциклаи\илисдвигоммаксимума67флюоресценциивправо-внормеинтенсивностьфлюоресценциисоставляет в первую фазу цикла 1/3-1/2-интесивности интактной ткани, вовторую-2\3-1 по отношению к интенсивности интактной ткани, поструктурированности указанных показателей-т.е.
в норме они приизмерении во всех трех точках практически совпадают по своимамплитудно спектральным показателям) - рис 5. 14 Мониторингуказанныхметаболическихклеточныхитканевых(морфометрических) изменений, оценку эффективности лечения,в том числе по нормализации указанных клинических, метаболических иморфометрических показателей. [8, 26]Указанныехарактеристикиотражаютморфологические,метаболические и функциональные изменения в эндометрии.В качестве фотосенсибилизирующего препарата для его активации вэндометрии использовали хлорофиллин - натрия.
Известно, что способностьживых организмов сохранять и накапливать хлорофилл и его производныесвидетельствует о его важной роли в процессе жизнедеятельности. Этоподтверждается интенсивным, особенно в последние годы, использованиемпрепаратов хлорофилла в различных отраслях медицины [Решетников А. В.и соавт. 1999]. Выявлено регулирующее действие препаратов хлорофилла наферменты в живом организме, в том числе на фибринолитические ферменты вкрови человека.
Обнаружено ослабление с помощью металлопроизводныххлорофилла действия токсинов и стафилококка, а также ингибирующеевоздействие на мутагенез, вызванный бензпиреном. Установлено снижениеуровня холестерина под действием медных, железных и натриевыхпроизводных хлорофилла. [139, 14, 194, 201]Производные хлорофилла входят в состав тонизирующих лечебныхпрепаратовиихприменяюткакпротивовоспалительныеИспользуютсяранозаживляющиесвойстваПроизводныехлорофиллаобладаютпрепаратовсредства.хлорофилла.сильнодействующимииммуномодулирующими свойствами. В настоящее время производные68хлорофилла испытывают и используют в различных областях онкологии какингибиторыновообразований,какагенты,способствующиефотодинамической инактивации раковых клеток.Саногенетическое воздействие хлорофиллина, лазерного излучения исредств лекарственной поддержки обеспечивает выполнение важной задачирегенеративной медицины – метаболическое, структурное и функциональное(частичное или полное) восстановление ткани эндометрия, повышающеевероятность имплантации.
За счет такого комплексного лечения у женщин сбесплодием, хроническим эндометритом и структурно-функциональнойнесостоятельностью эндометрия наблюдалось повышение регенеративнойактивности эндометрия.На Рис. (слева) схематически показано использование комплексногоподхода с применением ЛКД (или ЛКД в акушерско - гинекологическойпрактике). В результате такого комплексного курса реабилитации и лечения упациентов наблюдается нормализация внутриматочных показателей (индексыаэробности, нормированные интенсивности люминесценции) после лечения(Рис.
справа).69Рисунок 5. 13 Вариант технологической реставрации эндометрия при атрофииРисунок 5. 14. Динамика спектральных характеристик до (нижние графики) ипосле лечения (верхние графики), слева-обратно отраженный сигнал, с праваспектр флюоресценции.70В результате проведенных исследований была создана библиотекаспектров органов малого таза у женщин.Применение представленных медицинских технологий в комплексномлечении женщин с нарушенной структурой и функцией эндометрия приводитк повышению его регенеративной активности, активации его функциональныхрезервов. Это проявляется (как следствие комплексного лечения) увеличениеминдекса аэробности, микроциркуляции, пролиферативной активности, уровняметаболизма и рецептивности эндометрия.
Уникальная, высокоэффективная,не имеющая аналогов комплексная медицинская технология (методики иаппаратура)длядистрофическихЛКДииодновременногогормонально-активныхлечениявоспалительно-заболеванийоргановрепродуктивной системы у женщин на основе их физико-химическойбиоактивации (гормональная коррекция, антиокcиданты, антимикробнаятерапия - при выявлении, биостимулирующее саногенетическое лазерноевнутриматочное облучение и применение хлорофилл содержащего препарата«Фотроник» для повышения активности местного и общего иммунногостатусаорганизма,аэробноститканейэндометрия,активацииегопролиферативной активности и фото-ингибирующего воздействия намикрофлору, т.
е. активации саногенетических процессов).Высокоточная и информативная «он-лайн» диагностика (скрининг имониторинг)метаболическихиморфометрическихпроявленийвоспалительных и онкологических заболеваний женских половых органов(аналогов не выявлено) сравнима с данными гистологических исследованийна 75-80%.Сокращение времени диагностики по сравнению с традиционнымиисследованиями (биопсийный материал) практически в 200 раз (ЛКД – 3-5мин.,результатбиопсии–8-10дней).Внедрениепредлагаемыхинновационных технологий, по нашему мнению, будет определять здоровоежизнедеятельное состояние женщины, её долголетие и здоровье нации.71Таким образом саногенетическую направленность разрабатываемогометода лечения предлагается реализовать на основе комплексного лечения,подконтролемУЗИифотосенсибилизаторы,одномоментноехлорофиллЛКДантиоксиданты,облучениесодержащеголекарственнойдиагностики,поддержкивнутриматочнуюэндометрия.препарата,включающегоСаногенетическоелазерногообеспечиваетизлучениявыполнениевсебя:ЛКДивоздействиеисредствважнойзадачирегенеративной медицины, направленной на метаболическое, структурное ифункциональное (частичное или полное) восстановление ткани эндометрия.(Рис.
5. 14).2. 5. Метод лечения – объемная фото-ингибирующаятерапия (ФИГТ)Объемная ФИГТ с использованием препарата, содержащего активнуюформу хлорофилла (хлорин Е6) была проведена 88 пациенткам – 45 женщинамс гиперплазией эндометрия и 43 пациенткам с сочетанными формамизаболевания – гиперплазии эндометрия и хроническим эндометритом накафедре акушерства и гинекологии № 1 Сеченовского Университета (зав.проф. А. И. Ищенко) и клиники репродуктивного здоровья «Арт-Эко» дир. д.м. н. Е.
А. Калинина)ОбъемнаяФИГТпроводиласьпослелазернойконверсионнойдиагностики с учетом полученных данных – уровня аэробности (оксигенации),пролиферации, метаболизма, структурированности, микроциркуляции.Препарат, содержащий хлорофиллин натрия, принимали дробно врежиме дискретного увеличения дозы от 0. 1 мл до 20 мл. Рассчитанныйпериод приема препарата основывался на результатах экспериментальногофакта накопления препарата в тканях. Определяющим был периоднаибольшего накопления фотосенсибилизатора в эндометрии.
Этот фактор72зависел от уровня кровоснабжения в сосудах, питающих эндометрий исоставлял 12-18 дней.После определения уровня накопления препарата и оценки спонтанногодействия препарата на эндометрий с учетом активности без световогофотосинтеза (определялось с помощью лазерной спектроскопии) проводиливнешнюю активацию фотосенсибилизатора с помощью излучения He-Neлазера. Лазерный светодиод промышленного производства) в дозе 100 - 160мДж в течении 3 минут. В случае рецидивирующего гиперпластическогопроцесса дополнительно на фоне приема препарата per os проводиливнутриматочную активацию фото-сенсибилизатора (фото-иммунную и фотоингибирующую) в дозе 100-160 мДж 3-4 мин. Что соответствовало 1.
5-2, 0мВт. на выходе световода.Оценку результатов лечения осуществляли через 2-3 недели после егоокончания.Контрольнуюоценкуморфо-функциональногосостоянияэндометрия производили через 4-6 недель после лечения с использованиемгистероскопии, лазерной спектральной конверсионной диагностики ипатогистологического исследования.Таким образом выбор материала и методов исследования в целомсоответствуют концепции цели и задачам исследования.73ГЛАВА 3Экспериментально-теоретическое обоснование примененияактивированного хлорофилл содержащего препарата для клиническогоприменения при лечении гиперпластических процессов эндометрияМетод ФИГТ основан на способности фотосенсибилизатора селективно(избирательно) накапливаться в злокачественных, патологически измененныхили пораженных вирусами (микробами) клетках и изменять их структуру ифункцию после воздействия на них источника света или лазерного излученияопределеннойдлиныволны.Светприводитфотосенсибилизаторввозбужденное состояние с образованием в облучаемом биологическомобъекте (БО) активных форм кислорода, что в свою очередь вызываетповреждение и некроз тканей, наиболее интенсивно накопивших данныйпрепарат.
Таким образом, подвергаются некрозу- «удаляются» только теклетки, которые были изменены (очаги дисплазии, опухоль и т. д.), в то времякак здоровые клетки не реагируют на излучение. Более того эффект лечения(воздействия) существенно зависит от доступности облучаемого объекта длялазерного воздействия на него, глубины его эффективного проникновения впатологический очаг, концентрации фотосенсибилизатора в нем и объемнойплотности мощности излучения лазера. В большинстве клиническихнаблюдений эффект лечения бывает недостаточным.
Это может быть врезультате недостаточного накопления фотосенсибилизатора в (БО), малойглубины проникновения лазерного излучения в ткани, что приводит крецидивам заболевания и осложнениям. Это относится и к очагам воспаления.Кроме того, затрудненная анатомо-топографическая диагностика объектасущественно снижает эффект лечения.Таким образом в своем исследовании мы исходили из клиническицелесообразной необходимости повышения эффективности метода фотоингибирующей терапии (ФГТ) путем активации фотосенсибилизатора вне74организма и контролируемого управляемого его накопления в патологическомочаге.Исходя из представленной концепции в качестве модельного объектаиспользовали культуру микробов (три вида линейных штаммов стафилококка,стрептококка и устойчивого к современным антибиотикам клиническогоштамма синегнойной палочки) - 20 тест образцов (из них 5 -контрольнаягруппа) и культуру карциномы Эрлиха (45 тест образцов и 15-контрольнаягруппа, в качестве объектов исследования использовали лабораторныхмышей, которым внутрибрюшинно вводили 0.1 мл культурального материала)Этапы пробоподготовки фотосенсибилизатора (хлорофилл-содержащийпрепарат (ХСП)-содержит магний- порфирин, аналогичный по составу железапорфирину гемоглобина) включали в себя:А) Подбор фотосенсибилизатора с наибольшим квантовым выходомлюминесценции при его резонансном облучении (этот этап включаетподбор зондирующего лазерного излучения)Б) Подбор оптимальных параметров дозы облучения при диагностикеи лечении заболеваний (этот этап включает подбор таких параметровизлучения и регистрации сигнала, которые не искажают сигнал за времязаписи и не повреждают здоровые клетки)75Рисунок 1.На этом рисунке (рис.















