Диссертация (1140232), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Чрезвычайноважное внимание уделяли спонтанным прерываниям беременности в позднихсроках, выскабливаниям при задержке частей плаценты, а также позднимпослеродовым кровотечениям и выскабливаниям стенок матки в позднемпослеродовом периоде.Важное значение придавали методам контрацепции – внутриматочнымконтрацептивам и гормональной контрацепции, - возрасту начала приемаКОК, продолжительности контрацепции и содержанию в них гормональныхкомпонентов, ретроспективно оценивали влияние эстрогенов на овариальныйрезервпридлительномиспользованииОК.Активно выявляли неблагоприятные социальные факторы, стрессовыеситуации, их уровень и продолжительность, психо-эмоциональные ивегетативныерасстройства.61При изучении предрасполагающих факторов к возникновению и развитиюгиперпластическихпроцессовэндометрияоценивалисемейнуюпредрасположенность к ГЭ, миоме матки, опухолям по женской линии, атакже метаболического синдрома, гипертонической болезни, сахарныйдиабет, влияющих на опухолевый рост.Важным аспектом как для наступления беременности, так и для ГЭявляется нарушение в системе гемостаза, поэтому принципиальным считаливажнейшим этапом обследования изучения генетических факторов нарушениягемостаза, врожденным и приобретенным формам тромбофилии и наличиюсемейного тромботического анамнеза.Важным разделом исследования являлось изучение инфекционногоанамнезаивоспалительныхзаболеванийкакгенитальной,такиэкстрагенитальной сферы, а также хронических заболеваний печени ижелчевыводящих путей, заболевания желез внутренней секреции и нервнойсистемы.Оценку общего состояния женщины проводили на основании типателосложения, характера оволосения, распределения подкожно-жировойклетчатки.
В обязательное обследование входил осмотр, пальпация молочныхжелез и регионарных лимфоузлов. Для оценки нарушения жирового обменаиспользовали Индекс массы тела (ИМТ). Нормальным ИМТ считали 19, 5-25кг/м2, избыточным – 25, 1-29, 9 кг/м2, 30 и более кг/м2 - ожирением.Гинекологическое исследование включало осмотр наружных половыхорганов, влагалища, осмотр шейки матки с помощью зеркал, бимануальноеисследование.622.
3 Лабораторные и инструментальные методыисследованияВсемпациенткампроводилосьполноеклинико-лабораторноеобследование. Оно включало: клинический анализ крови, общий анализ мочи,биохимический анализ крови, гемостазиограмму. Лабораторные исследованиявыполнялись в Центральной межклинической лаборатории КлиническогоЦентра ПМГМУ им. И. М. Сеченова (зав. лабораторией – к. м. н. Е. П.
Гитель).У 46 пациенток проводили исследование гормонального профиля пофазам менструального цикла. Определяли содержание эстрадиола, ФСГ, ЛГ,пролактина и прогестерона в плазме крови на 5-6 и 21-22 день цикла.Количественное определение эстрадиола, ФСГ, ЛГ и пролактинавыполнено с помощью стандартных наборов иммунохемилюминисцентнымметодом на автоматической системе «ACS-180 PLUS»Определение состояния шейки матки осуществляли с помощью,расширенной кольпоскопии и цитологического исследования. Кольпоскопиюосуществляли на кольпоскопе фирмы «Karl Zeis»Ультразвуковоеисследованиеосуществлялинааппарате«Acuson128XP/10 (США) с трансвагинальным конвексным датчиком EC7 счастотой 7МГц и трансабдоминальным датчиком С3 с частотой 3, 5 МГц, и«Toshiba-SSH-140A» с трансвагинальным конвексным датчиком с частотой 6,5 МГц и проводили в режиме реального времени: общее исследование маткиипридатковицветовоедопплеровскоекартирование.Результатыфиксировали в электронной базе данных.Оценивали размеры метки, структуру миометрия, наличие узлов миомыматки и их размеры, УЗ-признаки аденомиоза.
Особое значение придавалиизучению срединного М-эхо – оценивали размеры, структуру, наличие нсостояние зоны между базальным слоем эндометрия и миометрием, что63является важным критерием его физиологического (патофизиологического)состояния.Предметом особого внимания являлось изучение состояния яичников.Кроме стандартных измерений размеров и объема оценивали количество,размеры, распределение фолликулов, их соответствие дню менструальногоцикла, наличию и характеристикам желтого тела, взаимоотношением сфолликулами контр-латерального яичника, соответствию количественным икачественным характеристикам эндометрия.
Оценивали косвенные признакиналичия и последствий воспалительного процесса, спаечных структур.Определенное значение отвали признакам хронического воспаления вэндоцервиксе, - образованию кист, стриктур, спаечному процессу в целом.Определяликорреляциюклинических,УЗИ-признаковиморфологических критериев состояния эндоцервикса и эндометрия. [64, 134,231]Допплерометрическое исследование было одним из краеугольныхисследований, определяющих функциональную способность эндометрияобеспечить имплантацию и дальнейшее развитие беременности у женщин сГЭ, очевидно изначально не приспособленного для этого.Интенсивность кровотока в «местах» оценивалась по количествурегистрируемых цветовых сигналов от сосудов: минимальный кровоток (1-5)сосудов, умеренный кровоток (6-10 сосудов), выраженный кровоток (более 10сосудов).Важнейшим критерием оценки состояния «питания» эндометрияявилась импульсная допплерометрия. Производилась оценка кровоснабженияв маточных, аркуатных, радиальных, базальных и спиральных артериях, атакже в сосудах впервые выявленных новообразований (мелкие узлы миомыматки, мелкие очаги внутреннего эндометриоза).64Отдельно отмечали отсутствие визуализации мелких артерий, изучаливенозныйкровотокнаграницеэндометрия.Критериемсостояниякровоснабжения эндометрия были значения максимальной систолической иконечной диастолической скоростей кровотока (с помощью пульсационногоиндекса(PI),индексарезистентности(IR)систоло-диастолическогоотношения (S/D), которые отражали сосудистое сопротивление [62, 231, 234].Принеобходимостивыполнялиэхографическоеисследованиемолочных желез и маммографию, кроме того ультразвуковое исследованиеорганов брюшной полости, почек и сосудов в разных регионах.Всем женщинам производили «офисную» (мини - гистероскопию) дляуточнения состояния полости матки и эндометрия.
Использовали офисныйгистероскоп фирмы «Karl Storz» с диаметром дистального отдела 2, 7 мм. Этоне требовало применения вагинальных зеркал, использования пулевыхщипцов, расширения цервикального канала и любого обезболивания,поскольку не причиняет боль.Исследование производили в 1 или 2 фазу цикла в зависимости от целиисследования: для диагностики ГЭ - в 1 фазу цикла (5-9 день), для определенияфункционального состояния эндометрия, наличия секреции и её характера(после 21 вплоть до 38 дня) в зависимости от продолжительностименструального цикла.Дляполученияобъектадляморфологическогоисследованияпользовались многоточечной биопсией (от 1-3 до 8-12) при очевиднойгиперплазии. Только после получения морфологической интерпретацииполученного материала выполняли хирургическое удаление эндометрия.Традиционную гистероскопию производили в условиях внутривеннойанестезии с помощью 7 мм гистероскопа фирмы «Karl Storz» (Германия) вусловиях механического расширения цервикального канала д 7, 5 мм.
В65качестве среды расширения использовали 0, 9% раствор хлорида натрия.Постоянное давление в полости матки поддерживалось с помощьюгистеромата той же фирмы на уровне 70-100 мм рт. ст. В качестве источникасвета применяли ксеноновый источник света «Karl Storz»Контрольное гистероскопическое исследование было обязательным.Морфологическое и иммуногистохимическое исследованиеИсследование биоптатов и соскобов эндометрия осуществляли накафедре и в лаборатории патологической анатомии Первого МГМУ им.
И. М.Сеченова (зав. каф – проф. В. С. Пауков)Для исследования ткани предварительно фиксировали в 10% фосфатномнейтральном формалине, обрабатывали в аппарате гистологической проводкитканей компании «Pool scientific Instruments» Швейцария и заливали впарафин. Общее время проводки и заливки объектов в парафин было впределах до 24 часов. В последующем из каждого блока делали до 10-12 срезовтолщиной до 4 мкм с дальнейшей окраской гематоксилин-эозином.Иммуногистохимическое исследование выполнено на объектах от 42пациенток. Объектом сравнения были женщины с ГЭ, ХЭ и без признаковпатологии.Использовались серийные парафиновые срезы толщиной от 4 мкмиммунопероксидазнымметодомдвойныхантител[169,275]спредварительной демаскировкой антигенов в СВЧ-печи в течение 20 минутвыявляли биомолекулярные маркеры: Ki-67, P53, TGF-β, ER и PR.Блокирование эндогенной пероксидазы осуществляли 3% растворомперекиси водорода в депарафинизированнных срезах.
Использовалисьпокрытые адгезином (APES-ацетон) стекла.66После инкубации срезов с первичными антителами во влажных камерахв течение 16 часов при температуре 4 градуса по Цельсию, их промывали вфосфатном буфере и обрабатывали вторичными антителами, после чегоинкубировали во влажных камерах при комнатной температуре в течение 60минут.В качестве вторичных антител использовали биотипированные антителак мышиным иммуноглобулинам. Фиксацию локуса антитела с антителомосуществляли с помощью точки – фермент-пероксидаза в присутствиисубстрата – перекиси водорода. В результате визуализировался объект в видесветло-коричневого окрашивания структур клеток.2.















