Диссертация (1140217), страница 12
Текст из файла (страница 12)
В гранулезо - лютеиновыхклетках экспрессия СЭФР соответствовала 1,43±0,14 балла, а в контрольнойгруппе - 0,58±0,3 балла (r=0,57, р=0,007).Экспрессия СЭФРР1наблюдалась в виде гранулярногоокрашиванияцитоплазмы преимущественно в гранулезо - лютеиновых клетках (рис.11 А, Б), вменьшей степени окрашивание было выражено в эндотелии (рис.12).А)Б)Рисунок 11. Экспрессия СЭФРР1 в цитоплазме гранулезо - лютеиновыхклеток при АЯ. А) ув.200, Б) ув.400.71Рисунок 12. Киста желтого тела с сосудами синусоидного типа. ЭкспрессияСЭФРР1 в гранулезо - лютеиновых клетках и эндотелии при АЯ. ИГХ реакция. Ув.100.Уровень СЭФРР1 в эндотелии сосудов в желтых телах больных с АЯ составил1,08±0,08 балла, а в нормальных желтых телах: 0,42±0,2 балла (r=0,72, р<0,001).
Вгранулезо - лютеиновых клетках экспрессия данного рецептора соответствовала 1,62±0,08 балла, тогда как в нормальных желтых телах - 0,75±0,21 балла (r=0,73,р=0,017).ЛокализацияСЭФРР2,определеннаяиммуногистохимически,былааналогичной локализации СЭФРР1, т.е. преимущественно в гранулезо –лютеиновых клетках, однако интенсивность окрашивания и число позитивныхклеток были существенно выше (рис. 13, таблица 9).Рисунок 13. Экспрессия СЭФРР2 в гранулезо - лютеиновых клетках иэндотелии при АЯ. ИГХ - реакция. Ув.200.72Во многих наблюдениях экспрессия разной интенсивности была отмечена вбольшинстве клеток гранулезы (рис.14).Рисунок 14.
Экспрессия СЭФРР2 разной интенсивности во всех гранулезо лютеиновых клетках и в отдельных тека - клетках (нижняя часть рисунка)при АЯ. ИГХ-реакция. Ув.400.По данным иммуногистохимического исследования концентрация СЭФРР2 вбалах в эндотелии у больных с АЯ составила 2,19±0,13, а в нормальных желтыхтелах - 1,42±0,27 (r=0,54, р=0,017). В гранулезо - лютеиновых клетках экспрессияСЭФРР2 у больных с АЯ составила 2,02±0,14 балла, тогда как в контрольнойгруппе - 1,25±0,28 балла (r=0,59, р=0,008).Следует отметить, что уровень СЭФРР2 в эндотелии сосудов и гранулезо лютеиновых клетках выше относительно СЭФРР1, как в проспективной группе,так и в нормальных желтых телах.НамивыявленыдостоверныеразличияприизучениисоотношенияСЭФРР1/СЭФРР2 в эндотелии сосудов у больных изучаемых групп (р=0,006)(таблица 10).73Таблица 10.Соотношение рецепторов СЭФРР1 и СЭФРР2 в эндотелии сосудов желтыхтел больных с АЯ в сравнении с нормальными желтыми телами.Соотношение СЭФРР1/СЭФРР2 в эндотелии (баллы)Проспективная группа0,51±0,05*Нормальные желтые тела0,21±0,1** р<0,05 – различия между группами достоверны.Как видно из представленной таблицы, уровень рецептора СЭФРР2,отвечающегозапролиферативнуюактивностьклетокэндотелия,вышеотносительно рецептора СЭФРР1, отвечающего за формирование полноценныхсосудов, как в проспективной группе, так и в контрольной группе.
Однако, убольныхсАЯсоотношениеданныхрецепторовизмененовпользуотносительного увеличения экспрессии СЭФРР1 в сравнении с нормальнымижелтыми телами. Различия в соотношении рецепторов в гранулезо – лютеиновыхклетках не достоверны.Таким образом, при изучении концентрации СЭФР и его рецепторов вовариальной ткани выявлено достоверное увеличение их содержания в эндотелиисосудов и гранулезо – лютеиновых клетках в желтых телах больных с АЯ всравнении с контрольной группой.Иммуногистохимическое исследование резецированной ткани с применениемантител к CD34 позволило визуализировать сосудистую сеть желтых тел сморфометрической оценкой ее параметров.Внормальныхжелтыхтелахопределялисьмногочисленныемелкиетонкостенные сосуды, равномерно расположенные между клетками гранулезы(рис. 15).В желтых телах больных с АЯ в ряде наблюдений выявлено умеренноеувеличение размеров сосудов по сравнению с контрольной группой, при этомархитектоника сосудов в целом была нормальной (рис.
16, А). В других же74наблюдениях выявлялось большое количество резко расширенных сосудовсинусоидного типа (рис. 16, Б).Рисунок 15. Сосуды желтого тела (контрольная группа). Многочисленныемелкие сосуды в слое гранулезы, относительно широкие сосуды в областиtheca interna. ИГХ - реакция с антителами к CD34. Ув.100.Нами выявлено достоверное увеличение размеров (площади сечения) сосудов вткани желтых тел больных с АЯ в сравнении с нормальными желтыми телами:742,33±104,77 пикселя против 320,13±28,84 пикселей (р=0,008), а такжеувеличение их средней площади в поле зрения: 38239,35±3354,18 пикселя против23844,2±1814,35 пикселей (p=0,018) (таблица 11).
При этом, вышеописанныепараметры не зависели от размеров удаленных кист/желтых тел яичников.Таблица 11.Размеры и площадь сосудов желтых тел больных с АЯ и в нормальныхжелтых телах.Размеры и площадь сосудовПроспективнаяНормальныежелтых телгруппажелтые телаПлощадь сечения сосудов742,33±104,77*320,13±28,84*38239,35±3354,18*23844,2±1814,35*(пиксели)Средняя площадь в полезрения (пиксели)* р<0,05 – различия между группами достоверны.75А)Б)Рисунок 16. А, Б - Различные варианты сосудистой сети желтого тела приАЯ. ИГХ реакция с антителами к CD34. Ув.100.Заслуживает внимания тот факт, что размеры сосудов и их общая площадь вжелтых телах больных, которые указывали на наличие функциональных кистяичников в анамнезе, достоверно больше, чем у остальных больных с АЯ(таблица 12, рис.
17).Таблица 12.Зависимость размеров и площади сосудов желтых тел больных с АЯ отналичия кист яичников в анамнезе.Кисты яичника ванамнезеКист не былоКистыформировалисьРазмеры сосудов(пиксели)562,42±120,53*1008,07±161,55*Средняя площадь сосудов30774,72±3320,33*в поле зрения (пиксели)48222,45±3982,43*76* р<0,05 – различия достоверны.Рисунок 17. Зависимость размеров и площади сосудов желтых тел больных сАЯ от наличия кист яичников в анамнезе.Кроме того, при анализе полученных данных выявлена сильная обратнаязависимость между общей площадью сосудов в овариальной ткани у больных сАЯ и наличием овуляции через 1 месяц после операции (r=-0,73, р=0,016).Такимобразом,проведениеиммуногистохимическогоисследованиярезецированной ткани яичников с применением антител к CD34 позволиловыявить достоверное увеличение размеров сосудов и их средней площади вжелтых телах у больных с АЯ. При этом у больных с функциональными кистамияичников в анамнезе средние значения данных параметров были достоверновыше.
Большая средняя площадь сосудов в желтых телах может рассматриватьсявкачественеблагоприятногопрогностическогофакторавотношениивосстановления овуляторного менструального цикла через 1 месяц послехирургического лечения.773.3. Результаты иммуноферментного исследования сыворотки крови (ЕLISA)с определением концентрации СЭФР у больных проспективной группыБольным из проспективной группы непосредственно перед оперативнымвмешательством проводился забор крови с целью определения уровня СЭФР.Средняя концентрация СЭФР в сыворотке крови составила 269,15±36,37 пг/мл.Поскольку в литературе отсутствуют общепринятые нормативные значения дляСЭФР в сыворотке крови у здоровых женщин репродуктивного возраста, аданные разных авторов варьируют в широких пределах - от 6,01 пг/мл до2300±550 пг/мл (Адамян Л.В.
и соавт., 2008; Волкова Л.В., 2011; Ермолова Н.В. исоавт., 2012; Макарищев А.Я., 2007; Манухина Е.И. и соавт., 2011; ШороховаМ.А., 2009; Gagne D. et al., 2003; Mllhenny C. et al., 2002; Jelkmann W., 2001), мыориентировались на данные наиболее обширных исследований (Gagne D.
et al.,2003; Jelkmann W., 2001). Согласно приведенным в них результатам,концентрация СЭФР в сыворотке крови здоровых женщин репродуктивноговозраста колеблется в пределах от 200±98 до 294±171 пг/мл или от 10 до 300пг/мл (Gagne D. et al., 2003; Jelkmann W., 2001).Таким образом, полученные нами средние значения СЭФР в сыворотке крови убольных в остром периоде АЯ, не выходили за границы вышеуказанныхпоказателей.
В то же время, у 50% (ДИ: 30,8% - 69,2%) больных уровень данногофактора роста превышал 300 пг/мл.Корреляционный анализ позволил обнаружить наличие сильной отрицательнойсвязи между концентрацией СЭФР в сыворотке крови в остром периодезаболевания и уровнем экспрессии данного фактора в эндотелии сосудов желтыхтел, т.е., чем выше была концентрация СЭФР в эндотелии сосудов, тем ниже былоего содержание в сыворотке крови (r=-0,78, p=0,022).Следует отметить, что в тех наблюдениях, в которых экспрессия СЭФРсоответствовала 1,0 баллу, концентрация данного фактора роста в сывороткекрови превышала 300 пг/мл и составила 381,32±47,71 пг/мл.78Нами выявлена сильная обратная корреляционная зависимость между уровнемСЭФР в сыворотке крови и размерами сосудов желтых тел (r=-0,71, р=0,047).У больных с функциональными кистами яичников в анамнезе содержаниеСЭФР в сыворотке крови было ниже, чем у больных с первым эпизодомзаболевания и составило – 186,11±52,58 пг/мл против 321,99±43,67 пг/мл (r=0,47,р=0,048) (таблица 13).Полученныезависимостиподтверждаютсярезультатамииммуногистохимического исследования, при котором у больных с отягощенныманамнезом по наличию функциональных кист яичников были выявлены болеекрупные сосуды желтых тел.Проведение корреляционного анализа позволило выявить обратную связьмежду величиной удаленных кист желтых тел и уровнем СЭФР в сывороткекрови, взятой перед хирургическим вмешательством (r=-0,52, р=0,029).
Так, приразмерах опухолевидных образований яичника до 3 - 6 см, концентрация данногофактора роста составила в среднем – 224,78±52,14 пг/мл, а при размерах кисты 1 2 см – 324,61±52,14 пг/мл.При анализе связи содержания СЭФР в сыворотке крови в остром периодеАЯсрезультатамигормональногообследованиябольныхпоказанаположительная зависимость между уровнем данного фактора и концентрациейэстрадиола через 1 месяц после операции (r=0,52, р=0,031).Через 3 месяца после хирургического вмешательства повторно изучалисодержание СЭФР в сыворотке крови (взятой на 22-24 дни менструального цикла)на фоне реабилитационной (гормональной) терапии. Концентрация СЭФР посравнению с его уровнем перед операцией достоверно не изменилась и составила269,35±68 пг/мл (независимо от вида гормональной терапии). У 44,44% (ДИ:21,2% - 70,1%) больных уровень данного фактора в сыворотке крови превышал300 пг/мл.Обратная корреляционная связь между концентрацией СЭФР и наличиемфункциональных кист яичников сохранялась и через 3 месяца после операции:уровень СЭФР у больных, ранее имевших кисты яичников, составил –79144,59±76,59 пг/мл, а у остальных больных - 425,3±64,1 пг/мл (r=0,78, р=0,013)(таблица 13).Таблица 13.Концентрация СЭФР в сыворотке крови у больных с первым эпизодом АЯ ис функциональными кистами яичников в анамнезе.Обследованные больныеКонцентрация СЭФР в сыворотке крови(пг/мл)перед операцией3 месяца послеоперацииОбщее количествообследованных больныхБольные с функциональнымикистами в анамнезеБольные без функциональныхкист в анамнезе269,15±34,37(n=20)269,35±68(n=15)186,11±52,58*(n=8)164,71±73,66*(n=8)321,99±43,68*(n=12)425,3±64,1*(n=7)* р<0,05 – различия достоверны.Следует отметить, что и положительная зависимость между уровнемэстрадиола через 1 месяц после операции и содержанием данного фактора всыворотке крови также сохранялась и через 3 месяца после операции (r=0,72,р=0,03).Изучение уровня СЭФР в сыворотке крови через 6 месяцев после оперативноговмешательства (на 22-24 дни менструального цикла) показало, что его средняяконцентрация незначительно повысилась и составила 303,36±56,9 пг/мл (внезависимости от вида завершенной к этому времени гормональной терапии).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
