Диссертация (1140211), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Пациентамвыполнялись серологические (n = 111) и ПЦР (n = 14) исследования сыворотки31крови и ЦСЖ, компьютерная томография, магнитно-резонансная томография,электрофизиологическое исследование.2.2.1.1. Клинический анализ кровиКлинический анализ крови с подсчетом форменных элементов в единицеобъема выполнялся на автоматизированной системе Advia-60 (Великобритания) сприменением реагентов одноименной фирмы. Клинический анализ крови включалопределениеуровнягемоглобина,количестваэритроцитов,тромбоцитов,лейкоцитов, включая лейкоцитарную формулу, а также скорость оседанияэритроцитов.
Исследование проводилось в клинической лаборатории ИКБ № 1 г.Москвы (заведующий лабораторией — Лева Валерий Григорьевич).2.2.1.2. Биохимические методы исследованияБиохимическое исследование крови включало определение билирубина,активность аланиновой (АЛТ) и аспарагиновой аминотрансфераз (АСТ),содержание общего белка и белковых фракций.
Исследования проводили намногофункциональных биохимических анализаторах Olympus AU-480 и OlympusAU-400 (Япония) с применением соответствующих реактивов одноименнойфирмы. Исследование проводилось в биохимической лаборатории ИКБ № 1 г.Москвы (заведующий лабораторией — Лева В. Г.).2.2.1.3. Клинический анализ ЦСЖКлиническое исследование ликвора включало определение белка (г/литр)нафотометрическоманализаторе«Микролаб600»,глюкозыилактата(ммоль/литр) на автоматическом анализаторе ABL 800. Определение общегоколичества клеток ликвора производилось с применением реактива Самсона вкамере Фукса-Розенталя.
Исследование проводилось в клинической лабораторииИКБ № 1 г. Москвы (заведующий лабораторией — Лева В. Г.).2.2.2. Молекулярно-биологические исследования2.2.2.1. Полимеразная цепная реакция ЦСЖПЦР ЦСЖ выполнялась с помощью наборов реагентов «АмплиСенс HSVI,II-Eph»(ООО«ИнтерЛабСервис»,ФГУН«ЦНИИэпидемиологии»Роспотребнадзора) в 3 этапа: выделение ДНК из проб, проведение ПЦР-32амплификациивтемпературномамплификацииметодомрежимеэлектрофорезавидетекцияагарозномпродуктовгеле.ПЦР-Исследованиепроводилось в микробиологический лаборатории ИКБ № 1 г. Москвы(заведующий лабораторией — Маликов Владимир Евгеньевич).2.2.2.2. Иммуноферментный метод определения серологическихмаркеров инфицирования и активности процесса ВПГ-1, ВПГ-2, ВВЗДля серологического исследования использовали сыворотку венозной кровии ряде случаев ЦСЖ пациентов в начале заболевания и в динамике (1-я, 2-я, 3-я,4-я недели заболевания и после 45-го дня).
Для определения серологическихмаркеров инфицирования и активности процесса применялись диагностическиетест-системы производства EUROIMMUN AG (Германия):1. АТ класса IgМ — Anti-HSV-1 (gC1) ELISA (IgM), Anti-HSV-2 ELISA(IgM), Anti-Varicella Zoster Virus (VZV) ELISA(IgM);2. АТ класса IgG — Anti-HSV-1 (gC1) ELISA (IgG), Anti-HSV-2 ELISA(IgG), Anti-Varicella Zoster Virus (VZV) ELISA(IgG).ИФА проводился согласно инструкции производителя.Исследование проводилось в микробиологической лаборатории ИКБ № 1 г.Москвы (заведующий лабораторией — Маликов В. Е.).2.2.3. Электрофизиологические и нейровизуализационные методы2.2.3.1.
Электроэнцефалографическое исследование проводилось дляоценки биоэлектрической активности мозгаЭлектроэнцефалографическоеисследованиепроводилосьнааппарате«Мицар-ЭЭГ-05/70-201» («Мицар», Россия). Работа проведена совместно сврачом функциональной диагностики ИКБ № 1 Шахгильдян С. В. Полученныерезультаты интерпретировались согласно классификации Л.
Р. Зенкова [105, стр.108].2.2.3.2. Электронейромиографическое обследование проводилось сцелью определения характера поражения периферических нервовЭлектронейромиографиявыполняласьнакомпьютерноммногофункциональном комплексе «Нейро-МВП» («Нейрософт», Россия) при33подозрении на поражение периферических нервов, а также в динамике.
Приисследовании производились регистрация и анализ характеристик М-ответа ипотенциала действия нерва, определение скорости распространения возбуждения(СРВ) по двигательным и чувствительным нервным волокнам, а такжеисследовались параметры F-волны, H-рефлекса (в том числе при парнойстимуляции) (работа проведена совместно с врачом функциональной диагностикиИКБ № 1 Шахгильдян С. В.).2.2.3.3.
Компьютерная томографияКомпьютернаятомографияголовногомозгапроводиласьнамультиспиральном компьютерном томографе Somatom Emotion 16-срезовый(Siemens, Германия) с целью определения локализации и характера пораженияголовного мозга. Исследование проводилось в Государственном бюджетномучреждении здравоохранения города Москвы «Детская городская клиническаябольница № 13 им. Н.
Ф. Филатова Департамента здравоохранения городаМосквы».2.2.3.4. Магнитно-резонансная томографияМагнитно-резонансная томографияголовногомозгапроводилась натомографе Excelart Vantage 1.5 T (Toshiba, Япония) с целью определениялокализации и характера поражения головного мозга, а также оценки динамикипроцесса. Исследование проводилось в Детской городской клинической больнице№ 9 им. Г. Н.
Сперанского.Компьютерные и магнитно-резонансные томограммы, приведенные вописаниях клинических случаев, описаны старшим научным сотрудникомотделения лучевой диагностики ФГБНУ Научного центра неврологии, к.м.н.Коноваловым Р. Н.В таблице № 3 представлено общее количество выполненных исследованийи основных анализируемых документов.342.3 Группы сравненияГруппусравненияIсоставилипациентысвирусологическиподтвержденным энтеровирусным менингитом (n = 11). Пациенты былисопоставимы по полу и возрасту с пациентами, которые переносили ВПГменингоэнцефалит. Группы сравнивались по частоте выявления специфическихантител к ВПГ в сыворотке крови и ЦСЖ.Группу сравнения II составили пациенты с острой мозжечковой атаксией (n= 18).
У 14 из них симптомы атаксии возникли на фоне лихорадочногозаболевания с катаральным синдромом, у 2 — на фоне лихорадочногозаболевания с кишечным синдромом, у 2 — на фоне лихорадки неяснойэтиологии. Пациенты были сопоставимы по полу и возрасту с пациентами,которые переносили острую мозжечковую атаксию на фоне ВВЗ-инфекции.Группы сравнивались по частоте неврологических симптомов.ГруппусравненияIIIсоставилипациенты,которыебылигоспитализированы с 2000 по 2014 гг. с полирадикулонейропатией неяснойэтиологии (диагноз был подтвержден данными ЭНМГ), у которых в процессеболезни были поражены черепные нервы (n = 7). Пациенты были сопоставимы пополу и возрасту с пациентами, которые переносили полирадикулонейропатию нафонеВВЗ-инфекции.Группысравнивалисьпочастотеневрологическихсимптомов.В таблице 3 приведено общее количество проведенных исследований ианализируемых документов.35Таблица 3.
Общая таблица количества проведенных исследованийПоказателиОбщий анализ кровиБиохимический анализ кровиОбщий анализ ЦСЖПЦР сыворотки кровиПЦР ЦСЖИФА ЦСЖИФА сыворотки кровиЭлектроэнцефалографическое исследованиеЭлектронейромиографияКомпьютерная томографияголовного мозгаМагнитно-резонанснаятомография головного мозгаИстории болезниКоличествоисследований,28952148512426980828302312.4. Статистический анализ данныхСтатистическая обработка данных проводилась с помощью программMicrosoft Excel 7.0 and Microcal Origin 8.0.
Для каждой серии результатовасимметричного распределения вычисляли медиану с указанием минимального имаксимального значения. Для сравнения несвязанных групп по количественным ипорядковым признакам применялся непараметрический тест Манна-Уитни (MW).Сравнение несвязанных групп по качественным признакам проводилось сиспользованием теста χ2 и точный критерий Фишера.
За уровень достоверностистатистических показателей было принято p<0,05.36ГЛАВА 3.КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ СПОРАЖЕНИЯМИ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ВПГ-ИНФЕКЦИИЧастота выявления клинических форм поражения нервной системы ВПГ удетей (n = 21) приведена в таблице 4.Таблица 4. Частота выявления клинических форм поражения нервной системыВПГ у детей (n = 21)Формы поражения нервной системыМенингоэнцефалитМенингит МоллареКоличество наблюденийАбс. (%)20 (95,2 %)1 (4,8 %)Из таблицы видно, что у 20 пациентов был диагностирован острыйменингоэнцефалит.Для решения поставленной задачи больные были разделены на группысогласно общепринятым возрастным периодам детства (рисунок 1).30,00%50,00%до 1 года1-3 лет4-7 лет7-15 лет20,00%Рисунок 1. Распределение пациентов с энцефалитом, вызванным ВПГ, повозрасту, согласно общепринятым возрастным периодам детства (n = 20)Ранние симптомы острого периода заболевания приведены в таблице 537Таблица 5.
Ранние симптомы острого периода при менингоэнцефалите, вызванном ВПГСимптомыФебрильная температура (выше 38,0)РвотаСудорогиСознание (по ШКГ): ясное; оглушение; сопор; кома 1; кома 2Двигательные расстройства: гемипарез; тетрапарез; парез лицевого нерваСредние значения параметров ЦСЖ: Me белок (г/литр) [Q25; Q75]; глюкоза (ммоль/литр); Me лейкоциты (кл/мкл)[Q25; Q75]; Me нейтрофилы (%) [Q25; Q75]Дети до 1 года(n = 10)10 (100 %)6 (60 %)10 (100 %)Дети от 1 года до 3 лет(n = 4)4 (100 %)1 (25 %)4 (100 %)Дети от 7 до 15 лет(n = 6)6 (100 %)4 (66,7 %)4 (66,7 %)3 (30 %)3 (30 %)4(40 %)0001 (25 %)03 (75 %)03 (50 %)1 (16,7 %)1 (16,7 %)1 (16,7 %)06 (60 %)2(20 %)6 (60 %)3 (75 %)4 (100 %)5 (83,3 %)5 (83,3 %)0,33 [0,26; 0,66]3,1 [2,1; 4,0]64 [28; 114]0,26 [0,16; 0,33]3,4 [3,0; 3,7]15 [6; 41]0,33 [0,33; 0,49]2,5 [1,9; 3,7]172 [87; 339]55 [50; 78]47 [32; 80]13 [8; 75]Из анамнеза уточнено, что у всех детей в возрасте до 3 лет не отмеченопроявлений герпетической инфекции до настоящего заболевания.
У всех детейстарше 7 лет отмечалось рецидивирующее течение экзантемной формыгерпетической инфекции (не более 2 эпизодов в год). Однако ни у кого изпациентовне отмечалось появленияхарактерных высыпанийвдебютенастоящего заболевания.Температура, как наиболее ранний симптом ВПГ-менингоэнцефалита,являлась обязательной для острого периода, поскольку в дебюте заболевания ееповышение выше 38 °С было отмечено у всех пациентов.У детей в возрасте от 0 до 3 лет в остром периоде отмечались эпизодыжидкого стула (n = 2) и катаральные явления (n = 2).В таблице 5 приведены результаты оценки уровня сознания в остромпериоде, а также наличие судорог в дебюте болезни.
Уровень сознания в остромпериоде оценивался по шкале Глазго. Изменение сознания было отмечено у 11(78,5 %) пациентов в возрасте от 0 до 3 лет, у детей в возрасте от 7 до 15 лет всостоянии измененного сознания находились лишь 3 (50 %) пациента.У всех детей в возрасте от 0 до 3 лет в дебюте болезни отмечалисьгенерализованные клонико-тонические судороги, у детей в возрасте от 7 до 15 летсудороги отмечались у 4 из 6 пациентов. У 2 детей, которые поступили в ясномсознании и не имели судорог, отмечались психические расстройства в видедезориентации и нарушения памяти.Нейропатия лицевых нервов, а также парезы и параличи являются частымисимптомами данной патологии вне зависимости от возраста.















