Диссертация (1140205), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Причем, наличие клещей на кожном покрове человека не всегдасопровождаетсяутверждать,чторазвитиемклещиклиническойродакартиныявляютсяDemodexзаболевания.Можноусловно-патогеннымипредставителями микрофлоры кожи человека.Постановка диагноза «Демодекоз» (код по МКБ-Х В 88.0 – «Другойакариаз»)производитсятолькопослеподтвержденияналичияклещей48лабораторно-инструментальными методами исследования. Имеющиеся методыдиагностикидемодекозанеудовлетворяюттребованиямсовременноймедицины, не гарантируют абсолютной достоверности результатов анализов,нередко травматичны и не объективны.
В таком случае, альтернативнымнаправлениемв современной инструментальной диагностике может статьконфокальная лазерная сканирующая in vivo микроскопия, которая позволитвыявитьклещейродаDemodexнеинвазивносвысокимпроцентомдостоверности.В терапии демодекоза, преимущественно, используют следующиегруппы препаратов: противовоспалительные, антипаразитарные, а такжефизиотерапевтические методики. Важным аспектом является устранениехронических очагов инфекции и лечение сопутствующих заболеваний.
Не менееважно проведение профилактических мероприятий.Сложности лечения демодекоза и наличие большого разнообразияприменяемых средств вызывают необходимость совершенствования терапии исоздания стандартизированных терапевтических рекомендаций.49ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯРабота выполнена на базе кафедры дерматовенерологии и косметологииФедерального государственного бюджетного образовательного учреждениядополнительного профессионального образования «Российская медицинскаяакадемиянепрерывногопрофессиональногообразования»Министерстваздравоохранения Российской Федерации и на базе кожно-венерологическогоотделенияФедеральногоЦентральныйвоенныйгосударственногоклиническийбюджетногогоспитальим.А.А.учреждения«3Вишневского»Министерства обороны Российской Федерации в период с 2013 по 2018 годы.2.1.
Общая характеристика респондентов, вошедших в исследованиеЗа время проведения исследования всего обследовано 212 человек(мужчин и женщин). В исследование были включены здоровые лица, больные сдиагнозом розацеа, с наличием и отсутствием клещей рода Demodex.Критерии включения в исследование:1. Мужчины и женщины с диагнозом розацеа;2.
Возраст старше 18 лет;3. Информированное согласие на участие в исследовании;4. Наличие клещей рода Demodex у больных розацеа I группы двумя методамиисследования (световой микроскопией соскобов и конфокальной лазернойсканирующей in vivo микроскопией);5. Отсутствие клещей рода Demodex больных розацеа II группы двумяметодами исследования (световой микроскопией соскобов и конфокальнойлазерной сканирующей in vivo микроскопией);Критерии невключения:501. Наличие сопутствующих соматических заболеваний тяжелого течения илинеопластического характера;2. Наличие алкогольной или наркотической зависимости;3.
Беременность и лактация;4. Сочетанное паразитирование двух видов клещей;Критерии исключения:1. Отсутствие желания у пациента продолжать исследование;2. Возникновение аллергических реакций, а также развитие выраженныхпобочных эффектов на фоне лечения;3. Беременность и лактация.Передвключениемвисследованиевсеиспытуемыебылипроинформированы о содержании работы, каждый исследуемый получил «Листинформацииучастникабиомедицинскогоисследования»,подписалинформированное согласие о включении в исследование.2.2. Методы исследованияСоциологический: Сбор анамнеза у больных розацеа и здоровых лиц передвключением в исследование и заполнение «Индивидуальной карты». Анкетасодержала следующие разделы: паспортная часть, жалобы, анамнез заболевания,аллергическийанамнез,объективныйстатус,statuslocalis,данныеинструментально-лабораторных методов исследования, схема терапии.Клинические: визуальный осмотр, установление диагноза.Диагноз «Розацеа» устанавливались на основании клинической картинызаболевания.
Для определения степени тяжести розацеа руководствовалиськлинико-морфологическойклассификацией,предложеннойРыжковойЕ.И.(1976), которая наиболее полно отражает клинические разновидности заболевания(Рыжкова Е.И., 1976):51- эритематозная;- папулопустулезная со своеобразной кистозной формой;- пустулезная;- инфильтративно-продуктивная.Всембольнымсдиагнозомрозацеапроизводиласьоценкараспространенности морфологических элементов на всей поверхности кожи лица.Лабораторные:1. Определение наличия и видовой принадлежности клещей рода Demodex спомощью световой микроскопии соскобов кожи, содержимого сальных желез,волосяных фолликул ресниц и/или бровей, подсчет обнаруженных особей наединицу площади (1 см2);2. Определение уровня pH кожи лица.Инструментальные:1.
Фотографирование больных до и после лечения;2. Дерматоскопия на цифровойследующихпоказателей:видеокамере «Aramo SG» с определениемвлажность,жирность,гладкость,размерпор,пигментация, тип кожи.3. Исследование кожи лица с помощью конфокальной лазерной сканирующей invivo микроскопии с определением наличия клещей рода Demodex.Статистические: Статистическая обработка данных выполнялась программой IBMSPSS Statistics for Windows, Version 21.0. Armonk, NY, USA: IBM Corporation.Данные представлены как медиана ± стандартное отклонение, а также количествонаблюдений и их процентное соотношение.
Различия считали достоверными прир<0.05.Нормальность распределения выборки проверялась с помощью критерияКолмогорова-Смирнова с поправкой Большева. Для сравнения групп и подгрупппо степени тяжести розацеа, распределению клещей рода Demodex, типов кожи имотодов исследования на наличие клещей рода Demodex (световая микроскопия52соскобов кожи, конфокальная лазерная сканирующая in vivo микроскопия),использовали хи-квадрат (χ2) с описанием наблюдаемых значений, расчетоможидаемых значений и вычислением хи-квадрата для каждой ячейки и общей хиквадрат статистики.Оценкуразличийколичественномупризнакумеждупридвумянезависимымиотсутствиинормальногогруппамипораспределенияпроводили с помощью U-критерия Манна-Уитни.
Для проверки равенства медиандвух и более групп использовали критерии Крускалла-Уоллиса. Для установленияразличий между двумя зависимыми группами и зависимыми изменениямипользовались W-критерием Вилкоксона. Для определения степени корреляциитяжести розацеа и наличия различных видов клещей рода Demodex использоваликоэффициент корреляции Спирмена.2.3. Методика исследованияКлиническая и морфофункциональная оценка состояния кожи лицамужчиниженщинстарше18летпроводиласьнаконсультативно-диагностическом приеме, до и после лечения.
В процессе исследованиясформированы три группы: две группы больных (основная и контрольная) игруппа сравнения, состоящая из здоровых лиц. Вследствие того, что у 20 больныхрозацеа клещи рода Demodex были обнаружены только одним методомисследования, данные этой группы были использованы для статистическойобработки при сравнении эффективности методов диагностики наличия клещейрода Demodex I группа (основная) – 60 больных розацеа, у которых наличие клещейрода Demodex было подтверждено двумя методами исследования(световоймикроскопиейсоскобовиконфокальнойлазерной53сканирующей in vivo микроскопией), данная группа на время лечениябыла разделена на две подгруппы:– подгруппа А (30 человек) получали противопаразитарное лечение ввиде 1% ивермектина наружно 1 раз в день в течении 30 дней,– подгруппа Б (30 человек) получали противопаразитарное лечение ввиде метронидазола 250 мг 2 раза в день per os в течении 30 дней,наружно – 1% метронидазол 1 раз в день 30 дней.Наружные препараты использовались больными один раз в сутки наночь, рекомендовалось наносить их на предварительно очищеннуюкожу лица тонким слоем.
После проведенного антипаразитарноголечения все больные получали соответствующее специфическоелечение розацеа. II группа (контрольная группа) - 60 больных с диагнозом розацеа сотсутствием клещей рода Demodex. У больных II группы двумяметодами исследования клещи рода Demodex найдены не были. III (группа сравнения) - 72 здоровых добровольца.2.3.1. Методика определения клещей рода Demodex с помощью световоймикроскопии соскобовНаличие клещей рода Demodex определяли проведением световоймикроскопии соскобов кожи лица, выдавливаем содержимого сальных желез,эпиляцией ресниц и бровей. За два дня до проведения исследования больные неприменяли наружных лекарственных средств на кожу лица, в день исследования –неумывались.Исследованиепроводилосьспомощьюодноразовогоскарификатора и пинцета.
Материал забирали в местах с наибольшим скоплениемсальных желез на лице – крылья носа, подбородок, межбровная областьметодикой поскабливания, пинцетом выщипывались брови и ресницы. В54заданном месте выбирался участок величиной 1 см2 и обозначался карандашом.Полученный материал помещался на часовое стекло в каплю 10% раствора КОН инакрывался предметным стеклом на срок двух часов с целью достижения полногорастворения эпителиальных клеток. Затем, проводилось микроскопированиематериала с обязательным определением видовой принадлежности клещей родаDemodex (Demodex folliculorum longus, Demodex folliculorum brevis) и ихколичественной нагрузки на единицу площади (1 см2).
Увеличение микроскопасоставляло ×40 и ×100. Больные, имеющие количественную нагрузку более 5взрослых особей клещей на 1см2 и клиническую картину заболевания составилипервую группу. Через 30 дней после проведенного антипаразитарного лечениябыла проведена повторная световая микроскопия соскобов.2.3.2. Методика исследования кожи лица с помощью конфокальной лазернойсканирующей in vivo микроскопииОценка параметров кожи проводилась с помощью конфокальноголазерного сканирующего in vivo микроскопа VivaScope ® 1500 (Lucid Inc.,Rochester, NY, USA) в режиме реального времени с помощью пакета программыVivaScan VS 007.11.12.Принцип работы конфокального микроскопа заключается в способностиразличных тканей к отражению поляризованного света с возможностьюнеинвазивной визуализации клеточных структур в режиме реального времени.Сканирующийлазерныйконфокальныймикроскоппозволяетполучатьизображения черно-бело-серых оттенков размерами от 3 мм × 3 мм до 8 мм × 8 мм(1000 пикселей × 1000 пикселей), так называемые «оптические срезы» с частотойсканирования до 9 кадров в секунду.
Структуры, содержащие меланин и кератинна изображениях имеют белый цвет, воздух и серозная жидкость – черные.Конфокальный лазерный сканирующий in vivo микроскоп VivaScope ® 1500(Lucid ® Inc., Rochester, NY, USA) имеет лазерный диод, излучающий55инфракрасные волны, длиной 830 нм. Причем, 830 нм является оптимальнымизлучением, при котором удается визуализировать необходимые структуры вкоже, но также оно является безопасным, не принося никакого вредаисследуемым.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
