Диссертация (1140186), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Кроме того, поверхность ран была покрытамногослойным плоским эпителием (Рис. 18-19).Рис. 18-19. Группа 1 (С). Гистологические срезы кожных ран на 7-есутки после операции. H&E, х1,25 и 400.46Рис. 20-21. Группа 2 (ФТ). Гистологические срезы кожных ран на 7-есутки после операции. H&E, х1,25 и 400.Рис. 22-23. Группа 3 (РС). Гистологические срезы кожных ран на 7-есутки после операции. H&E, х1,25 и 400.У животных 2-ой (ФТ) (Рис. 20-21) и 3-ей (РС) (Рис. 22-23) групп ранаимела признаки очищения от сгустка крови и некротической массы.Образоваласьмолодаягрануляционнаятканьснеоангиогенезомилейкоцитарной инфильтрацией.3.1.3. Заживление кожных ран на 14-е сутки после разрезаВо время эксперимента на 14-е сутки после разреза у животных 1-ойгруппы (С) чаще наблюдали признакиремоделирования рубцовой ткани,которая была в виде очень тонких тяжей без образования грубого рубца (Рис.24-25). У животных 2-ой (ФТ) и 3-ей (РС) групп к этому сроку ранапредставляла собой зрелую грануляционную ткань, поверхность которой былапокрыта многослойным плоским эпителием (Рис.26,27,28,29).47Рис.
24-25. Группа 1 (С). Гистологические срезы кожных ран на 14 суткипосле операции. H&E, х1,25 и 100.Рис. 26-27. Группа 2 (ФТ). Гистологические срезы кожных ран на 14-есутки после операции. H&E, х1,25 и 400.Рис. 28-29. Группа 3 (РС). Гистологические срезы кожных ран на 14-есутки после операции. H&E, х1,25 и 400.Результаты сравнительного морфологического анализа представлены втаблице (Табл.2).48Таблица 2.
Стадии репаративного процесса на разные сутки послеиспользования разных типов радионожей.Сутки послеразреза3-е суткиТипрадионожа1 ст2стС01ФТРХС10,2000,8000110100000117-е суткиФТ14-е суткиРХСФТРХ00003ст4ст00000100Было обнаружено, что у животных 1-ой группы (С) репарация тканейпосле операции происходит наиболее полно и быстро. На 3-и сутки послеоперации репаративные процессы соответствуют 2-ой стадии восстановленияткани с признаками эпителизации раны, через 7 суток происходит замещениезрелой грануляционной ткани и формирование рубца с полной эпителизациейраневой поверхности (3-я стадия репарации), через 14 суток восстановлениезавершается ремоделированием рубцовой ткани, оставляя едва заметныйфиброзный тяж (Рис.25).
Процессы репарации у животных 2-ой (ФТ) и 3-ей(РС) групп запаздывают и к 14 суткам представлены формированием зрелойгрануляционной ткани с полной эпителизацией, т.е. находятся на 3-ей стадиирепаративного процесса.3.2. Результаты иммуногистохимического исследованияПроведенные иммуногистохимические реакции на ткани крыс даливозможностьлучше понятьтонкостивоздействия на них различных радионожей.репаративныхпроцессовпосле49Маркер пролиферативной активности тканей Ki-67, по процентномусодержанию которого рассчитывали индекс пролиферации, выявляли вмиофибробластических клетках, эндотелии новообразованных сосудов и вклетках эпителия.
Самые высокие показатели маркера (до 86% клеток) в зонерепарации найдены в ранах животных 1-ой группы (С), заполненных новойРис. 30a. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 3-е сутки послевоздействия аппаратом СургитронEMC.Рис. 30б. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 3-е сутки послевоздействия аппаратом Фотек E80.Рис 30в. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 3-е сутки послевоздействия аппаратом Radiosurg2200.50грануляционной тканью с признаками эпителизации (Рис.
30а, 31а,32 а). Уживотных 2-ой (ФТ) и 3-ей (РС) групп Ki-67 был ниже (Рис. 30-32б,в).Рис. 31а. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 7-е сутки послевоздействия аппаратом СургитронEMC.Рис. 31б. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 7-е сутки послевоздействия аппаратом Фотек Е80.Рис. 31в. Экспрессия Ki-67 в зонерепарациивоздействия2200.на7-есуткиаппаратомпослеRadiosurg51Рис. 32а. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 14-е сутки послевоздействия аппаратом СургитронEMC.Рис. 32б.
Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 14-е сутки послевоздействия аппаратом Фотек Е80.Рис. 32в. Экспрессия Ki-67 в зонерепарации на 14-е сутки послевоздействия аппаратом Radiosurg2200.52Исследование уровня экспрессии маркера эндотелия новообразованныхсосудов CD34 в грануляционной ткани в зоне репарации в ране послеволнового воздействия позволило выявить интересные факты.
Так, наиболеевысокие показатели маркера в этой области были в ранах животных 1-ойгруппы (С) на 3, 7 и 14 сутки после оперативного воздействия (Рис. 33а,34а,35а). У животных 2-ой (ФТ) и 3-ей (РС) групп уровень экспрессии CD34 былниже (Рис. 33-35б,в).Рис. 33а. CD34 в зоне репарации ран,индуцированныхаппаратомСургитрон ЕMС на 3-е сутки послевоздействия.Рис. 33б.
CD34 в зоне репарации ран,индуцированных аппаратом ФотекЕ80 на 3-е сутки после воздействия.Рис. 33в. CD34 в зоне репарации ран,индуцированных аппаратом Radiosurg2200 на 3-е сутки после воздействия.53Рис. 34а. CD34 в зоне репарации ран,индуцированныхаппаратомСургитрон ЕMС на 7-е сутки послевоздействия.Рис.
34б. CD34 в зоне репарации ран,индуцированных аппаратом ФотекЕ80 на 7-е сутки после воздействия.Рис. 34в. CD34 в зоне репарации ран,индуцированных аппаратом Radiosurg2200 на 7-е сутки после воздействия.54Рис. 35а. CD34 в зоне репарации ран,индуцированныхаппаратомСургитрон ЕMС на 14-е сутки послевоздействия.Рис. 35б. CD34 в зоне репарации ран,индуцированных аппаратом ФотекЕ80 на 14-е сутки после воздействия.Рис. 35в. CD34 в зоне репарации ран,индуцированныхаппаратомRadiosurg 2200 на 14-е сутки послевоздействия.Коллаген – белок, составляющий основу соединительной ткани иобеспечивающий её прочность и эластичность, синтезируется фибробластами.Коллаген 3 типа (Col 3) начинает нарабатыватьсяв ткани крыс в зонерепарации после радиоволнового действия ножа, в основном, после 7 сутокпосле операции и в большей степени у животных 1-ой (С) и 2-ой (ФТ) групп.55Синтез коллагеновых волокон происходит в зрелой грануляционной ткани,прежде всего, со стороны границ ран (Рис.
36, 37).Коллаген 1 типа (Col 1) образуется в ране позже, чем коллаген 3 типа и,в основном, к 14 суткам (Рис. 38).Рис. 36а. Col 3 в зоне репарации раны,индуцированнойаппаратомСургитрон ЕМС на 7-е сутки послевоздействия.Рис. 36б. Col 3 в зоне репарациираны, индуцированной аппаратомФотекЕ80 на 7-е сутки послевоздействия.Рис.36в.Col 3 в зоне репарации раны,индуцированной аппаратом Radiosurg2200 на 7-е сутки после воздействия.56Проведенныеморфологическиеииммуногистохимическиеисследования показали, что у животных 3-ей группы имелись статистическидостоверные отличия как в сроках, так и в механизмах заживления раны.Особенности регенерации ткани в области раны в 1-ой группе (С)включают в себя меньшее повреждение ткани вокруг разреза, наличие менеевыраженной сосудистой реакции, что выражалось в отсутствии сгустка кровив ране к 3 суткам регенерации.
Отсутствие кровяного сгустка являетсяпрофилактикой вторичной инфекции. Все это позволило быстро восстановитьповрежденную ткань.Животные 1-ой группы имели более короткие сроки заживленияпослеоперационной раны. Во 2-ой и 3-ей группах даже к 7-м и 14 суткамэксперимента еще была стадия грануляционной ткани и начала роста эпителияв ране, в то время как в 1–ой группе рана фактически зажила (Табл.2).Результаты иммуногистохимических реакций на ткани крыс такжеподтверждают более эффективно протекающую регенерацию у животных 1-ойгруппы (С).
Обнаружили, что самые высокие значения уровня экспрессиимаркера Ki-67 – 86% в раневой зоне регистрируется уже на 3 сутки послеоперационного вмешательства, к 7 суткам он снижается до 60 % и к 14 суткаминдекс пролиферации резко падает до 6 %, каки в зрелых тканях кожи(Табл.3).Таблица 3. Экспрессия Ki-67 в зоне репарации на разных сроках последействия разных типов ножей на ткань крыс.Сутки послевоздействияСФТРС30,860,40,5870,60,420,36140,060,240,357У животных 2-ой группы (ФТ), чьи разрезы на коже были сделаны спомощью Фотек Е80, уровень пролиферации на 3-й день после операции был в2 раза ниже, чем у животных 1-й группы и составил 40% (Табл.3). Значит,процессы репарации протекали в 2 раза медленнее.















