Диссертация (1140178), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Лабораторное исследование проводилосьоднократно, в катамнезе через 12-36 мес.Уровень общего иммуноглобулина E определяли иммуноферментнымметодом с использованием набора реактивов ЗАО «Алкор Био» (Россия). Внаборе ИФА-общий IgE использовался «сэндвич»-вариант твердофазногоиммуноферментногоанализа.Дляреализацииэтоговариантабылииспользованы два моноклональных антитела с различной эпитопнойспецифичностью к IgE. Одно из них иммобилизовано на твердой фазе(внутренняя поверхность лунок), второе конъюгировано с пероксидазой.
Влунках при добавлении исследуемого образца и конъюгата анти-IgEпероксидаза,вовремяинкубацииодновременнопроисходила49иммобилизация общего IgE, содержащегося в исследуемом образце, исвязывание его с конъюгатом. При удалении содержимого из лунок ипромывке происходило удаление избытка конъюгата анти-IgE-пероксидаза,не связавшегося с иммобилизованным в ходе инкубации IgE. Количествосвязавшегося конъюгата прямо пропорционально количеству общего IgE висследуемом образце. Во время инкубации происходило окрашиваниераствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количествусвязанного конъюгата анти-IgE-пероксидаза. После измерения оптическойплотности раствора в лунках на основании калибровочного графикарассчитывалась концентрация общего IgE в исследуемых образцах.Полученные результаты выражались в МЕ/мл.
Интерпретация результатовпроводилась в соответствии с принятыми нормативами [174].УровеньIL-17Аопределялииммуноферментнымметодомбезэкстракции с использованием набора реактивов фирмы «BenderMedSystems»(Австрия).Внабореиммуноферментногоиспользовалсяанализа.Длявариантреализациитвердофазногоэтоговариантамоноклональное антитело к IL-17А было иммобилизовано на твердой фазе(внутренняя поверхность лунок). На первой стадии анализа IL-17А,содержащийся в калибровочных и исследуемых пробах, связывался сантителами, иммобилизованными на внутренней поверхности лунок. Навторой стадии анализа иммобилизованный IL-17А взаимодействовал с темижеантителами,конъюгированнымиспероксидазой.Количествосвязавшегося конъюгата прямо пропорционально количеству IL-17А висследуемомобразце.Вовремя инкубациис субстратнойсмесьюпроисходило окрашивание раствора в лунках.
Степень окраски прямопропорциональнаколичествусвязавшихсямеченныхантител.Послеизмерения оптической плотности раствора в лунках на основаниикалибровочной кривой рассчитывалась концентрация IL-17А в определяемыхобразцах. Полученные результаты выражались в нг/мг.50Иммунологические исследования выполнялись на базе лабораторииклинической иммунологии ГБУЗ ЯО областной клинической больницы г.Ярославля (заведующая лабораторией - Л.А. Цыганова).2.3. Статистическая обработка результатов исследованияСтатистическаяобработкаполученныхданныхпроведенасиспользованием пакета компьютерных программ Statistica v.7.0, Med Calc12.5.0.0. Нормальность распределения проверяли с использованием критерияШапиро-Уилка. Для анализа нормально распределенных количественныхпризнаков использовались параметрические методы с вычислением среднихзначений: среднего арифметического (М) и средней ошибки (m). Для анализаколичественных признаков ненормального распределения, а также дляанализа качественных признаков использовались непараметрические методы:вычисление медиан (Ме) и интерквартильных интервалов между 25-м и 75процентилями.
Для сравнения двух зависимых групп использовался критерийВилкоксона. Для сравнения двух независимых групп использовался критерийМанна Уитни, χ2. Анализ взаимосвязи между признаками проводили припомощи метода ранговой корреляции по Спирмену. Достоверными считалиразличияприр<0,05.Дляхарактеристикивариациииспользовалсядоверительный интервал (ДИ) с вероятностью 99%.
По результатамисследованияклинико-функциональныхпоказателейдыхательнойивегетативной нервной системы у детей, перенесших острые обструктивныебронхиты, был проведен ROC-анализ (Receiver Operator Characteristic), сприменением логистической регрессии (разновидность множественной(многомерной) регрессии)), представляющий анализ характеристическихкривых с вычислением площади под ROC кривыми AUC (Area Under Curve),которая составляла 0,973, что соответствовало отличному качеству помодели с ДИ 0,89-0,99.
Чувствительность метода составила 97,37% с ДИ86,2-99,9. Специфичность метода составила 86,96% с ДИ 66,4-97,2; сположительнымзначениемправдоподобия7,46сДИотрицательным значением правдоподобия 0,030 с ДИ 0,004-0,2.2,6-21,5и51ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХДЕТЕЙОбследовано 210 детей в возрасте 2-36 мес., перенесших острыеобструктивные бронхиты (ООБ) (группа наблюдения), после купированиябронхообструктивного синдрома (БОС), на 6-10 сутки пребывания встационаре.1 группа (с отягощенным анамнезом по аллергологической патологии)составила 109 человек, из них 74 мальчика и 35 девочек. Средний возрастдетей этой группы составил 18,5±2,0 месяцев.
2 группа (без отягощенногоанамнеза по аллергологической патологии) составила 101 человек, из них 65мальчиков и 36 девочек. Средний возраст данной группы составил 14,6±1,4месяцев (р1-2>0,05).При сравнительной оценке клинико-анамнестических данных убольшинства детей, перенесших ООБ, были определены отягощающиефакторыбиологического,генеалогическогоисоциальногоанамнеза.Выявлено, что у детей 1 группы в 2 раза чаще, чем во 2 группе отмечалосьнеблагоприятное течение антенатального и/или интранатального периодовразвития(гестозыпреждевременных1-йродов,иОРИ2-йвополовинывремябеременности,беременности,угрозаобострениехронических заболеваний, анемии у матери и др.) (соответственно, у 80,2 и у44,2%; p<0,05) (рис.10).
Патологическое течение родов встречалось у 79%детей 1 группы и у 52% детей 2 группы (р<0,05). В 1 группе чащевстречались роды путем кесарева сечения (соответственно, у 15,4 и у 6,6%;p<0,05); обвитие пуповиной в родах (соответственно, у 13,7 и у 4,4%;p<0,05); стремительные роды (соответственно, у 8,6 и у 4,4%; p<0,05).Недоношенными (35-37 нед.) родились 6,8% детей 1 группы и 11% детей 2группы (р<0,05).52Совокупность вышеперечисленных данных негативно влияет наформирование функциональных систем организма, в том числе дыхательнойсистемы.Рис.10.Частотавстречаемостинеблагоприятноготеченияантенатального и интранатального периодов развития в зависимости отналичия отягощенного аллергологического анамнеза.Достоверность различия показателей между 1 и 2 группами по критерию Манна-Уитни: *- р<0,05.Почти каждый четвертый ребенок, перенесший ООБ, проживал внеблагоприятных жилищно-бытовых условиях (сырость, плесень в квартиреили доме) (соответственно, 25,7 и 24,0% детей; р>0,05).
У 42,8% детей 1группы и 36,0% детей 2 группы отмечалась скученность в месте проживания.В большинстве семей 1 и 2 групп выявлена высокая «антигеннаянагруженность» места проживания: у 52,9% детей 1 группы и у 50,0% детей2 группы имелись домашние животные (р>0,05); у 81,4% детей 1 группы и у78% детей 2 группы - ковры, открытые стеллажи с книгами (р>0,05); у 43%детей 1 группы и у 26% детей 2 группы отмечалось наличие средипостельных принадлежностей изделий из пуха, пера или шерсти (р>0,05).Родители 35% детей 1 группы и 12% детей 2 группы указывали наналичие профессиональной вредности (работа на заводе - 1 и 2 сеткавредности, работа с токсическими веществами, вибрация) (р>0,05).53ВобеихгруппахпациентовсООБ,особеннов1группе(соответственно, 68 и 65%; p>0,05) отмечена высокая частота встречаемостипассивного курения, что негативно влияло на функциональное состояниеорганов дыхания, увеличивало риск развития бронхиальной астмы (БА).В 1 группе наследственная отягощенность по аллергологическомуанамнезу проявлялась наличием БА - в 51,0% семей, атопического дерматита- в 25,5%, аллергического ринита в 6,8%, поллиноза в 3,4%, в 13,3% семейотмечалась сочетанная аллергологическая патология.
В 39,2% случаеваллергические заболевания отмечались у родственников ребёнка по линииматери, в 18,7% случаев - у родственников по линии отца. В 10,2% случаеваллергопатология была диагностирована у братьев и сестер ребёнка, в 23,8%случаев - у матери, в 11,9% случаев - у отца ребёнка. Аллергическиезаболевания у 2 и более родственников в 2 и более поколениях (достовернаянаследственнаяпредрасположенностькаллергическимзаболеваниям)определялись у 15,3% детей.У пациентов 1 группы наблюдалась отягощенность собственногоаллергоанамнеза.
Так, у 22,8% детей этой группы диагностированатопический дерматит, у 15% - острые аллергические реакции в виде остройкрапивницы, отека Квинке.Профилактические прививки у 33,3% пациентов 1 группы и у 61,4%пациентов2группыбылипроведеныповозрасту(p<0,05),поиндивидуальному графику (соответственно, у 58,3 и у 30,7%; p<0,05). Удетей 1 группы чаще отмечались патологические реакции на введение вакцин(гипертермия, отёк и покраснение в месте инъекции) (соответственно, у 20,7и у 3,8%; p<0,05).Важные сведения были получены при анализе показателей остройреспираторной заболеваемости, характеризующих уровень резистентностидетей группы наблюдения. Отмечено, что большинство детей 1 и 2 групп,перенесших ООБ, начали болеть ОРИ уже на первом году жизни(соответственно, 87 и 78% детей; р>0,05).
Первый эпизод ООБ у54большинства детей 1 и 2 группы развился на первом году жизни(соответственно, у 77 и у 72% детей; р>0,05), средний возраст развитияпервого эпизода ООБ в 1 группе 6,3±0,5 мес., во 2 группе 6,0±0,5мес.(р>0,05). Повторные острые обструктивные бронхиты наиболее частонаблюдались у пациентов 1 группы по сравнению со 2 группой(соответственно, у 68 и у 42%; p<0,05). Более частая заболеваемость ОРИ на1 году жизни наблюдалась у детей 1 группы (соответственно, 4,7±0,2 и2,6±0,2 раз в год; р<0,05) (рис.11).раз в год4,7*52,6*4Группа 13Группа 2210Рис.11. Сравнительная характеристика заболеваемости ОРИ на 1 годужизни у детей, перенесших ООБ, в зависимости от отягощенностиаллергологического анамнеза.Достоверность различия показателей между 1 и 2 группами по критерию Манна-Уитни:* р<0,05.При поступлении в стационар у всех детей отмечались жалобы намалопродуктивный кашель, одышку экспираторного характера, повышениетемпературы тела.
В 1 группе при ООБ чаще температура тела неподнималась выше субфебрильной (соответственно, у 62,3 и у 23,0%;р<0,05). При осмотре у всех детей было выявлено вздутие грудной клетки,участиевактедыханиявспомогательноймускулатуры,втяжениемежреберных промежутков. Отмечено, что почти у половины (42%) детей 1группы ООБ сопровождался дыхательной недостаточностью 1-2 степени соснижением сатурации кислорода в крови при пульсоксиметрии менее 93%, илишь у 7% детей 2 группы (р<0,05).55У всех детей перкуторно определялся коробочный оттенок легочногозвука без локальности.
При аускультации выслушивалось жесткое дыхание,удлиненный свистящий выдох, диффузные с обеих сторон сухие свистящиехрипы, у некоторых детей - влажные среднепузырчатые хрипы. У детей 1 и 2групп не было выявлено достоверных отличий по продолжительности БОС.При обследовании в стационаре у 41,3% 1 группы и у 44,2% 2 группы,на 1 году жизни был диагностирован рахит 1 и 2 степени (р>0,05), анемиядефицитная легкой степени тяжести (соответственно, у 7,5 и у 11%; р>0,05),паратрофия (соответственно, у 11,3 и у 13,3%; р>0,05), гипотрофия 1 степени(соответственно, у 2,5 и у 9,5%; р<0,05) (рис.12).%4544,241,34035302520Группа 11511107,511,3Группа 213,39,5*502,5*РахитАнемияПаратрофияГипотрофияРис.12.















