Диссертация (1140149), страница 30
Текст из файла (страница 30)
Корреляционные взаимосвязи между молекулярными критериями нарушения рецептивности эндометрия и клинико-анамнестическими особенностями у пациенток с бесплодием нафоне ХЭТакже определена умеренная корреляционная зависимость между длительностью течения ХЭ и молекулярными критериями нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием, ассоциированным с ХЭ: обратная зависимость –с экспрессией ER в железах (R= -0,507 при р<0,0001) и строме эндометрия (R= 0,622 при р<0,0001), экспрессией PR в железах (R -0,560 при р<0,0001) и строме эндометрия (R= -0,572 при р<0,0001), экспрессией LIF в железистых эпителиоцитахэндометрия (R= -0,536 при р<0,0001) и на поверхности пиноподий (R= -0,673 при135р<0,001), экспрессией CLDN4 в клетках поверхностного эпителия эндометрия (R= 0,611 при р<0,0001) и в основании пиноподий (R= -0,605 при р<0,0001); прямая зависимость – с прогестерон-эстрогеновым соотношением PR/ERα в строме эндометрия (R=0,557 при р<0,0001) (рис.
28).Correlation: r = -0,7216Correlation: r = -0,707310015090ER в строме эндометрия, баллыER в железах эндометрия, баллы1401301201101008070605040903080-1012345длительность заболевания6-1701Correlation: r = -0,660445670,95 Conf.Int.200190190PR в строме эндометрия, баллыPR в железах эндометрия, баллы3Correlation: r = -0,6718200180170160150180170160150140140-1012345длительность заболевания67-1012345длительность заболевания0,95 Conf.Int.Correlation: r = -,5359670,95 Conf.Int.Correlation: r = -0,6731776655длительность заболеванияLIF в железах эндометрия, баллы2длительность заболевания0,95 Conf.Int.4324321100-1-1-101234длительность заболевания5670,95 Conf.Int.-101234LIF в пиноподиях, баллы5670,95 Conf.Int.136Correlation: r = -,605376655CLDN4 в основании пиноподийCLDN4 на апикальной поверхности поверхностныхэпителиоцитовCorrelation: r = -,611474321432100-1-1-1012345длительность заболевания6-17012345длительность заболевания0,95 Conf.Int.670,95 Conf.Int.Рисунок 28.
Корреляционные взаимосвязи между длительностью течения ХЭ и молекулярнымикритериями нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием на фоне ХЭКроме того, установлена сильная корреляционная зависимость между количеством АЭАТ в крови и молекулярными критериями нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием, ассоциированным с ХЭ: обратная зависимость– с экспрессией ER в железах (R= -0,790 при р<0,001) и строме эндометрия (R= 0,843 при р<0,001), экспрессией PR в железах (R= -0,612 при р<0,0001) и строме эндометрия (R= -0,621 при р<0,0001), экспрессией LIF в железистых эпителиоцитахэндометрия (R= -0,804 при р<0,001) и на поверхности пиноподий (R= -0,914 прир<0,001), экспрессией CLDN4 в клетках поверхностного эпителия эндометрия (R= 0,838 при р<0,001) и в основании пиноподий (R= -0,883 при р<0,001); прямая зависимость – с прогестерон-эстрогеновым соотношением PR/ERα в строме эндометрия(R=0,816 при р<0,001) (рис.
29).Correlation: r = -,8923Correlation: r = -,9118135801307570ER в строме эндометрия, баллыER в железах эндометрия, баллы12512011511010510065605550459540903585-50050100150АЭАТ2002503000,95 Conf.Int.30-50050100150АЭАТ2002503000,95 Conf.Int.137Correlation: r = -,6656Correlation: r = -,6736185176174180170175PR в строме эндометрия, баллыPR в железах эндометрия, баллы172168166164162160158156170165160155154152150150148-50050100150200250АЭАТ145-50300050100150200250АЭАТ0,95 Conf.Int.3000,95 Conf.Int.Correlation: r = ,87119прогестерон-эстрогеновое соотношение в строме, ед.5,04,84,64,44,24,03,83,63,43,23,02,82,62,42,22,0-50050100150200250АЭАТ3000,95 Conf.Int.Correlation: r = -,8040Correlation: r = -0,9144730062004150АЭАТLIF в железах эндометрия, баллы25053100250100-1-50-50050100150200АЭАТ250300-101345670,95 Conf.Int.Correlation: r = -,883076655CLDN4 в основании пиноподийCLDN4 на апикальной поверхности поверхностныхэпителиоцитовCorrelation: r = -,8378743210-1-502LIF в пиноподиях, баллы0,95 Conf.Int.43210050100150АЭАТ2002503000,95 Conf.Int.-1-50050100150АЭАТ2002503000,95 Conf.Int.Рисунок 29.
Корреляционные взаимосвязи между сывороточным уровнем АЭАТ и молекулярными критериями нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием на фоне ХЭ138По результатам ROC-анализа, проведенного относительно экспрессииCLDN4 в поверхностных эпителиоцитах эндометрия и в основании пиноподий, получены математические модели «отличного» качества – AUC = 0,947±0,023 и AUC= 0,977±0,016, соответственно. Точками «cut-off» определены уровни экспрессииCLDN4, равные 1,7 и 1,1 баллам в апикальной части поверхностных эпителиоцитови в основании пиноподий, соответственно.
Таким образом, снижение экспрессииCLDN4 менее 1,7 баллов в поверхностных эпителиоцитах и менее 1,1 балла в основании пиноподий у пациенток с ХЭ ассоциировано с развитием бесплодия с вероятностью 91,7% и 94,2%, соответственно (табл. 27, рис. 30).Таблица 27Значения чувствительности и специфичности для математической модели«уровень экспрессии CLDN4 – развитие бесплодия на фоне ХЭ»ПрогностическоеТочностьЗначение, %модели,положиотрица%тельноетельноеЭкспрессия CLDN4 в апикальной части поверхностных эпителиоцитовХарактеристикиматематическоймоделиРассчитанные значенияот95% Д.И.доЧувствительностьSe, %СпецифичностьSp, %92,1982,9896,6291,0780,7496,1392,1982,9896,6291,0780,7496,1391,6784,9995,5394,5585,1598,1394,1788,2297,21Экспрессия CLDN4 в основании пиноподийРассчитанные значенияот95% Д.И.до95,3187,1098,39экспрессия CLDN4 в эпителиоцитах эндометрия92,8683,0297,1993,8585,2297,58экспрессии CLDN4 в основании пиноподийРисунок 30.
ROC-кривые для математических моделей «уровень экспрессии CLDN4 в поверхностных эпителиоцитах эндометрия и в основании пиноподий – развитие бесплодия на фоне ХЭ»(AUC = 0,947±0,023 и 0,977±0,016, соответственно)139С целью оценки рецепторного аппарата эпителиоцитов, ответственного зараспознавание микробных агентов, инициирующих развитие ХЭ, у пациенток всехисследуемых групп была изучена экспрессия в эндометрии TLRs2, 4, распознающихструктуры клеточной стенки бактерий, а также TLR9, способного связываться сДНК-содержащими вирусами. Экспрессия TLRs определялась в виде коричневогоокрашивания цитоплазмы клеток поверхностного и железистого эпителия, стромыи эндотелия сосудов эндометрия.
Выявленные нами результаты экспрессии TLRsпри ХЭ представлены в таблице 28 и на рисунках 31–33.Таблица 28Экспрессия TLRs2, 4, 9 в эндометрии у пациенток групп исследованияРаспределение TLRsв эндометрии1. TLR2 в эпителии эндометрия, баллы2. TLR2 в строме эндометрия, баллы3. TLR2 в сосудах эндометрия, баллы4. TLR4 в эпителии эндометрия, баллы5. TLR4 в строме эндометрия, баллы6. TLR4 в сосудах эндометрия, баллы7. TLR9 в эпителии эндометрия, баллы8. TLR9 в строме эндометрия, баллы9. TLR9 в сосудах эндометрия, баллыГруппа I(n=64)Группа II(n=56)Контрольнаягруппа (n=30)2,75±0,2*1,85±0,3*1,1±0,22,95±0,22,35±0,6***1,65±0,5*6,0±0,0***3,45±0,3*, ***4,1±0,2*, ***2,85±0,5**1,65±0,21,0±0,33,2±0,32,95±0,8***1,85±0,55,1±0,2**, ***5,3±0,1**, ***5,2±0,1**, ***1,67±0,4*, **1,17±0,2*0,89±0,23,22±0,32,33±0,41,94±0,3*4,0±0,6**4,0*±0,2**3,33±0,4*, *** - разница показателей между основной и контрольной группами статистически достоверно значима;** - разница показателей между группами сравнения и контроля статистически достоверно значима;*** - разница показателей между основной группой и группой сравнения статистически достоверно значима.32,752,852,521,851,71,651,51,211,110,90,50эпителийосновная группастромагруппа сравнениясосудыконтрольная группаРисунок 31.
Экспрессия TLR2 в эндометрии у пациенток исследованных группКак показано в таблице 28 и на рисунке 31, экспрессия TLR2 в эпителии, стромеи эндотелии сосудов эндометрия была максимальной у пациенток основной группы140и оценивалась в 2,75±0,2, 1,85±0,3 и 1,1±0,2 баллов, соответственно. В группе сравнения было отмечено некоторое преобладание экспрессии TLR2 в поверхностномэпителии эндометрия по сравнению с основной группой – 2,85±0,5 балла против2,75±0,2 баллов, соответственно; однако накопление данного маркера в строме эндометрия и эндотелии его сосудов у пациенток II группы было ниже аналогичныхпоказателей у женщин I группы – 1,65±0,2 и 1,0±0,3 баллов, соответственно.
Экспрессия TLR2 в группе контроля во всех исследуемых структурах эндометрия быланаименьшей и составляла 0,89±0,2, 1,17±0,2 и 1,67±0,4 баллов в эндотелии сосудов,строме и эпителии эндометрия, соответственно. При этом отмечалось достоверноеснижение накопления маркера в эпителии и строме эндометрия у женщин группыконтроля по сравнению с основной группой (р<0,05) и группой сравнения (р<0,001).Экспрессия TLR4 выявлялась в умеренном количестве во всех исследуемыхструктурах эндометрия у пациенток всех изучаемых нами групп (табл.
28, рис. 32).При этом было выявлено некоторое понижение экспрессии маркера в эпителии,строме и эндотелии сосудов эндометрия в основной группе по сравнению с группой сравнения. Наибольшее накопление маркера в эндотелии сосудов эндометриябыло установлено у женщин контрольной группы – 1,94±0,3 балла, в строме эндометрия – у пациенток группы сравнения – 2,95±0,8 баллов, а в эпителии эндометрия – в группах сравнения и контроля, соответствуя 3,2±0,3 баллам в обоих случаях. Однако статистически достоверная разница в экспрессии TLR4 была обнаружена лишь в строме эндометрия у пациенток I и II групп (р<0,05), а также в эндотелиисосудов эндометрия у женщин основной и контрольной групп (р<0,05).3,53,233,22,952,952,52,42,321,851,91,651,510,50эпителийосновная группастромагруппа сравнениясосудыконтрольная группаРисунок 32.
Экспрессия TLR4 в эндометрии у пациенток исследованных групп141Экспрессия TLR9 в эндометрии превосходила накопление в нем других изученных нами TLRs во всех исследуемых группах (табл. 28, рис. 33). При этом у пациенток основной группы наибольшее количество TLR9 экспрессировалось в клетках поверхностного эпителия слизистой оболочки матки, соответствуя 6,0±0,0 баллам, тогда как в строме эндометрия и эндотелии его кровеносных сосудов наблюдалось умеренное накопление маркера, равное 3,45±0,3 и 4,1±0,2 баллам, соответственно.
В группе сравнения была выявлена высокая экспрессия TLR9 во всех изучаемых структурах эндометрия: в эпителии – 5,1±0,2 балла, в строме – 5,3±0,1 балла и в эндотелии сосудов – 5,2±0,1 балла. В группе контроля отмечалось умереннонакопление маркера в эндометрии, что соответствовало 3,3±0,4 баллам в эндотелиисосудов и по 4,0±0,6 и 4,0±0,2 балла – в эпителии и строме эндометрия, соответственно. При этом разница в экспрессии TLR9 во всех изучаемых структурах эндометрия по всем исследуемым группах была достоверно значима (р<0,05).665,355,25,14444,13,453,33210эпителийосновная группастромагруппа сравнениясосудыконтрольная группаРисунок 33. Экспрессия TLR9 в эндометрии у пациенток исследованных группПри оценке средних уровней экспрессии TLRs в эндометрии выявлена максимальная экспрессия TLR9 в эпителии, строме и эндотелии сосудов слизистойоболочки матки во всех исследуемых группах.
С другой стороны, накопление TLR2во всех изучаемых структурах эндометрия у всех пациенток было минимальным посравнению с другими TLRs. Экспрессия TLR4 в одноименных структурах эндометрия во всех исследованных нами группах была умеренно выражена (рис. 34–36).142665,15443,232,753,22,952,8521,710TLR 2TLR 4основная группаTLR 9группа сравненияКонтрольная группаMean; Box: Mean±SE; Whisker: Mean±SD6,56,05,55,04,54,03,53,02,52,0TLRs2TLRs 4TLRs 91,5основная группагруппа сравнениягруппа контроляРисунок 34. Экспрессия TLRs2, 4, 9 в поверхностных эпителиоцитах эндометрия у пациенток исследованных групп65,35443,4532,952,352,321,851,651,210TLR 2Основная группаTLR 4группа сравненияTLR 9контрольная группа143Mean; Box: Mean±SE; Whisker: Mean±SD654321TLRs2TLRs4TLRs90основная группагруппа сравнениягруппа контроляРисунок 35.
Экспрессия TLRs2, 4, 9 в строме эндометрия у пациенток исследованных групп65,2544,13,3321,851,91,6511,110,90TLR 2TLR 4основная группаTLR 9группа сравненияконтрольная группаMean; Box: Mean±SE; Whisker: Mean±SD6543210основная группагруппа сравнениягруппа контроляTLRs2TLRs4TLRs9Рисунок 36. Экспрессия TLRs2, 4, 9 в эндометрии сосудов эндометрия у пациенток исследованныхгрупп144Итак, в эндометрии пациенток основной группы на 18-24 день цикла выявлялись такие молекулярные критерии ХЭ с аутоиммунным компонентом, как высокая экспрессия CD16, 20, 56 и HLA-DRII, низкая экспрессия ER и умеренное накопление PR в железистых эпителиоцитах и строме, резкое снижение экспрессии LIF вклетках железистого эпителия и на поверхности пиноподий, низкое накоплениеCLDN4 в апикальной части поверхностных эпителиоцитов и в основании пиноподий, умеренная экспрессия TLR2 в поверхностных эпителиоцитах и низкое егонакопление в строме и эндотелии сосудов, умеренная экспрессия TLR4 в эпителиии строме и низкое его накопление эндотелии сосудов, высокая экспрессия TLR9 вэпителии и эндотелии сосудов и умеренное его накопление в строме.Иммуногистохимическое исследование эндометрия у пациенток группы сравнения выявило высокую экспрессию в нем CD16, 20, 56 на фоне малого количестваHLA-DRII-позитивных клеток, достоверно более высокое по сравнению с I группой, умеренное накопление ER и PR в железах и строме, умеренную экспрессиюLIF в железах и строме и его высокое накопление на поверхности пиноподий, умеренную экспрессию CLDN4 в клетках поверхностного эпителия и в основании пиноподий, умеренное накопление TLR2 в поверхностном эпителии и низкую егоэкспрессию в строме и эндотелии сосудов, умеренную экспрессию TLR4 в эпителии и строме при низком накоплении маркера в эндотелии сосудов, а также высокую экспрессию TLR9 во всех изученных структурах эндометрия.В эндометрии у женщин контрольной группы не были выявлены иммуногистохимические маркеры воспаления CD16, 20, 56 и HLA-DRII; экспрессия ER и PR вжелезах и строме эндометрия была умеренной, причем достоверно более высокой,чем в основной группе и группе сравнения; отмечалась высокая экспрессия LIF вклетках железистого эпителия и на поверхности пиноподий, а также высокоенакопление CLDN4 в клетках поверхностного эпителия и в основании пиноподий.Кроме того, в группе контроля была обнаружена статистически значимая низкаяэкспрессия TLR2 во всех исследуемых структурах эндометрия; экспрессия TLR4была умеренной и достоверно превосходила накопление маркера в поверхностномэпителии и эндотелии сосудов в основной группе и группе сравнения; экспрессияTLR9 в эндометрии была умеренной, причем отмечалось статистически значимоеее снижение в эпителии и эндотелии сосудов по сравнению с другими группами.145ГЛАВА 4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
