Диссертация (1140110), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Используете ли Вы дополнительные средства по гигиене полости рта?Да (какие?)НетРис. 1 – Анкета для опроса пациентов34При внешнем осмотре учитывалось состояние лица в покое и при открывании рта.Обследование полости рта начиналось с осмотра преддверия, уровня прикрепления уздечек верхней и нижней губы, оценки глубины и типа формирования преддверия. Обращалось внимание на расположение зубов, наличие кариеса и его осложнений, неполноценные ортопедические конструкции или реставрации, наличие зубных отложений.Состояние десны оценивалось в отношении изменения рельефа, толщины, наличия гиперемии, отёчности, их локализации (на уровне десневых сосочков, маргинальнойили альвеолярной десны), состояния десневых сосочков, их консистенции, прилегания кшейкам зубов.
Обращалось внимание на болезненность десны при пальпации.Глубина пародонтального кармана измерялась со стороны мезиобуккальной,мезиолингвальной, дистальнобуккальной, дистальнолингвальной, буккальной илингвальной поверхностей. Клиническая потеря прикрепления определялась путёмизмерения расстояния от эмалевоцементной границы до дна пародонтального кармана со стороны интерпроксимальных поверхностей.Патологическая подвижность зубов оценивалась по классификации А.И. Евдокимова[16]. I степень подвижности мы оценивали как 1 балл; II степень подвижности как 2 балла;III степень подвижности – 3 балла.
Критерием для определения степени тяжести пародонтита являлась глубина пародонтальных карманов. Лёгкая степень пародонтита определялась втом случае, если глубина кармана не превышала 3 мм; в случае, если пародонтальный карман имел глубину в пределах 3–6 мм, фиксировался пародонтит средней степени тяжести.При глубине кармана свыше 6 мм был диагностирован пародонтит тяжёлой степени.2.2. Индексная оценка состояния тканей пародонтаУ всех включённых в исследование пациентов определялись:– индекс кровоточивости десневой борозды –PBI (Muhleman,1975) [17];– пародонтальный индекс Russel (1956) [6];– индекс налёта–OHI-S (Green, Vermillion, 1969) [16];– индекс воспаления пародонта PMA (в модификации Parma (1960)) [16].Индекс PBI использовался для определения степени кровоточивости сосочковпосле осторожного зондирования десневой борозды. Зондирование осуществлялосьна язычной поверхности первого и третьего квадрантов и на вестибулярных поверх-35ностях второго и четвёртого квадрантов.
Значения индекса определялось отдельнодля каждого квадранта, а затем выводилось среднее значение для всего прикуса. Использовалась следующая оценка степени кровоточивости: 0 степень, кровоточивостьотсутствовала; I степень, появление отдельных точечных кровотечений; II степень,наличие многочисленных точечных кровотечений или линейного кровотечения; IIIстепень, заполнение кровью межзубного десневого треугольника; IV степень, послезондирования появлялась интенсивная кровоточивость.Пародонтальный индекс Russel (1956) позволяет учитывать тяжесть заболевания пародонта: 0 – пародонт интактный; 1 – лёгкий гингивит, не распространившийся вокруг зуба, кровоточивости нет; 2 – гингивит средней тяжести вокругвсего зуба, зубодесневое соединение сохранено; 4 – наличие признаков воспаления вокруг десны, начальная стадия резорбции вершин межзубных перегородок;оценка даётся рентгенологически; 6 – гингивит, имеется пародонтальный карман;нарушений функции нет, зуб неподвижен; 7 – выраженная деструкция тканей пародонта, наличие пародонтального кармана, жевательная функция зуба нарушена,зуб подвижен.Индекс в норме равен 0, вычисляется по формуле:сумма оценок у каждого зубаPI= число зубов у обследуемого × 100(1)Оценочные критерии: 0,1–1,0 – начальная и легкая степень заболевания; 1,5–4,0 –деструктивные изменения, характерные для средней степени тяжести заболевания; 4,0–8,3 – тяжелая степень заболевания.Индекс гигиены OHI-S представляет собой упрощённый индекс гигиены полости рта, который определяется путём оценки площади поверхности зуба, покрытой налётом и/или зубным камнем, без использования специальных красителей.
Дляопределения OHI-S исследовалась щёчная поверхность 16-го и 26-го зубов, губнаяповерхность 11-го и 31-го зуба, язычная поверхность 36 и 46 зубов путём перемещения кончика зонда от режущего края в направлении десны.Отсутствие зубного налёта – 0, зубной налёт до 1/3 поверхности зуба получалиндекс 1, зубной налёт от 1/3 до 2/3 поверхности зуба – 2, зубной налёт, покрывавшийболее 2/3 поверхности эмали зуба – 3. Затем осуществлялась оценка зубного камня потакому же принципу.36Для расчёта индекса OHI–S используется следующая формула:OHI–S = ∑(ЗН/n) + ∑(ЗК/n)(2),где n – количество зубов, ЗН – индекс зубной налёт, ЗК – индекс зубной камень.В норме (при идеальном гигиеническом состоянии) индекс OHI–S не долженпревышать 1,0; если индекс больше 1, то это является показателем плохого гигиенического состояния полости рта.Индекс PMA – папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс, отражает состояние пародонта.
Используется для оценки результатов лечебных и профилактических мероприятий. Оценка индекса проводится по следующим кодам: 0 – отсутствиевоспаления; 1 – воспаление только десневого сосочка (P); 2 – воспаление десневогососочка и маргинальной десны (М); 3 – воспаление десневого сосочка, маргинальнойи альвеолярной десны (А).Индекс PMA рассчитывается по формуле:PMA= (сумма показателей × 100) : (3 × число зубов)(3)2.3.
Рентгенологическое исследование состояния костной ткани пародонтаС целью объективной оценки деструкции альвеолярной кости использовалисьданные рентгенологического обследования:1. Ортопантомограф Othophos 3 (Sirona, Германия), отличающийся минимальной рентгенологической нагрузкой всего в 0,07 мкЗв;2. Конусно-лучевой компьютерный томограф GendexGB-500 с нагрузкой 32мкЗв;3. Спиральный компьютерный томограф SiemensSomatonSensation 40 с нагрузкой 100 мкЗв.2.4. Иммунологические, молекулярно-биологическиеи микробиологические методы исследованияПолучение биологического материала для иммунологических исследований осуществлялось в группе больных с переломами челюстей и здоровых пациентов путём соскоба слизистой оболочки из зубодесневой борозды (у всех пациентов с ХГП – из пародонтального кармана). Образцы клеток собирались с помощью стерильных браншей фирмы37«Dispodent» (Франция) и переносились в 1,5 мл пробирки типа «Эппендорф» с содержащимся в них физиологическим раствором.
Материал в течение 24 часов доставлялся кместу хранения и замораживался. Образцы хранили при температуре -70°С. Материал вдальнейшем использовался для определения исследуемых показателей врождённого иммунитета (рис. 2). Для определения концентрации цитокинов TNF-α и TGF-β использовализубодесневую жидкость из зубодесневой борозды и пародонтального кармана (рис. 3). Исследование проводили на кафедре иммунологии МБФ РНИМУ имени Н.И. Пирогова.Рис. 2 – Определение экспрессии гена распознающего рецептора TLR2 ипротивомикробного пептида hBD-2 в слизистой оболочки десны (схема исследования)Рис.
3 – Определение продукции цитокинов TNF-α и TGF-β в зубодесневойжидкости (схема исследования)382.4.1. Определение экспрессии генов TLR2 и hBD-2 методом полимеразнойцепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ)Выделение РНК из соскобов проводили методом аффинной сорбции на частицах селикогеля, используя набор для выделения РНК «АмплиПРФЙМ Рибосорб» ( фирмы ИнтерЛабСервис, РФ). Для определения экспрессии исследуемыхгенов использовали «Набор для проведения ПЦР-РВ в присутствии интеркалирующего красителя SYBR Green I» (Синтол, РФ) в соответствии с протоколомфирмы-производителя, последовательности праймеров были синтезированы нафирме Синтол, РФ. Реакцию ПЦР проводили в приборе «Амплификатор детектирующий ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», РФ).
В качестве референсногогена был выбран ген β-актина, уровень экспрессии которого также был измеренво всех исследуемых образцах. Затем относительно полученных значений с использованием калибровочной кривой рассчитывались значения уровня экспрессиинепосредственно исследуемого гена. Данные по экспрессии исследуемых геновпредставлены в количестве Х×105 копий мРНК относительно 106 копий гена актина. Стандартизация результатов ПЦР-РВ проводилась по уровню экспрессии генаβ-актина, который является геном «домашнего хозяйства» и экспрессируется постоянно и во всех клетках организма.2.4.2. Определение концентрации цитокинов TNF-α и TGF-в методомиммуноферментного анализаКонцентрацию цитокинов TNF-α и TGF-β в зубодесневой жидкости из зубодесневой борозды проводили с помощью метода иммуноферментного анализа, применяякоммерческие тест-системы фирмы «Biosource» (США) для обоих цитокинов.2.4.3.
Микробиологическое исследованиеАнализ микрофлоры из пародонтального кармана у пациентов с ХГП, иззубодесневой борозды у больных с переломами челюстей и у пациентов группыконтроля проводился в лаборатории «Инвитро» (г. Москва). Забор материала длямикробиологического исследования осуществлялся натощак, до чистки зубов. Содержимое пародонтального кармана забиралось стерильными эндодонтическимиабсорберами (AbsorbentPaperPoints) 30-го размера. При заборе исследуемого мате-39риала он немедленно помещался в пробирку с полужидкой транспортной средой.Систему выдерживали при температуре 2–4°С, обеспечивая постоянство даннойтемпературы при транспортировке.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
