Диссертация (1140110)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕУЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ«РОССИЙСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙУНИВЕРСИТЕТ ИМ. Н.И.ПИРОГОВА»МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИНа правах рукописиМолчанова Елизавета АлександровнаИсследование факторов врождённого иммунитетау пациентов с переломами челюстей и больных пародонтитом(клинико-лабораторное исследование)14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология14.01.14 – стоматологияДиссертация на соискание учёной степеникандидата медицинских наукд.м.н., проф. Ганковская Л.В.д.м.н.

Хелминская Н.М.Москва – 2018ОглавлениеВВЕДЕНИЕ .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..3ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..81.1. Современные представления о иммунопатогенезе пародонтита .. .. ..81.2. Значение факторов врождённого иммунитета в патогенезепародонтита.. .. .. .. .. ..

.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..141.2.1. Роль Toll-подобных рецепторов141.2.2. Антимикробная активность бета-дефенсиновпри заболеваниях пародонта181.3. Влияние ортопедических конструкций на ткани пародонтапри переломах челюстей.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ212.1. Клиническая характеристика исследуемых групп.. .. ..

.. .. .. .. .. .. .. .. .27272.2. Индексная оценка состояния тканей пародонта.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..342.3. Рентгенологическое исследование состояниякостной ткани пародонта.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..362.4. Иммунологические, молекулярно-биологическиеи микробиологические методы исследования.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..362.4.1.

Определение экспрессии генов TLR2 и hBD-2 методомполимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ)382.4.2. Определение концентрации цитокинов TNF-α и TGF-βметодом иммуноферментного анализа.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..382.4.3. Микробиологическое исследование.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..382.5. Методы статистического анализаГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ39403.1. Клинико-рентгенологическая и лабораторная характеристикабольных с переломами челюстей, с хроническим генерализованнымпародонтитом и пациентов группы контроля..

.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..403.2. Сравнительный анализ показателей врождённого иммунитета(экспрессии генов TLR2 и hBD-2; цитокинов TNF-α и TGF-β) у больныхпародонтитом различной степени тяжести и пациентов группы контроля4823.3. Клиническое исследование состояния пародонта у пациентовс переломами челюстей в динамике.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..

.. .. .. .. .. .. ..553.4. Анализ показателей врождённого иммунитета (экспрессии геновTLR2 и hBD-2; цитокинов TNF-α и TGF-β) у пациентовс переломами челюстей в динамике.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..583.5. Разработка алгоритма диагностики и профилактикивоспалительных заболеваний пародонта у больных с переломамичелюстей при лечении шинирующими конструкциями71ВЫВОДЫ.. .. .. .. .. ..

.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .89ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..90Список условных сокращений.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..93СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.. .. .. .. .. .. .. .. ..

.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..943ВВЕДЕНИЕАктуальность проблемыПо статистике 2016 года переломы костей лицевого черепа составляют около3% общего количества травм. Основная доля повреждений приходится на переломынижней челюсти, и составляет до 80% от общего количества повреждений костей лицевого скелета [20].При лечении переломов нижней челюсти очень часто используют ортопедические методы лечения, предусматривающие закрепление и иммобилизацию отломковчелюсти с помощью шинирующих конструкций [35, 37, 111].

Серьёзной проблемойпри таком методе лечения являются воспалительные заболевания пародонта.Имеются многочисленные исследования, которые подтверждают, что травмирующее воздействие шинирующих конструкций и ухудшение гигиены полости рта приводит к развитию гипертрофического гингивита и пародонтита [39, 12, 2, 3, 31, 33].Причиной пародонтита является хроническая инфекция, течение которой обусловлено, с одной стороны, вирулентностью самого патогена, а с другой - состояниемиммунной системы организма [95]. Ответом организма на инфицирование тканей пародонта является развитие хронического воспалительного процесса [48].В настоящее время отмечается увеличение числа исследований, посвящённых изучению роли механизмов врождённого иммунитета в защите слизистых оболочек полостирта от патогенных микроорганизмов, принимающих участие в возникновении и развитиипародонтита [60].

Особое внимание при этом уделяется Toll-подобным рецепторам (TLRs),которые распознают консервативные молекулярные структуры патогенных микроорганизмов [27], а также различных эндогенных лигандов, ассоциированных с воспалительнымповреждением клеток и тканей, поскольку активация этих рецепторов приводит запускаетэкспрессии генов противомикробных пептидов (ПМП), цитокинов и других биологическиактивных молекул, участвующих в управлении воспалительным процессом [27, 46, 97].Противомикробные пептиды филогенетически являются самой древней формой врождённой иммунной защиты [87, 126]. Они непосредственно убивают широкийспектр микроорганизмов, включая грамположительные и грамотрицательные бактерии, грибы и некоторые вирусы. Их дополнительные функции как ингибиторов про-4теиназ, хемокинов и нейропептидов также являются важными для нормальной физиологии слизистых оболочек [77].Применение современных технологий оценки факторов врождённого иммунитета, в частности, определение экспрессии гена TLR2, гена противомикробного пептида hBD-2 и цитокинов TNF-α и TGF-β в целях диагностики, прогнозирования тяжеститечения, лечения и профилактики заболеваний пародонта у пациентов с переломамичелюстей, представляет важную и актуальную задачу, что и определяет необходимостьпроведения настоящего исследования.Цель исследования: исследовать роль факторов врождённого иммунитета убольных хроническим генерализованным пародонтитом и у больных с переломамичелюстей для совершенствования методов диагностики и профилактики воспалительных заболеваний пародонта.Задачи исследования1.  Изучить клинико-рентгенологические, микробиологические показатели состояния пародонта у больных с хроническим генерализованным пародонтитом и у пациентов со здоровыми тканями пародонта.2.  Провести анализ показателей врождённого иммунитета (экспрессии гена рецептора TLR2, гена противомикробного пептида hBD-2 в слизистой оболочке пародонтального кармана и содержания цитокинов TNF-α и TGF-β в зубодесневой жидкости) у больных пародонтитом разной степени тяжести.3.  Провести клинико-рентгенологическое исследование, оценить состояниякраевого пародонта у пациентов с переломами челюстей до постановки и после снятияшинирующих конструкций.4.  Исследовать в динамике показатели врождённого иммунитета (экспрессиюгенов TLR2 и hBD-2, содержание цитокинов TNF-α и TGF-β) у пациентов с переломами челюстей при лечении шинирующими конструкциями.5.  Определить роль факторов врождённого иммунитета как возможных индикаторов, отражающих риск развития воспалительных заболеваний пародонта, и разработать алгоритм диагностики и профилактики заболеваний пародонта у пациентов спереломами челюстей при лечении шинирующими конструкциями.5Научная новизнаВпервые проведено комплексное исследование показателей врождённого иммунитета на уровне слизистой оболочки десны, включающее анализ экспрессии генараспознающего рецептора TLR2, гена противомикробного пептида hBD-2 и цитокиновTNF-α и TGF-β у больных хроническим генерализованным пародонтитом.

Выявлендефект мукозального иммунитета, характеризующийся высоким уровнем экспрессиигена TLR2, и снижением экспрессии гена hBD-2 у больных хроническим генерализованным пародонтитом различных степеней тяжести, по сравнению с группой контроля. У больных с ХГП выявлено повышенное содержание цитокинов (TNF-α и TGF-β)в зубодесневой жидкости, что способствует развитию хронического воспаления и повреждению тканей пародонта.У больных с переломами челюстей при длительном ношении шинирующихконструкций впервые выявлено нарушение механизмов защиты слизистой оболочки десны.

Установлено, что в группе пациентов с гингивитом экспрессия генаTLR2 увеличена на всем протяжении периода наблюдения, в то время как уровеньэкспрессии гена hBD-2 снижен. В группе со здоровым пародонтом показатели экспрессии гена TLR2 и hBD-2 были близки к нормальным значениям и повышались к10–18 суткам периода наблюдения, при этом у 22,5% больных уровень экспрессиигена hBD-2 был в 5 раз ниже нормы относительно показателей группы контроля.Содержание цитокинов TNF-α и TGF-β в зубодесневой жидкости в обеих группахповышалось на первые сутки после травмы, к 18 суткам наблюдалось снижениеэтих показателей, и к 28 суткам восстанавливалось до уровня контроля.Данное исследование показало, что у пациентов со сниженным уровнем экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 после снятия шинирующих конструкцийпроявлялись воспалительно-деструктивные изменения в краевом пародонте.Научно-практическая значимость работыРазработан подход к оценке мукозального иммунитета, в основе которого лежитизучение экспрессии генов TLR2 и hBD-2 и содержания цитокинов TNF-α и TGF-β взубодесневой жидкости.У больных с переломами челюстей со здоровым пародонтом, снижение экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 может быть использовано в качестве про-6гностического маркёра развития воспаления в тканях пародонта при лечении переломов челюстей шинирующими конструкциями.Разработан алгоритм диагностики и профилактики пародонтита у пациентов схронической травмой пародонта, полученной при ортопедическом лечении переломовчелюстей, заключающийся в исследовании экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации