Автореферат (1140109), страница 3
Текст из файла (страница 3)
При микробиологическом исследовании у 100% пациентов встречаются грамположительные бактерии, и у 13% – грамотрицательные бактерии.Анализ показателей врождённого иммунитета у больных с ХГП различной степенитяжести и у пациентов группы контроля. В подгруппе пациентов с ХГП лёгкой степени тяжести наблюдается повышение экспрессии гена TLR2 более чем в 10 раз; в подгруппе со среднейстепенью тяжести заболевания – в 65 раз, а в случае тяжёлой степени развития заболевания – более чем в 200 раз. Эти данные однозначно показывают, что в патогенез пародонтита, несомненно,вовлечена система врождённого иммунитета, реагирующая на избыточное присутствие микробной флоры в полости рта и, в частности, в пародонтальных карманах (табл. 1).Оценка экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 показала, что у больных с ХГПлёгкой и средней степени тяжести данный показатель находится ниже уровня, наблюдаемогов группе контроля, однако у больных с тяжёлой формой ХГП этот показатель не отличается от показателя группы контроля (см.
табл. 1).Таблица 1 – Уровень экспрессии генов TLR2, hBD-2 и содержания TNF-αи TGF-β у больных ХГП различной степени тяжести и у здоровых лицПоказателиГруппа 1.Больные с ХГПn=53Группа 3(контрольная)n =301Алегкая степеньn =161Всредняя степеньn =181Стяжелая степеньn =19Экспрессия генаTLR21141,5±86,1***800,4±318,0***2586,6±1113,8***12,5±0,02Экспрессия генаhBD-213,7±2,9***155,8±109,9**374,8±118,0371,5±109,7TNF-α (пг/мл)12,2±3,517,7±5,2**12,9±2,0*8,7±1,8TGF-β (пг/мл)4851±160411517±6359**12155±6416**4715±891Примечания:1Показатели экспрессии исследуемого гена представлены в количестве 10 5 копий мРНКотносительно 1 млн.
копий гена актина.*– различия достоверны при p<0,05, ** – различия достоверны при p<0,01, *** – различиядостоверны при p<0,001, по сравнению с группой контроля.10Полученные данные можно рассматривать как проявление некоторого дисбаланса в экспрессии гена TLR2 и индуцируемой им экспрессии гена hBD-2 у больных пародонтитом. Повышенная стимуляция Toll-подобных рецепторов компонентами микрофлоры полости рта неприводит к необходимому уровню экспрессии гена hBD-2, что в итоге проявляется в недостаточной степени защиты и в персистировании инфекции в зубодесневых карманах.
Это, в своюочередь, может служить причиной компенсаторного увеличения экспрессии гена TLR2. Такимобразом, полученные нами данные свидетельствуют о наличии дисбаланса между экспрессиейгена распознающего рецептора врождённого иммунитета TLR2 и уровнем экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 как особенности патогенеза пародонтита.В зубодесневой жидкости больных с ХГП выявлено увеличение концентрации как провоспалительного цитокина TNF-α, так и противовоспалительного цитокина TGF-β, что свидетельствует об их вовлеченности в патогенез ХГП. Согласно полученным данным, значимоеувеличение концентрации этих цитокинов имеет место при средней и тяжёлой формах пародонтита (см.
табл. 1).Клинико-рентгенологическое исследование больных с переломами челюстей. На следующем этапе нашей работы проводилось исследование 54 больных с переломами челюстей(ПЧ) (2-я группа), лечение которых осуществлялось методом двучелюстного шинирования.Шинирующие конструкции оказывают неблагоприятное влияние на ткани пародонта, что в некоторых случаях формирует условия, способствующие развитию пародонтита, и требует болееглубокого изучения молекулярных механизмов данного заболевания.При первичном осмотре пациенты 2-й группы были разделены на две подгруппы в зависимости от степени выраженности воспаления пародонта на момент поступления в стационар.В 42,5% случаев (n=23) пациентам (2A) был поставлен диагноз «хронический катаральный гингивит», состояние гигиены полости рта было удовлетворительным (OHI-S 1,5±0,7), ИК PBI составил 0,9±0,7, ПИ Russel – 0,3±0,2, индекс РMA – 14,3±1,7.У 57,4% (n=31) пациентов (2B) ткани пародонта были здоровые, состояние гигиены полости рта хорошее (OHI-S 0,24±0,1), индекс PBI – 0,23±0,9; ПИ Russel – 0; индекс РMA –3,03±1,41.При первичном осмотре у всех 54 больных с ПЧ пародонтальные карманы и подвижностьзубов не отмечались.
При рентгенологическом исследование изменений альвеолярного гребняне выявлено.Примикробиологическомисследованиисодержимогозубодесневойбороздыу пациентов с ПЧ в 11,6% случаев обнаруживались пародонтопатогены и в 51% – грамположительные бактерии.11Исследование показателей врождённого иммунитета у больных с ПЧ до шинирования. При сравнении показателей экспрессии гена TLR2, до постановки шинирующих конструкций, в подгруппах установлено, что у пациентов с гингивитом (2A) отмечается достоверное повышение уровня экспрессии гена TLR2 (p<0,001) по сравнению со здоровым пародонтом (2B) игруппой контроля.При оценке уровня экспрессии гена противомикробного пептида hBD-2 до шинирования вподгруппах было определено, что уровень экспрессии гена hBD-2 в подгруппе 2A с гингивитомбыл статистически достоверно (p<0,05) ниже уровня в подгруппе 2B со здоровым пародонтом иу пациентов группы контроля.У 7 (22,5%) больных подгруппы 2B со здоровым пародонтом и у 19 (82,6%) больныхподгруппы 2A с гингивитом на момент поступления в стационар до постановки иммобилизующей шины иммунологическое обследование показало, что уровень экспрессии hBD-2составил (46,77–68,71)×105, что приблизительно в 5 раз ниже нормы показателей группыконтроля (рис.
1).Рисунок 1. Уровень экспрессии генов TLR2 и hBD-2 в слизистой оболочке зубодесневойборозды у больных с переломами челюстей подгруппы 2A, 2B и у группы контроляПо оси абсцисс – подгруппы 2A, 2B и группа контроля; по оси ординат – показатели экспрессии исследуемых генов.*p<0,05; ***p<0,001.12Клиническое обследование и анализ показателей врождённого иммунитета пациентовс ПЧ в динамике. Далее пациенты подгрупп 2A и 2B были разделены ещё на две подгруппы 2AI (n=7), 2A-II (n=16), 2B-I (n=10), 2B-II (n=21).
Пациенты подгрупп 2A–I и 2B–I были обученыправилам ухода за полостью рта и им проводили лечение с применением пластин для дёсенс коллагеном «Фармадонт-2» (Премьер-продукт) 2 раза в день в течение трёх недель (ГОСТР15.013.94). Пластины представляют собой губчатые структуры размером 10×14 см, насыщенныесмесью растворов природного биополимера коллагена и экстракта лекарственных растений, которые фиксируются на десну в области шины и самостоятельно рассасываются в течение 1,5 часов. Больным подгрупп 2A-II и 2B-II данное лечение не проводилось.Больным назначались антибактериальные препараты по схеме (в/в) в течение 5–10дней согласно локальному протоколу эмпирической антимикробной терапии ГКБ №1 (приказ 507 от 24.11.2015).
Ципрофлоксацин (фторхинолон) назначался в 81,4% случаев, амп ициллин+сульбактам (пенициллин) получали 18,5% больных.Таким образом, анализ индексных показателей (табл. 2) и показателей врождённого иммунитета (табл. 3) показал достоверное (p<0,05) увеличение значений всех регистрировавшихсяиндексных показателей и увеличение экспрессии гена TLR2 у пациентов подгруппы 2A с гингивитом относительно показателей подгруппы 2B со здоровым пародонтом. При оценке показателей в подгруппах с гингивитом и со здоровым пародонтом между подгруппами I с лечениеми II без лечения выявлено, что у пациентов, которые были обучены правилам ухода за полостью рта с обязательным использованием дополнительных средств для гигиены, в частности,с помощью пластин с коллагеном «Фармадонт-2», наблюдалось сниженное количество налётаи уменьшение воспаления дёсен при лечении переломов шинирующими конструкциями.Выявлено, что у 3 больных из подгруппы 2B–I со здоровым пародонтом с лечениеми у 4 больных подгруппы 2B–II со здоровым пародонтом без лечения на момент поступления в стационар, до постановки иммобилизующей шины, иммунологическое обследованиепоказало, что уровень экспрессии гена TLR2 практически не отличался от нормы и составил(8,1–10,2)×105,а уровень экспрессии гена hBD-2 составил (46,77–68,71)×105, что в 5 раз ниженормы.
Это свидетельствовало о наличии дисбаланса факторов врождённого иммунитета,отмеченного нами при пародонтите. У 4 больных подгруппы 2B–II со здоровым пародонтомбез лечения, несмотря на хороший уровень гигиены (OHI-S – 0,8±0,1), на момент снятияшинирующей конструкции отмечалось усиление кровоточивости (ИК PBI 1,5±0,2), опред елялись пародонтальные карманы глубиной до 3,5 мм (ПИ Russel 0,7±0,2).
При этом уровеньэкспрессии гена TLR2 не отличался от показателей нормы (9,7–12,3)×105, а уровень экспрессии гена hBD-2 был снижен до значений (58,7–71,3)×105.13Таблица 2 – Оценка индексов гигиены в период ношения шинирующихконструкций у пациентов с переломами челюстей. (M±m) (25;75)Периодичность исследованийПоказателиOHI-SНорма0,19±0,02ИК PBIНорма0,3±0,02ПИ RusselНорма 0PMA(%)Норма0,07±0,011-е сутки18-е сутки28-е сутки2,15±0,19(2,04;2,39)2,75±0,19(2,64;2,99)**2,4±0,11(2,34;2,54)1,75±0,11***(1,69;1,89)1,5±0,06(1,47;1,64)2,2±0,14***(2,08;2,48)3,03±0,15(2,90;3,33)2,75±0,12**(2,64;2,99)1,8±0,07***(1,74;1,94)2B-I3n=100,20±0,04(0,17;0,27)1,7±0,09***(1,64;1,84)1,45±0,04(1,42;1,52)0,75±0,16(0,64;0,99)0,165±0,03***(0,145;0,21)2B-II4n=210,25±0,05(0,20;0,35)1,64±0,08***(1,571;1,816)1,5±0,06(1,44;1,64)0,82±0,12(0,712;1,087)0,49±0,11***(0,379;0,74)2A-I1n=70,95±0,08(0,90;1,05)1,7±0,11***(1,64;1,84)1,8±0,05***(1,77;1,87)1,95±0,08*(1,90;2,05)1,1±0,11***(1,04;1,24)2A-II2n=160,80±0,04(0,77;0,87)1,72±0,04***(1,68;1,81)2,05±0,05***(2,00;2,15)2,25±0,09*(2,17;2,42)1,3±0,07***(1,24;1,44)2B-I3n=100,33±0,03(0,30;0,37)1,475±0,08**(1,422;1,597)1,305±0,02**(1,288;1,343)0,815±0,07**(0,76;0,93)0,24±0,02*(0,228;0,26)2B-II4n=210,38±0,02(0,35;0,42)1,485±0,07**(1,414;1,649)1,64±0,06**(1,553;1,788)1,225±0,18**(1,05;1,627)0,9±0,22*(0,69;1,39)2A-I1n=70,25±0,13(0,17;0,42)0,35±0,13(0,27;0,52)0,35±0,08**(0,28;0,37)0,3±0,05**(0,27;0,37)0,15±0,08(0,105;0,25)2A-II2n=160,20±0,07(0,14;0,34)0,35±0,09(0,27;0,52)0,42±0,08**(0,35;0,58)0,705±0,02**(0,68;0,743)0,32±0,04(0,287;0,412)2B-I3n=1000,1±0,04(0,07;0,17)0,135±0,06(0,09;0,229)0,09±0,04***(0,06;0,15)02B-II4n=2100,15±0,05(0,105;0,255)0,2±0,03(0,17;0,27)0,125±0,04***(0,08;0,212)0,55±0,17(0,38;0,935)2A-I1n=714,95±0,94(14,42;16,17)32,4±1,12(31,77;33,87)34,15±1,04*(33,56;35,51)35,25±0,51**(34,96;35,91)23,35±0,51*(23,06;24,01)2A-II2n=1614,7±0,8(14,07;16,32)33,4±0,78(32,74;34,94)38,7±0,39*(38,3;39,47)43,3±1,45**(42,07;46,17)25,9±0,78*(25,24;27,44)2B-I3n=103,3±0,16(3,22;3,47)15,75±0,69(15,28;16,83)18±1,21*(17,19;19,89)18,5±1,21(17,69;20,39)1,77±0,08*(1,722;1,897)2B-II4n=213,3±0,08(3,22;3,47)16±1,02(15,01;18,31)19,2±1,05*(18,18;21,58)20,85±1,40(19,48;24,03)4.2±0,65*(3,57;5,67)12A-In=71,65±0,13(1,57;1,82)2A-II2n=1610-е сутки***180 днейПримечания:12A-I – с гингивитом с лечением; 2 2A-II – с гингивитом без лечения; 3 2B-I со здоровымпародонтом с лечением; 4 2B-II со здоровым пародонтом без лечения.***– различия между группами 2A-I и 2A-II, 2B-I и 2B-II (p<0,001), ** – различия междугруппами 2A-I и 2A-II,2B-I и 2B-II (p<0,01), * – различия между группами 2A и 2B (p<0,05).14Таблица 3 – Динамика экспрессии генов TLR2 и hBD-2 в слизистой оболочкезубодесневой борозды у пациентов с переломами челюстей.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
