Автореферат (1140109), страница 2
Текст из файла (страница 2)
У больных с переломами челюстей со здоровым пародонтом не выявлено измененийуровня экспрессии TLR2, а экспрессия hBD-2 на уровне 77,5% не отличается от нормы. Лечение переломов челюстей с применением шинирующих конструкций в течение 28 суток приводит к развитию воспалительно-деструктивных изменений в пародонте в группе с гингивитомв 82,6%, в группе со здоровым пародонтом – в 12,9% случаев. Анализ динамики показателейврождённого иммунитета у пациентов с гингивитом выявил увеличение экспрессии гена TLR2на всем протяжении ношения шины, в то время как уровень экспрессии гена hBD-2 у 82,6% пациентов был в 5,3 раза ниже нормы и увеличивался к 18–28 суткам.
У пациентов со здоровымпародонтом показатели экспрессии генов TLR2 и hBD-2 достоверно не отличаются по сравнению с показателями группы контроля.3. Разработан алгоритм диагностики и профилактики воспалительных заболеваний пародонта у больных с переломами челюстей при лечении шинирующими конструкциями, основанный на определении экспрессии гена hBD-2. При снижении этого показателя ниже уровня68,74×105 копий мРНК относительно 1 млн. копий гена актина пациентам назначают применение противомикробного препарата Ципрофлоксацина (фторхинолона) – 400 мл в капельницепо 100 мл, 4 раза в день, 10 дней, а также использование коллагеновых пластин для дёсен«Фармадонт-2» 2 раза в день в течение трёх недель, фиксируя их на десну под зацепные петли.Апробация работы.
Результаты исследования доложены на IX и XI Международной Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых учёных (Москва, 2014,2016), а также на совместном заседании кафедр иммунологии медико-биологического факультета и челюстно-лицевой хирургии и стоматологии стоматологического факультета ФГБОУ ВОРНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России.Внедрение результатов работы в практику. Результаты диссертационной работы внедрены в учебно-педагогический процесс на кафедре челюстно-лицевой хирургии и стоматологиистоматологического факультета и на кафедре иммунологии медико-биологического факультетаФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, а также используются в практической работе отделения челюстно-лицевой хирургии ГКБ №1 им.
Н.И. Пирогова и ФКУ «Стоматологическая поликлиника».Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 7 печатныхработ, в том числе 4 статьи в научных журналах, входящих в перечень ведущих рецензируемыхнаучных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы,собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, содержащего 176 источников, из них 47 – отечественных и 129 – зарубежных. Работавыполнена на 110 страницах, иллюстрирована 16 таблицами и 30 рисунками.6СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯОбщая характеристика клинических групп. В ходе выполнения работы были обследованы 137 пациентов.Все участники комплексного исследования были разделены на три группы.Во 1-ю группу входили 53 пациента в возрасте от 31 до 63 лет, обратившихся в ФКУ«Стоматологическая поликлиника», у которых, по данным клинико-рентгенологического исследования, был выявлен хронический генерализованный пародонтит разной степени тяжести.После измерения глубины пародонтальных карманов, оценки степени клинической потери прикрепления десны, изучения рентгенологических данных о деструкции альвеолярнойкости пациенты с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) были разделены натри подгруппы в соответствии со степенью тяжести заболевания.Подгруппа 1А (легкая степень тяжести) включала 16 пациентов.Подгруппа 1В (средняя степень тяжести) составила 18 пациентов.Подгруппа 1С (тяжелая степень проявления заболевания) состояла из 19 пациентов.Во 2-ю группу входили 54 пациента в возрасте от 18 до 50 лет с переломами нижней челюсти, находившихся на стационарном лечении в отделении челюстно-лицевой хирургии городскойклинической больницы №1 им.
Н. И. Пирогова Департамента здравоохранения г. Москвы, лечение которых осуществлялось методом иммобилизации двучелюстными назубными шинами с резиновыми тягами в течение не менее 28 дней. В ходе исследования оценка клинических и иммунологических показателей пародонта у пациентов 2-й группы проводилась 5 раз: в день поступления в стационар до шинирования, через 10 дней, через 18 дней и на 28-й день при снятии иммобилизующей шины, через 180 дней.Больные с переломами челюстей были разделены на две подгруппы в зависимости от степени выраженности воспаления пародонта на момент поступления в стационар:В подгруппу 2A были включены 23 пациента с диагнозом «хронический катаральныйгингивит».Подгруппа 2B состояла из 31 человека со здоровым пародонтом.В 3-ю группу контроля были включены 30 практически здоровых пациентов в возрастеот 18 до 63 лет, которые проходили стоматологическую диспансеризацию на базе ФКУ «Стоматологическая поликлиника».
На момент исследования участники этой группы не имели никакойстоматологической патологии, травм и каких-либо заболеваний воспалительного генеза в полости рта, а также хронических воспалительных заболеваний.7Клиническое обследование включало осмотр и анкетирование 137 пациентов. При сбореанамнеза заболевания учитывались жалобы пациента и предположительные сроки начала заболевания. При сборе анамнеза жизни обращалось внимание на наличие наследственных факторов, а также уделялось внимание наличию или отсутствию вредных привычек, уровню гигиеныпри уходе за зубами. Оценивались состояние гигиены полости рта, наличие кариеса зубов, уровень клинического прикрепления десны, патологическая подвижность зубов, глубина пародонтального кармана. У всех включённых в исследование пациентов определялись: индекс кровоточивости десневой борозды – PBI, пародонтальный индекс Russel, индекс налёта OHI-S и индекс воспаления пародонта PMA.Дополнительные методы обследования включали оценку деструкции альвеолярной костис помощью цифровой ортопантомограммы и конусно-лучевой компьютерной томографии.Анализ микрофлоры из пародонтального кармана и зубодесневой борозды у пациентов проводился в лаборатории «Инвитро» (г.
Москва).Определение экспрессии генов TLR2 и hBD-2 методом полимеразой цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ). Получение биологического материала осуществлялосьпутем соскоба со слизистой оболочки из пародонтального кармана у всех пациентов с ХГП,у больных с переломами челюстей (ПЧ) и у пациентов группы контроля соскоб слизистойоболочки получали из зубодесневой борозды.Выделение РНК из соскобов проводили методом аффинной сорбции на частицах силикогеля,используя набор для выделения РНК «АмплиПрайм РИБО-сорб» (фирмы ИнтерЛабСервис, РФ).Для определения экспрессии исследуемых генов использовали «Набор для проведения ПЦР-РВв присутствии интеркалирующего красителя SYBR Green I» (Синтол, РФ) в соответствии с протоколом фирмы-производителя, последовательности праймеров были синтезированы на фирме Синтол, РФ.
Реакцию ПЦР проводили в приборе «Амплификатор детектирующий ДТ-96» (ООО «НПОДНК-Технология», РФ). В качестве референсного гена был выбран ген β-актина, уровень экспрессии которого также был измерен во всех исследуемых образцах. Затем относительно полученныхзначений с использованием калибровочной кривой рассчитывались значения уровня экспрессиинепосредственно исследуемого гена. Данные по экспрессии исследуемых генов представлены в количестве Х×105 копий мРНК относительно 106 копий гена актина.
Стандартизация результатовПЦР-РВ проводилась по уровню экспрессии гена β-актина, который является геном «домашнегохозяйства» и экспрессируется постоянно и во всех клетках организма.Концентрацию цитокинов TNF-α и TGF-β в зубодесневой жидкости из зубодесневой борозды определяли с помощью метода иммуноферментного анализа, применяя коммерческие тестсистемы фирмы «Biosource» (США) для обоих цитокинов. Зубодесневую жидкость получалииз зубодесневой борозды и пародонтального кармана.8Исследование проводили на кафедре иммунологии МБФ РНИМУ имени Н.И. Пирогова.Методы статистической обработки данных.
Обработку полученных результатов осуществляли с помощью программных пакетов StatsoftStatistica 6.0 и MicrosoftOfficeExcel. Данные, подчинявшиеся нормальному распределению, представлялись как среднее арифметическое(М), ошибка средней (m), с указанием стандартного отклонения (SD). При не нормальном распределении, данные представлялись в виде медианы и интерквантильного интервала (от 25до 75 процентилей).
Нормальность распределения и однородность дисперсии проверялисьс применением критерия Колмогорова–Смирнова. Для множественного сравнения групп применялся дисперсионный анализ (критерий Краскела–Уоллиса). В качестве апостериорных критериев использовались критерии Вилкоксона (для зависимых групп) и Манна–Уитни (для независимых групп). Различия между группами считали достоверными при уровне значимости менее р<0,05. Для оценки взаимозависимости между показателями использовался ранговый коэффициент корреляции Спирмена.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕКлиническая характеристика больных с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) и пациентов группы контроля. В 1-ю группу входили 53 пациента, у которых,по данным клинико-рентгенологического исследования, был выявлен хронический генерализованный пародонтит разной степени тяжести.
Пациенты с лёгкой степенью заболевания имели неудовлетворительную гигиену (индекс OHI-S составлял 2,49±0,2), а пациенты со средней и тяжёлойстепенью пародонтита – плохую гигиену (OHI-S составлял 3,84±1,2 и 4,2±1,2 соответственно). Индекс кровоточивости PBI также увеличивался в зависимости от увеличения тяжести заболевания –от 2,75 до 3,3. Значение пародонтального индекса Russel у пациентов с ХГП соответствовало степени поражения тканей пародонта: от 1,38 до 6,1. Соответственно степени тяжести пародонтитаизменялась и глубина пародонтальных карманов (от 3,5 мм до 8 мм), а подвижность зубов достигала 2,5 балла. Индекс РMA, отражающий воспаление в тканях пародонта, увеличивался в зависимости от тяжести заболевания: от 32,4±1,9%, до 73,4±2,3%.По данным рентгенологического обследования больных с ХГП, обнаружена резорбцияопорной кости, у 56,5% больных отмечается неравномерная атрофия альвеолярного гребня.При микробиологическом исследовании у больных с ХГП в 52,5% наблюдалось персистирование повышенного количества пародонтопатогенных микроорганизмов (P.Gingivalis – 45,2%,Fusobacterium spp – 56,6%, A.Israelii – 58,4% случаев).
В 38,8% случаев у пациентов с ХГП быливыделены грамположительные бактерии.При клиническом обследовании пациентов группы контроля объективных признаков воспаления и деструкции тканей пародонта не выявлено. Уровень гигиены был хорошим (OHI-S –90,3±0,2). Все остальные индексы соответствовали норме: PMA – 0,07±0,01; PBI –0,3±0,02; ПИRussel – 0; ПК – 1,8±0,15 мм.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
