Диссертация (1140073)
Текст из файла
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙУНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ И.М. СЕЧЕНОВАНа правах рукописиЧернов Дмитрий АлександровичИММУНОМОРФОЛОГИЯ СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ ДЕЙСТВИИГОМО- И ГЕТЕРОТИПИЧЕСКИХ СТРЕССОРОВ НА РАЗНЫХЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистологияДиссертация на соискание ученой степеникандидата медицинских наукНаучный руководитель:член-корреспондент РАН, д.м.н.профессор Кузнецов Сергей ЛьвовичМосква 2018 г2ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ5ГЛАВА 1.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ВЛИЯНИЕ ХРОНИЧЕСКОГОСТРЕССА НА СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПАРАМЕТРЫСЕЛЕЗЕНКИ КРЫС В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ПОСТНАТАЛЬНОГООНТОГЕНЕЗА1.1. Иммуноморфология и гистофизиологияселезенки как крупнейшегопериферического органа иммуногенеза131.1.1. Иммуноархитектоника и функции белой пульпы и стромальной зоныселезенки141.1.2. Микроморфология и иммуногистохимическая характеристика Вклеточного субкомпартмента белой пульпы151.1.3. Микроморфология и иммуногистохимическая характеристика Тклеточного субкомпартмента селезенки191.2. Иммуноархитектоника красной пульпы селезенки. Взаимоотношениелимфоидных и макрофагальных клеток261.3. Особенности морфологии селезенки и ее компартментов на разных этапахраннего постнатального онтогенеза.
Онтогенетическая опосредованностьизменений стромально-паренхиматозных взаимоотношений в селезенке291.4. Изменения стромальных и паренхиматозных элементов красной и белойпульпы. Адаптационные перестройки в селезенке при хроническом действииразличных по характеру стрессоров в различные периоды постнатальногоонтогенеза391.4.1. Стрессассоциированнаяактивациигипоталамо–иммуномодуляциягипофизарно–сучетомпаттернаадренокортикальнойоси.Нейроиммуноэндокринные последствия и изменения иммуноморфологииселезенки при воздействии различных моделей стресса41ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ48ГЛАВА 3.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ5033.1. Морфометрический анализ селезенкиперипубертатногопериодовонтогенезакрыс инфантильного ипривоздействиигетеротипического стрессагомо-и503.2. Имидж анализ селезенки крыс разных возрастных групп при воздействиигомо- и гетеротипического стресса54ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ66Выводы79Практические рекомендации80СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ81СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ824ВВЕДЕНИЕАктуальность темы диссертационного исследованияШирокий диапазон иммуномодулирующих эффектов стресса отстимулирующего до глубокого угнетающего действия на иммунную системуорганизмачеловекаиэкспериментальныхживотныхпоказановмногочисленных исследованиях последних лет [Dhabhar, 2014; Markes, 2014;Nicolaides, 2015].
Вектор стресс-ассоциированной иммуномодуляции зависитот многих факторов, как внешних, так и внутренних, среди которых ведущимивнешними факторами считаются продолжительность и тип стрессорноговоздействия,авнутренними–возраст,полиспытуемого,типприспособительного поведения и предыдущий опыт стрессорных экспозиций[Costa, 2010; Gądek-Michalska, 2013; Oster, 2014].Известно, что почти все клеточные элементы, участвующие как воврожденном, так и приобретенном иммунитете, подвержены возрастномуремоделированию[Stojik,2013].Действиенаорганизмлюбыхиммуномодулирующих факторов, в том числе таких, как хронический стресс,во время активного роста, способствует наложению возрастных изменений наиндуцированные сдвиги, что может оказать драматическое действие наиммунный ответ.
Принято считать, что хронический стресс являетсяиммунодепрессивным, однако механизмы иммуносупрессии по-прежнемунуждаются в дальнейшем изучении, что даст возможность разрабатыватьадресные фармакологические или биоповеденческие методы минимизациииммуносупрессивных последствий стресса [Ahmad, 2014; D.Hu et al., 2014; Li2014].В последнее время появился ряд работ, посвященных изучению влиянияхронического гетеротипического стресса, т.е.
стрессорного воздействия сменяющимсястрессоромзатрагивающего[Kopp,главнымПродемонстрировано,что2013;образомBabb,2014;Zhang,нейроэндокриннуюактивация2014],систему.гипоталамо-гипофизарно-5адренокортикальной оси при повторном действии гомотипического стрессаснижается, а гетеротипического – напротив, усиливается [Gagliano 2014].Однакосведенийовлияниигетеротипическихстрессоровналимфоидные органы на разных этапах постнатального онтогенезе весьманемного. В единичных исследованиях, посвященных адаптационнымпроцессампригетеротипическомстрессеврастущеморганизме,представлены в основном нарушения в нейроэндокринной и сердечнососудистой системе, в то время как исследования иммунных органовограничиваются данными о массе тимуса [J.O Duarte et al., 2015, E.Chauhan etal., 2015.].Подавляющее большинство подробных исследований выполнено сприменением иммунологических методов исследования, позволяющихопределять популяционныйсостав клетоккрови, втовремякакгистологические исследования данной проблемы проводились с применениемпреимущественно рутинных методов, не позволяющих оценить тонкиеизменения в компартментах иммунных органов и определить их механизмы.Селезенкаявляетсяпериферическиморганомиммуногенеза.Существование в ней двух принципиально различных зон – красной и белойпульпы, а в последней Т- и -зон с их различными компартментами(периартериальныелимфоидныевлагалища,лимфоидныеузелки,маргинальная зона), различных по строению и функции, делает ееиммуногистохимическую характеристику весьма информативной в планеоценки иммунного статуса организма.
До сих пор изучение этого органа пристрессе при действии повторяющегося и варьирующих стрессоров сприменением современных методов количественной иммуногистохимии непроводилось, хотя именно оно может помочь раскрыть закономерностистресс-ассоциированных иммуномодуляционных сдвигов в организме: какстероид-зависимых, так и независимых.6Цель исследованияЦелью настоящего исследования является сравнительная оценкаиммуномодулирующего действия стресса на морфологию селезенки придействии гомо- и гетеротипических стрессоров в различные возрастныепериоды до наступления половой зрелости у крыс.Задачи исследования1. Провести на гистологических срезах селезенки неполовозрелых крысинфантильногоиперипубертатногопериодовонтогенезаиммуногистохимические реакции на маркеры дендритных и лимофоидныхклеток, пролиферации и апоптоза с последующим анализом изображения.2.
Изучить изменение морфометрических показателей популяций Т- (CD8+,CD4+, CD90+) и В-клеток (CD20+) в селезенке крыс инфантильного иперипубертатногопериодовонтогенеза,вызванныегомо-игетеротипическим стрессом3. Выявить особенности стресс-ассоциированной динамики популяцийстромальных клеток (ОХ-62- и белок S100- иммунопозитивных) в селезенкекрыс инфантильного и перипубертатного периодов онтогенеза, вызванныегомо- и гетеротипическим стрессом4. Для выяснения механизмов стресс-ассоциированной динамики популяцийлимфоидных и дендритных клеток провести анализ содержания PCNA- икаспаза-3-иммунопозитивных клеток в селезенке крыс инфантильного иперипубертатногопериодовонтогенеза,вызванныегомо-игетеротипическим стрессом5.
Провестисравнительнуюиммуногистохимическуюоценкумикромофологическуюхроническогодействияигомо-игетеротипических стрессоров на селезенку у неполовозрелых крыс в разныевозрастные периоды7Научная новизнаВпервые проведена сравнительная иммуногистохимическая оценкахронического действия гомо- и гетеротипических стрессоров на селезенку унеполовозрелых крыс в разные возрастные периоды (инфантильный иперипубертатный периоды онтогенеза).Разработан методический подход, позволяющий провести комплекснуюоценкухронического действия стрессоров на периферическое звеноиммуногенеза- селезенку неполовозрелых крыс в разные возрастныепериоды.Впервые получены данные количественного иммуногистохимическогометоды исследования с последующей цифровой обработкой изображенияпозволяющегоопределитьстепеньпостстрессовойиммуномодуляции,развивающейся при хроническом действии стресса на разных этапах раннегопостнатального онтогенеза.Определены особенности стресс-ассоциированной динамики CD8+ ,CD4+, CD90+, CD20+ субпопуляций лимфоцитов, ОХ-62- и белок S100иммунопозитивных клеток, а также PCNA- и каспаза-3- иммунопозитивныхклеток селезенки крыс инфантильного и перипубертатного периодовонтогенеза, вызванные хроническим гомо- и гетеротипическим стрессом.Показано, что изменения, затрагивающие популяции лимфоидных истромальных клеток в селезенке, а также интенсивность пролиферации иапоптоза иммуноцитов в разные периоды раннего постнатального онтогенезапри хроническом действии гетеротипических стрессоров различаются ипревосходят по значимости изменения при гомотопическом стрессе.Полученные результаты демонстрируют, что нейроэндокринные ииммунныеизменения,опосредованныеразличнымивидамистресса,накладываются на сложные возрастные перестройки органов иммунной иэндокринной систем, наблюдаемые до наступления половой зрелости, чтоформирует отличающиеся иммуномодуляционные изменения при гомо- и8гетеротипическом стрессе на разных этапах раннего постнатальногоонтогенеза.Теоретическое и практическое значение исследованияНаучные положения и выводы диссертационного исследованиясущественно расширяют представления и о механизмах и последствияхиммуносупрессивного действия хронического стресса на селезенку крысраннего постнатального периода онтогенеза.Изменения в селезенке растущего организма при хроническом действиигомо- и гетеротипических стрессоров различаются по динамике клеточныхпопуляций лимфоцитов и дендритных клеток, уровнями апоптоза ипролиферации клеток в ее Т- и В-зонах.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
