Диссертация (1140070), страница 16
Текст из файла (страница 16)
-0,45;p<0,05).3.2.2.3. Маркер митохондриального комплекса V (АТФ-синтазы)Иммуногистохимические характеристики АТФ-синтазы при ВСМ ожидаемосоответствуют общемитохондриальным изменениям. Так, при повышении объемамитохондриального пула, площадь, занимаемая митохондриальным комплексомV,такжеувеличивается:митохондриальнымпрямыекомплексомV,корреляциисплощади,площадьюзанимаемоймаркеровНММимитохондриального комплекса IV (коэф. корр. +1,00; p<0,00001 и +0,99;p<0,0001 соответственно), а также с интегральной яркостью указанныхмаркеров (коэф. корр.
+0,97; p<0,00001 и +0,98; p<0,0001 соответственно).Очевидно, что при ВСМ, степень выраженности корреляций между различнымимитохондриальными маркерами значительно выше, чем при митохондриальноймиопатии, что свидетельствует о преобладании функционально активныхмитохондрийвмышечнойтканибольныхврожденнымиструктурнымимиопатиями.В целом, на основании анализа иммуногистохимических характеристикАТФ-синтазы было показано, что группа врожденных структурных миопатийхарактеризуетсяотносительнойинтенсификациейэнергообмена. Так,приповышении базовой концентрации лактата наблюдается усиление активностиАТФ-синтазы в мышечной ткани больных этой группы: прямые корреляциипоказателя лактата натощак со средней (коэф. корр. +0,61; p<0,01) иминимальной (коэф.
корр. +0,67; p<0,01) яркостью маркера митохондриальногокомплекса V; а повышение лактат-ацидоза после углеводной нагрузки видимокомпенсируется за счет площади, занимаемой данным ферментным комплексом:прямые корреляции площади, занимаемой митохондриальным комплексом V, споказателями лактата спустя час (коэф. корр. +0,43; p<0,05) и спустя три часа(коэф. корр. +0,81; p<0,001) после нагрузки глюкозой.
При этом, при повышении106деструктивных изменений АТФ-синтазы, выражающихся в изменении тонафлуоресцентного маркера этого митохондриального комплекса, наблюдаетсяусиление постнагрузочного лактат-ацидоза: прямые корреляции тона маркерамитохондриального комплекса V с показателями лактата спустя час (коэф.корр. +0,46; p<0,05) и спустя три часа (коэф. корр. +0,73; p<0,01) после нагрузкиглюкозой, что указывает на усиление митохондриальной недостаточности.Кроме того, в нашем исследовании показано, что интенсивность процессовэнергообмена, в частности, интенсивность утилизации пирувата митохондрияминатощак и после нагрузки глюкозой, повышается при высокой активностимитохондриального комплекса V: обратная корреляции средней яркостимитохондриального комплекса V с показателями пирувата натощак, а такжечерез час и через три часа после нагрузки глюкозой (коэф.
корр. -0,30; p<0,05; 0,70; p<0,01 и -0,56; p<0,02 соответственно). В отличие от митохондриальноймиопатии, при ВСМ корреляции между различными параметрами АТФ-синтазы ипоказателями лактата и пирувата выражены как натощак, так и после углеводнойнагрузки, что может свидетельствовать о синхронизации метаболическихпроцессов при ВСМ, то есть на зависимость утилизации глюкозы отфункционального состояния дыхательной цепи и синтеза АТФ, а также отражаетинтенсивность процессов тканевой энергетики.Скорее всего, рост коэффициента лактат/пируват после нагрузки глюкозойпри высоких показателях активности АТФ-синтазы у больных ВСМ (прямыекорреляции средней яркости митохондриального комплекса V с коэффициентомлактат/пируват спустя час и три часа после нагрузки глюкозой (коэф.
корр.+0,45; p<0,05 и +0,43; p<0,05 соответственно) объясняется усилениемутилизации пирувата, хотя нельзя исключать и компенсаторное повышениеактивности АТФ-синтетазы в ответ на нарушения тканевой энергетики.АдаптационныйскопленийухарактерпациентовсВСМсубсарколеммальныхподтверждаетсямитохондриальныхвысокойактивностьюмитохондриального комплекса V в подобных скоплениях: прямые корреляциисредней яркости митохондриального комплекса V с количеством и баллами RRF107(коэф. корр.
+0,56; p<0,01 и +0,40; p<0,05 соответственно), а также со среднейяркостью маркера НММ (коэф. корр. +0,38; p<0,05); что принципиальноотличаетэтугруппуотмитохондриальныхмиопатий.Припоследнихсубсарколеммальные скопления митохондрий носят патологический характер, и,как было показано в нашем исследовании, при увеличении баллов RRF,наблюдается снижение активности АТФ-синтазы в мышечной ткани пациентов.Интересно, что при усилении деструктивных изменений АТФ-синтазы,проявляющихсявизменениитонафлуоресцентногомитохондриальногокомплекса,отмеченаактивациямаркераэтогомитохондриальнойпролиферации: прямые корреляции тона маркера митохондриального комплексаV с количеством и баллами RRF (коэф. корр. +0,36; p<0,05 и +0,37; p<0,05соответственно), с митохондриальным индексом (коэф. корр.
+0,46; p<0,05), сплощадью маркеров НММ и митохондриальных комплексов IV и V (коэф. корр.+0,52; p<0,01; +0,53; p<0,01 и +0,53; p<0,01 соответственно), а также синтегральной яркостью последних (коэф. корр. +0,49; p<0,05; +0,52; p<0,05 и+0,47; p<0,05 соответственно), что, по нашему мнению, отражает эффективнуюзамену дефектных органелл и поддержание пула активно функционирующихмитохондрий в адекватном состоянии.3.2.2.4. Коэффициент «митохондриальный комплекс V/ наружнаямембрана» митохондрий (V/НММ)В отличие от митохондриальной группы, у больных с ВСМ при болеепозднем дебюте были обнаружены относительно более высокие значениякоэффициента V/НММ: прямая корреляция возраста дебюта заболевания упациента с коэффициентом площадей V/НММ (коэф. корр.
+0,35; p<0,05). Этоможет свидетельствовать о высоком функциональном напряжении данныхорганелл, вероятно оказывающем выраженный компенсаторный эффект, в томчисле позволяющий отсрочить клиническую манифестацию ВСМ.Интересно, что рост коэффициента V/НММ у больных описываемой группыпрямо коррелирует с количеством и развитостью RRF, которые устанавливаются108по данным гистоферментохимического определения активности СДГ – одного изкомплексов дыхательной цепи митохондрий, также интегрированного вовнутреннюю митохондриальную мембрану: прямые корреляции коэффициентасредней яркости V/НММ с количеством (коэф.
корр. +0,66; p<0,01) и с баллами(коэф. корр. +0,35; p<0,05) RRF; прямая корреляция коэффициента интегральнойяркости V/НММ с количеством (коэф. корр. +0,59; p<0,01) RRF. Подобныевзаимосвязисвидетельствуютокомплексномповышенииактивностидыхательной цепи митохондрий, очевидно компенсаторного характера.В ответ на такие нарушения энергообмена, как лактат-ацидоз и накоплениепирувата натощак и после нагрузки глюкозой, наблюдается повышениекоэффициента V/НММ (прямые корреляции коэффициента интегральнойяркости V/НММ с показателями лактата натощак (коэф. корр. +0,80; p<0,001),через час (коэф.
корр. +0,62; p<0,01) и через три часа (коэф. корр. +0,63; p<0,01)после нагрузки глюкозой; прямые корреляции коэффициента интегральнойяркости V/НММ с показателями пирувата натощак (коэф. корр. +0,56; p<0,01) ичерез час (коэф. корр. +0,43; p<0,05) после нагрузки глюкозой; прямая корреляциякоэффициента площадей V/НММ с коэффициентом лактат/пируват через тричаса (коэф. корр. +0,33; p<0,05) после нагрузки глюкозой), что может указыватьна активизацию митохондриальной функции при патологических условиях.При снижении активности митохондриального комплекса IV у больныхВСМ наблюдается рост коэффициента V/НММ: обратные корреляции среднейяркости митохондриального комплекса IV с коэффициентами средней иинтегральной яркости V/НММ (коэф. корр.
-0,38; p<0,05 и -0,42; p<0,05соответственно), что, по нашему мнению, отражает компенсационный механизмактивации сохранных митохондрий, обеспечивающий адекватный ответ напатологические условия и эффективную адаптацию к ним.3.2.2.5. Маркер регуляторного белка HIF-1αПри ВСМ, в отличие от митохондриальных миопатий, не обнаруженозависимости между возрастом пациента и различными параметрами маркера HIF1091α, что может свидетельствовать об отсутствии прогрессирования патологическихизменений мышечной ткани в данной группе, в то время, как при первичныхмитохондриальныхзаболеваниях(митохондриальныхмиопатиях)иприпрогрессирующих мышечных дистрофиях выраженность нарушений с возрастомувеличивается.Важным отличием ВСМ от митохондриальных миопатий является наличиесвязей между степенью тяжести заболевания и активностью фактора HIF-1α:прямая корреляция степени тяжести заболевания со средней яркостью маркераHIF-1α (коэф.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
