Диссертация (1140070), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Иммуногистохимическое распределение флуоресцентных маркеров НММ(зеленый) и HIF-1α (красный). Увеличение х400. Определяются множественные локусы интенсивнойфлуоресценции маркера HIF-1α (белые стрелки).89А.Б.В.Рис.31. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой немалиновоймиопатией.Возраст2года.Увеличениех400.А.Иммуногистохимическоераспределениефлуоресцентного маркера наружной мембраны митохондрии (НММ) (зеленый). Определяютсявыраженные скопления маркера НММ как в субсарколеммальных (белая стрелка), так и вмежфибриллярныхзонах(краснаястрелка)мышечныхволокон.Б.Иммуногистохимическоераспределение флуоресцентного маркера HIF-1α (красный). Определяются выраженные скоплениямаркера HIF-1α внутри мышечных волокон (белая стрелка), а также в виде четко очерченных кластеровна периферии мышечных волокон (желтая стрелка).
В. Иммуногистохимическое распределениефлуоресцентных маркеров НММ и HIF-1α. Совпадение локализаций указанных маркеров – желтыйцвет. Определяется совпадение локализаций зон повышенной флуоресценции указанных маркеров(белые стрелки), а также отдельные локусы интенсивной флуоресценции маркера HIF-1α (желтаястрелка).90Рис.32. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой немалиновоймиопатией.
Возраст 3 года. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентных маркеров НММ(зеленый) и HIF-1α (красный). Увеличение х400. Определяются множественные локусы интенсивнойфлуоресценции маркера HIF-1α.Флуоресценция маркера MTHSP70 в скелетной мышечной ткани больныхнемалиновой миопатией была выраженной (2 балла), с преимущественнойлокализациейвединичныхмитохондриях,расположенныхмеждумиофибриллами (Рис.33). Интересно, что в зонах кластерных скоплений маркераHIF-1α, флюоресценция маркера MTHSP70 отсутствовала.Рис.33.
Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой немалиновоймиопатией. Возраст 4 года. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентных маркеровнаружноймембранымитохондрии(зеленый)иMTHSP70(красный).Увеличениех1000.Преимущественная локализация маркера MTHSP70 в единичных межмиофибриллярных митохондриях.913.2.1.4. Саркотубулярная миопатияОсобенностью данной нозологии является наличие грубо выраженных (3балла) скоплений флуоресцентного маркера НММ в субсарколеммальныхзонах 30-40% мышечных волокон на фоне равномерного диффузногораспределения данного маркера в оставшейся части волокон (Рис.34).Описанные митохондриальные скопления были обнаружены у 5 из 9пациентов с указанной формой миопатии.Рис.34. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой саркотубулярноймиопатией.
Возраст 14 лет. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентного маркеранаружной мембраны митохондрии (зеленый). Увеличение х400. Определяются грубо выраженныескопления маркера НММ в субсарколеммальных зонах мышечных волокон (белые стрелки).Иммуногистохимическоераспределениеиинтенсивностьфлуоресценции маркеров митохондриальных комплексов IV и V в целомсоответствовали маркеру НММ (Рис. 35). У одного из больных в 10%мышечных волокон было обнаружено умеренное снижение флуоресценциимаркера митохондриального комплекса V (Рис. 36).92А.Б.Рис.35.
Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой саркотубулярноймиопатией. Возраст 14 лет. Увеличение х400. А. Иммуногистохимическое распределениефлуоресцентного маркера митохондриального комплекса IV (красный). Б. Иммуногистохимическоераспределение флуоресцентного маркера митохондриального комплекса V (синий). На рис. А. и Б.определяются грубо выраженные скопления маркеров митохондриальных комплексов IV и V всубсарколеммальных зонах мышечных волокон (белые стрелки).93А.Б.Рис.36.
Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой саркотубулярноймиопатией.Возрастфлуоресцентных3года.маркеровУвеличениех1000.митохондриальногоИммуногистохимическоекомплексаIV(красный,распределениерис.А)имитохондриального комплекса V (синий, рис. Б). Определяются грубо выраженные скопленияуказанных маркеров в субсарколеммальных зонах мышечных волокон (белые стрелки). Снижениефлуоресценции маркера митохондриального комплекса V в части мышечных волокон (красныестрелки).Обнаруженныесубсарколеммальныескоплениямитохондрийлокализовалась в соседних мышечных волокнах друг напротив друга, причем вэндомизии между этими мышечными волокнами наблюдались кровеносныесосуды (Рис.
37А).У большинства больных с врожденной саркотубулярной миопатией вмышечных волокнах наблюдалась интенсивная флуоресценция маркера HIF-1α(2-3 балла), по локализации как совпадающая с идентифицированнымисубсарколеммальнымимитохондриальнымископлениями(феноменколокализации), так и локализованная в других зонах мышечных волокон (Рис.37). При этом, количество мышечных волокон, в которых было обнаруженовышеуказанное свечение варьировало от 15% до 50%, и совпадало с94выраженностьюмитохондриальныхскопленийукаждогоконкретногобольного.В мышечной ткани больных саркотубулярной миопатией наблюдаласьвыраженнаялокализациейфлуоресценциявединичныхмаркераMTHSP70,митохондриях,спреимущественнойрасположенныхмеждумиофибриллами (Рис.38, 39). Отмечались крупные гранулы маркера MTHSP70.95А.Б.В.Рис.37.
Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой саркотубулярноймиопатией. Возраст 3 года. Увеличение х1000. Проходящий свет (слабая диффузная флуоресценцияуказанныхмаркеровудалена,показанораспределениемаксимумовфлуоресценции).Иммуногистохимическое распределение скоплений флуоресцентных маркеров наружной мембранымитохондрий (зеленый, рис.А) и HIF-1α (красный, рис.Б). Определяются грубо выраженныескопления маркера НММ в субсарколеммальных зонах мышечных волокон, а также грубовыраженные скопления маркера HIF-1α как в зонах митохондриальных скоплений, так и другихучастках мышечного волокна.
Расположение митохондриальных скоплений оппозиционно другдругу. На рис.В. определяется колокализация указанных маркеров (желтый), а также отдельныеучастки тканевой гипоксии (красный). Ядра окрашены флуоресцентным красителем DAPI (синий).96Рис.38. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с врождённой саркотубулярноймиопатией. Возраст 3 года. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентных маркеровнаружноймембранымитохондрии(зеленый)иMTHSP70(красный).Увеличениех1000.Преимущественная локализация маркера MTHSP70 в единичных межмиофибриллярных митохондриях.Рис.39.Скелетнаяпоперечнополосатаямышечнаятканьпациентасврождённойсаркотубулярной миопатией. Возраст 3 года 3 месяца. Иммуногистохимическое распределениефлуоресцентных маркеров наружной мембраны митохондрии (зеленый) и MTHSP70 (красный).Увеличение х1000.
Преимущественная локализация крупных гранул маркера MTHSP70 вединичных межмиофибриллярных митохондриях. Совпадение зон флуоресценции (желтый).973.2.1.5. Центральноядерная миопатияПри анализе мышечного биоптата больных с центральноядерноймиопатией определялось диффузное равномерное свечение маркера НММ, нафоне которого у части больных были обнаружены субсарколеммальные зоныповышенной флуоресценции данного маркера (Рис. 40).
Их выраженностьзначительно варьировала у разных больных, но количество мышечных волоконс подобными скоплениями не превышало 10%.Рис.40. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с центральноядерной миопатией.Возраст 11 лет. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентного маркера наружноймембраны митохондрии (зеленый). Увеличение х400.
Определяется равномерная флуоресценцияуказанного маркера в мышечном волокне, обнаружены единичные слабо выраженные скоплениямаркера НММ (белая стрелка).Иммуногистохимическоераспределениеивыраженностьфлуоресценции маркеров митохондриальных комплексов IV и V полностьюсоответствовали маркеру НММ (Рис.41).98А.Б.Рис.41. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с центральноядерной миопатией.Возраст 11 лет. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентных маркеров митохондриальныхкомплексов IV (красный, рис.А) и V (синий, рис.Б). Увеличение х400. Определяется равномернаяфлуоресценция мышечного волокна, обнаружены единичные слабо выраженные скопления указанныхмаркеров митохондриальных комплексов (белые стрелки), соответствующие скоплениям маркера НММ(Рис.40).Особого внимания заслуживают локусы отсутствия флуоресценции трехуказанных маркеров, которые напоминали таковые при многостержневоймиопатии.
Для дифференциальной диагностики между этими формами миопатиймы рекомендуем применять флуоресцентную окраску ядер, поскольку отсутствиефлуоресценциимитохондриальныхмаркеровнаместецентральнолокализованных мышечных ядер может быть ошибочно воспринято как стержень(Рис. 42 А и В).99А.Б.В.Рис.42. Скелетная поперечнополосатая мышечная ткань пациента с центральноядерной миопатией.Возраст 7 лет. Увеличение х400.
А. Иммуногистохимическое распределение флуоресцентного маркераНММ (зеленый). На фоне равномерной флуоресценции НММ маркера в мышечном волокне,наблюдается единичное выраженное субсарколеммальное скопление маркера НММ (красная стрелка).Локусы отсутствия флуоресценции в мышечных волокнах в центральных зонах, соответствующихрасположению ядер и заполненных относительно незрелой саркоплазмой, показаны белой стрелкой.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
