Диссертация (1140068)
Текст из файла
федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования Первый Московский государственныймедицинский университет им. И.М. Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации(Сеченовский университет)На правах рукописиЛАПШТАЕВА АННА ВАСИЛЬЕВНАИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ПРОГНОЗИРОВАНИЯЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОГРАММ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГООПЛОДОТВОРЕНИЯ У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМБЕСПЛОДИЕМ14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергологияДиссертацияна соискание ученой степени кандидата медицинских наукНаучные руководители:доктор медицинских наук, доцентИ.В. Евсегнеевадоктор биологических наук, профессорВ.В.
НовиковМосква – 20181ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………4ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………121.1. Современное состояние проблемы бесплодия……………………….121.2. Экстракорпоральное оплодотворение и существующиепрогностические критерии его эффективности…………………………...141.3. IL-1: роль в репродукции………………………………………………201.4.
Участие M-CSF и CSF1R в репродуктивных процессах…………….32ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ…………………………………412.1. Материалы исследования……………………………………………...412.2. Методы исследования…………………………………………………422.2.1. Общеклинические исследования…………………………………..432.2.2. Исследование гормольного статуса………………………………..462.2.3.
Ультразвуковое исследование органов малого таза………………472.2.4. Иммуноферментные исследования………………………………...472.2.5. Молекулярно-генетические исследования………………………...482.2.6. Статистическая обработка данных………………………………...52ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ….543.1. Анализ клинико-анамнестических данных и данныхгормонального статуса пациенток…………………………………………543.2. Содержание IL-1α в сыворотке и носительство полиморфныхвариантов его гена rs1800587 у женщин с трубно-перитонеальнойформой бесплодия…………………………………………………………..623.2.1. Содержание IL-1α в сыворотке крови у женщин с трубноперитонеальной формой бесплодия………………………………………623.2.2.
Полиморфный маркер rs1800587 5`UTR области гена IL-1αу женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия………………..673.3. IL-1β у женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия……..7323.4. Содержание IL-1Ra в сыворотке и носительство минисателлитногомаркера IL1RN-VNTR у женщин с трубно-перитонеальной формойбесплодия……………………………………………………….…………...783.4.1. IL-1Rа у женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия...783.4.2.
Полиморфный минисателлитный маркер IL1RN-VNTR уженщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия………………...823.5. Содержание M-CSF в сыворотке и носительство полиморфныхмаркеров rs3216780 и rs386693509 гена CSF1R у женщин с трубноперитонеальной формой бесплодия………………………………………..863.5.1. M-CSF у женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия…863.5.2. Полиморфный маркер rs3216780 гена CSF1R у женщинс трубно-перитонеальной формой бесплодия……………………………903.5.3. Полиморфный маркер rs386693509 гена CSF1R у женщинс трубно-перитонеальной формой бесплодия……………………………943.6. Общая прогностическая ценность изучаемых показателей вразвитии ЭКО-индуцированной беременности…………………………...99ГЛАВА 4.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ…...………………………102ВЫВОДЫ……………………………………………………………………122ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ…………………………………124СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ…………………..125ПРИЛОЖЕНИЕ А...……………………………………………………….127ПРИЛОЖЕНИЕ Б...……………………………………………………….128ПРИЛОЖЕНИЕ В...……………………………………………………….130ПРИЛОЖЕНИЕ Г...……………………………………………………….132ПРИЛОЖЕНИЕ Д...……………………………………………………….135ПРИЛОЖЕНИЕ Е...……………………………………………………….136ПРИЛОЖЕНИЕ Ж..……………………………………………………….138ПРИЛОЖЕНИЕ И...……………………………………………………….139СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ..………………..….1413ВВЕДЕНИЕАктуальность научного исследованияБесплодный брак – одна из наиболее значимых медико-социальных,социальныхиэкономическихпроблемсовременности.ПоданнымВсемирной организации здравоохранения, в экономически развитых странахмира за последние 20–30 лет регистрируется увеличение доли бесплодныхсупружеских пар до 2530 % [80, 191].
В Российской Федерации страдаютбесплодием 78 млн женщин детородного возраста, состоящих в браке, чтосущественно снижает репродуктивный потенциал нации [1]. Низкаяэффективность методов восстановления естественной фертильности женщинстимулироваларазвитиеметодоввспомогательныхрепродуктивныхтехнологий (ВРТ). В настоящее время для многих супружеских пар, ранееобреченных на бездетность, методы ВРТ единственное решение проблемыбесплодия, что подтверждается регистрируемым ежегодным ростом ихиспользования во всем мире.
Одним из наиболее популярных и достаточноэффективных методов избавления от бесплодия является экстракорпоральноеоплодотворение (ЭКО) [70]. Вместе с тем, оценивая терапевтическуюэффективность ЭКО, приходится констатировать, что более половиныначатых циклов все еще являются нерезультативными: лишь в 31,5 %случаев цикл ЭКО приводит к наступлению беременности, а в 22,8 %завершается родами [33-39].Учитывая высокую стоимость и относительно низкую эффективностьпроцедуры ЭКО, в последние годы все большее внимание уделяется поискуновых современных прогностических критериев, использование которых напреконцептивном этапе позволит прогнозировать исход процедуры с цельюрешенияпроблемынеэффективноголечениябесплодия.Выявлениемолекулярно-генетических маркеров, указывающих как на благоприятныйисход ЭКО, так и на его неудачу, несомненно повысит результативностьиспользования данного метода, оптимизирует процесс лечения бесплодия и,4вероятно, снизит экономическую нагрузку на систему здравоохранения вцелом.Механизмсогласованнымполноценногонаступлениябеременностивзаимодействиемэмбрионаидвухвофактороврецептивногомногомэндометрия,обусловленфункциональночтоявляетсяопределяющим в создании оптимальных условий для имплантации.Реализация этого процесса осуществляется за счет генетических имолекулярных преобразований, регулируемых экспрессией ряда иммунныхфакторов, в том числе интерлейкинов, факторов роста, молекул адгезии,хемокинов, простагландинов и их рецепторов.
Все это, в итоге, определяетэффективность процессов дифференцировки, адгезии и инвазии трофобласта.Степень разработанности темыНесмотря на достаточное количество работ по изучению цитокиновойрегуляции плацентации, родовой деятельности и некоторых осложненийбеременности [25, 41, 48, 63, 71, 72, 77, 78, 150], данные о ролииммуногенетическихфактороввнаступленииЭКО-индуцированнойбеременности единичные, а их результаты часто противоречат друг другу[69, 212]. Это можно объяснить как особенностями дизайна исследований,так и полифункциональностью изучаемых показателей.
В связи с этим недостигнуто единой точки зрения о ценности выявления цитокинов,являющихся оптимальными маркерами прогнозирования исхода процедурыЭКО. В данном направлении поиски активно продолжаются. Следует такжеотметить, что, вероятнее всего, использование какого-то одного маркера дляпрогнозирования эффективности процедуры ЭКО недостаточно как ввидусложного механизма имплантации эмбриона, так и индивидуальныхособенностей гомеостаза, участвующих в программе ЭКО пациенток.Таким образом, исследования по изучению иммуногенетическихфакторов и связанных с ними молекулярных механизмов регуляциифункциональной активности эндометрия в целях повышения результатов5восстановленияфертильностивпрограммахЭКОявляютсявесьмаактуальными.Цель исследованияОпределить роль цитокинов и их генов в качестве предикторовнаступления беременности в программах ЭКО у женщинс трубно-перитонеальным бесплодием с целью разработки персонифицированногоподхода к лечению и для повышения эффективности процедуры.Задачи исследованияСравнить содержание IL-1α, IL-1β, IL-1Rа, M-CSF в сыворотке1.крови пациенток с различными исходами процедуры ЭКО.Выявить концентрации IL-1α, IL-1β, IL-1Rа, M-CSF в сыворотке2.крови женщин, ассоциируемые с благоприятным исходом программы ЭКО.Изучить распределение частот генотипов полиморфных маркеров3.rs1800587 (C/T) гена IL-1α, rs2234663 (2/4) гена IL-1Rа, rs386693509 (CA/TC)и rs3216780 (del/G) гена CSF1R у женщин с трубно-перитонеальнымбесплодием, участвующих в программе ЭКО.Выявить ассоциацию полиморфных вариантов генов IL-1α,4.IL-1Rа и CSF1R с эффективностью процедуры ЭКО.Провести анализ содержания IL-1α, IL-1Rа, M-CSF в сыворотке5.кровивзависимостиотrs1800587 (C/T) гена IL-1α,носительстваполиморфныхвариантовrs2234663 (2/4) гена IL-1Rа , rs386693509(CA/TC) и rs3216780 (del/G) гена CSF1R соответственно у женщин с трубноперитонеальным бесплодием, участвующих в программе ЭКО.6.Установитьоптимальноесочетаниеизучаемыхмаркеров,обладающее максимальной прогностической ценностью исхода ЭКО уженщин с трубно-перитонеальным бесплодием.6Научная новизнаУстановлены основные различия концентраций IL-1α в сывороткекрови на 2-й день менструального цикла, предшествующего протоколу ЭКО,у женщин с различными исходами процедуры.Впервые в сыворотке крови пациенток выявлены концентрации IL-1α иM-CSF, которые на преконцептивном этапе ассоциированы с наступлениембеременности в циклах ЭКО.Впервыеустановленораспределениеносительствагенотиповполиморфных маркеров rs1800587 (C/T) гена IL-1α, rs2234663 (2/4) гена IL1Rа, rs386693509 (CA/TC) гена CSF1R, rs3216780 (del/G) гена CSF1R уженщин с трубно-перитонеальным бесплодием, участвующих в программеЭКО.Впервые показано, что для женщин с трубно-перитонеальной формойбесплодия прогностически значимыми в плане наступления беременности вциклах ЭКО являются полиморфные варианты Т/Т rs1800587 гена IL-1α,ТС/СА rs3693509 гена CSF1R и del/G rs3216780 гена CSF1R.Впервые установлена ассоциация генотипа ТС/ТСполиморфногомаркера rs3693509 гена CSF1R с повышенным содержанием M-CSF всыворотке крови.Изучены корреляционные связи между цитокинами IL-1α, IL-1β, IL1Rа, M-CSF между собой, а также с гипофизарными и яичниковымигормонами.Теоретическая и практическая значимостьРасширены и дополнены представления о роли цитокинов в реализациирепродуктивныхпоказатели,функций.обладающиеВпервыеопределенынаибольшейиммуногенетическиеинформативностьюдляпрогнозирования наступления беременности в результате процедуры ЭКО.Генотипирование женщин на носительство полиморфных вариантовТ/Т rs1800587 гена IL-1α, ТС/СА rs3693509 гена CSF1R и del/G rs32167807гена CSF1R, а также определение концентрации IL-1α и M-CSF в сывороткекрови могут быть использованы для прогнозирования эффективностипрограмм ЭКО на преконцептивном этапе, что позволит обоснованнопланировать индивидуальную тактику ведения пациенток в предстоящемцикле лечения методом ЭКО и снизить затраты государства и частных лиц напроведение процедуры.Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы ииспользуются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедрФГАОУ ВО Первый МГМУ им.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
