Автореферат (1140056), страница 3
Текст из файла (страница 3)
В течение 7 суток животнымопытной группы и группы сравнения внутрижелудочно вводились исследуемыепрепараты. На 7-е сутки исследования животным всех групп, кроме интактных, через 1 чпосле введения препаратов индуцировали острый гепатит. Следующие 7 суток животныеполучали исследуемые препараты в тех же дозах. Для оценки функционального состоянияпечени определяли биохимические показатели крови исследуемых животных: АЛТ, АСТ,ЩФ, холестерин, общий билирубин. Методом активированной хемилюминесценции сиспользованием АБАП в исследуемых гомогенатах печени животных, получавших ЛВИК,была исследована антиоксидантная активность. Анализ гистоморфологических измененийобразцов печени крыс проводили с помощью балльной оценки воспаления в соответствиис индексом гистологической активности гепатита по Knodell.Таблица 4Схема исследования гепатопротекторной активности ЛВИК№группы123НазваниегруппыИнтактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=10Сравненияn=104Описание группыУ крыс не вызывали острый гепатит и не вводили исследуемыепрепаратыКрысам с острым гепатитом внутрижелудочно вводилидистиллированную водуКрысам с острым гепатитом внутрижелудочно вводили растворЛВИК,разведенногодистиллированнойводой,вэкспериментальной дозе 51,4 мг/кг (в пересчете на сухойостаток)Крысам с острым гепатитом внутрижелудочно вводили водныйраствор измельченных таблеток «Карсила» (экстрактрасторопши пятнистой сухой) (Sopharma, Болгария) в дозе 140мг/кгМетоды исследования гиполипидемической активности ЛВИК.
Исследованиягиполипидемической активности ЛВИК были проведены на белых крысах – самцах линииWistar(табл. 5) с использованием модели экспериментальной гиперлипидемии,вызванной внутрибрюшинным введением масляного раствора Твин-80 (Panreac, США). За10 суток до индукции гиперлипидемии животным опытной группы внутрижелудочновводили раствор ЛВИК.
После пищевой депривации у опытных животных вызывалигиперлипидемию. На следующие сутки образцы крови крыс отбирались из хвостовойвеныдляопределениятриацилглицеридов).биохимическихпоказателей(общегохолестеролаи12Таблица 5Схема исследования гиполипидемической активности ЛВИК№группы123НазваниегруппыИнтактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=10Описание группыУ крыс не вызывали гиперлипидемию и не вводилиисследуемые препаратыКрысам с гиперлипидемией внутрижелудочно вводилидистиллированную водуКрысам с гиперлипидемией внутрижелудочно вводили водныйраствор ЛВИК в экспериментальной дозе 51,4 мг/кг (в пересчетена сухой остаток)РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙРезультаты исследования химического состава (полифенольных соединений)и антиоксидантной активности водного извлечения караганы гривастой. ВЭЖХДМД-МС-анализ показал, что в водных извлечениях караганы гривастой содержатсяпреимущественномоно-гидроксилированныхифлавоноловдигликозиды,–являющиесямирицетина,кверцетина,производнымикемпферолаОиО-метилированных флавонолов – изорамнетина, ларицитрина и сирингетина.
В качествеосновныхфлавоноидовидентифицированывводныхкверцитрин,извлеченияхгиперозид,караганыгривастоймирицетин-3-рамнозид,былиавикулярин,ларицитрин-3-рамнозид, 3-рамнозиды изорамнетина и сирингетина. Для караганыгривастой характерно наличие 3-рамнозидов, пентозидов (в том числе 3-арабиноидов и 3ксилозидов) и софорозидов/3,5-диглюкозидов вышеперечисленных флавонолов. Висследованныхэкстрактахтакжеприсутствовалонезначительноеколичествопроизводных флавонов – дигликозид апигенина и гликозиды диметилированного флавона.Суммарное содержание флавоноидов караганы гривастой в сборе 2010 г. составило 27,15мг/г, в сборе 2015 г.
– 31,27 мг/г.У исследуемых водных извлечений было подтверждено наличие антиоксидантнойактивности. Латентный период ХЛ-системы АБАП-люминол увеличивался прямопропорционально концентрации исследуемых образцов. Аналогичная зависимость былаполучена и для тролокса – стандартного антиоксиданта при проведении подобныхисследований. АОА караганы гривастой, ммоль/г (M±m): водное извлечение из сбора 2010г. – 35,50±1,366, из сбора 2015 г.
– 43,73± 2,486.Результаты исследования острой токсичности ЛВИК. Однократное пероральноевведение и накожное нанесение максимальной дозы (7000 мг/кг) не вызвало гибелиживотных. Таким образом, мы можем сделать вывод, что согласно ГОСТ 12.1.007-76исследуемое вещество соответствует 4-му классу опасности «Вещества малоопасные».13Результаты исследования противовоспалительной активности ЛВИК намодели контактного дерматита. Наружное и пероральное применение ЛВИК достоверноуменьшало признаки воспалительного процесса в очаге контактного дерматита. Этопроявлялось уменьшением толщины кожной складки и снижением степени воспаленияпораженного участка кожи (табл. 6). В опытной группе накожное нанесение ипероральноевведениераствораЛВИКживотнымспособствовалоуменьшениювыраженности внешних и гистологических признаков контактного дерматита (эрозииэпидермиса, нейтрофильной инфильтрации дермы) при достоверном отличии отпоказателей контрольной группы животных.РастворЛВИКтакжеустранялпризнакивоспалительногопроцессавпериферической крови животных с контактным дерматитом.
В начале исследования увсех животных, пораженных контактным дерматитом, наблюдались типичные признакивоспалительнойреакции:достоверноеувеличениеСОЭ,лейкоцитозисдвиглейкоцитарной формулы влево (доля сегментоядерных нейтрофилов увеличивалась, адоля лимфоцитов снижалась). На 7-е сутки в группе животных, получавших растворЛВИК, все показатели незначительно улучшились. В последний день исследования уживотных контрольной группы еще наблюдались явления лейкоцитоза. Также сохранялсясдвиг лейкоцитарной формулы влево (количество сегментоядерных нейтрофилов былоповышено, а лимфоцитов – снижено).
Все показатели крови опытной группы достоверноне отличались от показателей у животных интактной группы (табл. 7).Противовоспалительный эффект ЛВИК выражался в достоверном повышениииндекса ингибирования воспалительной реакции: при накожном применении – вопытной группе и группе сравнения (61,50 ± 0,24**,#) % и (58,68 ± 0,45**) %, в контрольнойгруппе (26,89 ± 0,17) %; при пероральном применении – в опытной группе(68,45±0,26**) %, в контрольной группе (45,15±0,17)%.Показатели активности воспалительного фермента миелопероксидазы в коже вобласти очага контактного дерматита у животных опытной группы были достоверно нижепоказателей у животных контрольной группы: при накожном применении – вконтрольной группе пероксидазная активность составляла (22,0 ± 3,7*) ед/г и достовернопревышала соответствующий показатель в опытной группе (13,3 ± 2,4**) ед/г и в группесравнения (12,5± 3,6**) ед/г, в интактной группе – (9,5 ± 2,8) ед/г; при пероральномприменении – в контрольной группе пероксидазная активность составляла (24,5 ± 3,5*)ед/г и достоверно превышала показатель для опытной группы (12,4 ± 4,1**) ед/г и дляинтактных животных (9,1 ± 2,1) ед/г.14Таблица 6Влияние изучаемых средств на течение контактного дерматита у крыс, M ± m (n=10)ГруппаИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяСравненияИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяСравненияИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяСравненияИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяТяжесть поражения,Толщина кожной складки, ммбаллыПри накожном применении ЛВИКПосле нанесения 2,4-динитрохлорбензола в течение 4 суток02,5±0,324,96±0,18*7,73±0,80*4,97±0,23*7,68±0,78*4,95±0,21*7,71±0,78*7-е сутки исследования02,5±0,294,56±0,15*6,81±0,76*3,54±0,22*,**5,08±0,55*,**3,50±0,32*,**5,18±0,34*,**12-е сутки исследования02,5±0,313,91±0,17*5,83±0,81*2,43±0,33*,**3,0±0,28*,**2,45±0,25*,**3,1±0,17*,**При пероральном применении ЛВИКПосле нанесения 2,4-динитрохлорбензола в течение 4 суток02,5±0,384,94±0,18*9,8±0,60*4,94±0,33*9,7±0,48*7-е сутки исследования02,5±0,424,54±0,20*7,7±0,54*3,68±0,19*,**6,0±0,17*,**12-е сутки исследования02,5±0,373,81±0,17*5,1±0,41*2,21±0,38*,**3,1±0,18*,**15ПоказателиСОЭ, мм/чЛейкоциты, 109/лПалочкоядерныенейтрофилы, %Сегментоядерныенейтрофилы, %Базофилы,%Моноциты, %Эозинофилы, %Лимфоциты, %СОЭ, мм/чЛейкоциты, 109/лПалочкоядерныенейтрофилы, %Сегментоядерныенейтрофилы, %Базофилы,%Моноциты, %Эозинофилы, %Лимфоциты, %Показатели периферической крови крыс с индуцированным контактным дерматитом, M ± m (n=10)Группы животныхИнтактнаяКонтрольнаяОпытнаяСравненияПослеНа 7-еНа 12-еПослеНа 7-е сутки На 12-еПослеНа 7-е суткииндукции суткисуткииндукциисуткииндукцииКДКДКДНакожное применение**2,2±0,146,14±0,445,9±0,443,2±0,46*6,0±0,32* 4,3±0,23*,**3,0±0,416,11±0,23* 4,8±0,32*,*******,****6,9±0,7612,8±0,7112,1±0,439,3±0,6812,9±0,76 10,4±0,137,0±0,8511,7±0,52* 10,9±0,21*,**2,9±0,153,4±0,11*3,3±0,11*3,2±0,123,3±0,14*3,0±0,13*,**2,9+0,193,5±0,16*3,0±0,22*,**14,4±0,7431,0±0,44*28,0±0,23*23,0±0,20*29,0±1,1*25,0±0,23*,**0,5±0,052,1±0,192,2±0,2180,9±0,461,2±0,053,2±0,144,1±0,263,0±0,4*1,3±0,09*3,3±0,14*3,9±0,45*61±0,71*2,1±0,156,5±0,367,13±0,34*12,1±0,48*6,4±0,51*12,1±0,22*0,7±0,020,8±0,09 0,7±0,02*2,9±0,23,2±0,41 3,1±0,2**3,4±0,153,5±0,33 3,2±0,12*67±0,50*63,1±0,7*65±0,54*,**Пероральное применение4,1±0,25*6,9±0,21*4,8±0,23*,**10,3±0,39* 12,5±0,67* 10,6±0,14*,**2,9±0,133,4±0,21*3,2±0,12*3,0±0,123,1±0,133,0±0,1313,4±0,5331,2±0,38*27,0±0,33*19,5±0,26*29,2±0,71*0,9±0,072,2±0,222,3±0,182,1±0,501,0±0,13,4±0,22*3,8±0,3*64,5±0,51*1,1±0,13,2±0,13*3,9±0,34*62,9±0,80*0,8±0,063,0±0,2*3,5±0,17*65,6±0,52*0,7±0,063,2±0,14*4,1±0,21*63,8±0,67*Таблица 7На 12-есутки2,9±0,216,9±0,72**3,2±0,1514,9±0,72**27,9±0,54*25,4±0,37*,**13,0±0,1**0,6±0,022,4±0,132,1±0,1**76±0,65**0,9±0,04*,**2,8±0,323,4±0,24**62,3±0,5*0,8±0,09*,**3,2±0,11*3,2±0,33*66,1±0,4*,**0,5±0,06**2,3±0,442,0±0,12**70,1±0,7*,**2,7±0,17**–––––––––24,6±0,33*,**13,9±0,31**–––0,7±0,13,1±0,2*3,4±0,13*69,8±0,61*,**0,9±0,022,8±0,21*2,8±0,12**74,6±0,15**––––––––––––2,9±0,51**6,9±0,78**16РезультатыисследованияранозаживляющейактивностиЛВИК на модели линейной раны.
Заживление раны происходило от концов линейнойраны к центру (табл. 8). Данные тензиометрии раневого рубца крыс в исследуемыхгруппах, Н (M ± m, n=10): контрольная – 3,308 ± 0,96; опытная – 5,088 ± 1,77**; сравнения– 6,015 ± 1,54**.Таблица 8Влияние изучаемых средств на динамику заживления линейной раны у крыс, M ± m(n=10)ГруппаРазмер раны, смКонтрольнаяОпытнаяСравнения3,1±0,053,0±0,033,0±0,03КонтрольнаяОпытнаяСравнения2,9±0,182,4±0,20**2,0±0,23**2-е суткиСтепень эпителизации, баллы–––5-е сутки1,0±0,112,1±0,89**2,3±1,01**8-е суткиКонтрольная1,7±0,212,2±0,21**Опытная0,65±0,112,9±0,76**Сравнения0,49±0,23**2,9±0,29**Как видно из представленных данных, применение раствора ЛВИК повышаетскорость заживления и прочность раневого рубца.
При этом показатели опытной группыне отличались от показателей группы сравнения, что показывает сопоставимое действиеисследуемых препаратов.РезультатыисследованиякапилляропротекторнойактивностиЛВИК.Установлено, что время появления петехий и время их отчетливого прокрашивания уживотных опытной группы и группы сравнения достоверно больше, чем те же показателиу животных контрольной группы (табл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
