Автореферат (1140056), страница 2
Текст из файла (страница 2)
АрзамасцеванакафедреИнститутафармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский университет).Соответствие диссертации паспорту научной специальностиДиссертационное исследование Какорина П.А., включающее вопросы изученияфармакологической активности лиофилизированного водного извлечения караганыгривастой, соответствует паспорту специальности 14.03.06 – «Фармакология, клиническаяфармакология» и областям исследований по следующим пунктам: п.1, п.3, п.5.
Областьнаук данной диссертации – медицинские науки.Личный вклад автора. Автор провел анализ современной отечественной изарубежной литературы по теме диссертационной работы. Автором самостоятельновыполненаэкспериментальнаястатистическаяобработка,частьописаниеисследования.иобсуждениеТакжеавторомполученныхсформулированы выводы и научно-практические рекомендации.выполненарезультатов,7Публикации.
По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них 4 статьи (3оригинальных и 1 обзорная) в журналах, рекомендованных Высшей аттестационнойкомиссией при Министерстве образования и науки Российской Федерации дляпубликации научных результатов диссертаций.Объем и структура работыДиссертация изложена на 137 страницах печатного текста и состоит из введения,обзора литературы, описания материалов и методов исследования, двух глав собственныхисследований, обсуждения результатов, выводов, научно-практических рекомендаций исписка литературы, включающего 192 отечественных и 41 зарубежных источников.Работа содержит 23 таблицы и 34 рисунка.СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫСырье C. jubata было собрано и заготовлено в Кунгуртургском районе (РеспубликаТыва) весной 2010 и 2015 гг. Идентификация сырья и его морфолого-анатомическиепризнаки проводились в соответствии с методикой, описанной в статье Е.Д. Рыбаковой«Фармакогностическое изучение листьев и травы караганы гривастой Caragana jubata(Fabaceae)» (Рыбакова Е.Д., 2014).В качестве объекта исследования фармакологических свойств было использованолиофилизированное водное извлечение (ЛВИК), полученное из побегов надземной частиC.
jubata, собранной в 2015 г. в экспериментальной дозе 51,4 мг/кг в пересчете на сухойостаток. Доза была определена согласно литературным данным (Телятьев В.В., 1976). Дляисследованияхимическогосоставаиспользовалосьлиофилизированноеводноеизвлечение, полученное из побегов надземной части C. jubata, собранной в 2010 и 2015 гг.Для исследования антиоксидантной активности – водное извлечение из побеговнадземной части C. jubata, собранной в 2010 и 2015 гг. С учетом коэффициентамежвидового переноса (Хабриев Р.У., 2005) были определены дозировки для крыс имышей.
Доза на крысу составляла 308,4 мг/кг, на мышь – 626 мг/кг.Исследования фармакологической активности ЛВИК были проведены на белыхбеспородных мышах-самцах массой 20–25 г и на белых крысах – самцах линии Wistarмассой 200–220 г, полученных из питомника лабораторных животных «КролИнфо»(Московская область, Орехово-Зуевский район).Результатыисследованиябылиобработаныметодамивариационнойпараметрической статистики с использованием t-критерия Стьюдента и представлены каксредняя величина ± стандартная ошибка среднего (М ± m) при помощи пакетастатистических программ Statistica 10. Различия считались статистически достовернымипри уровне различия p ≤ 0,05.
Обозначения в таблицах: * – достоверное отличие от8интактной группы, p ≤ 0,05; ** – достоверное отличие от контрольной группы, p ≤ 0,05; #– достоверное отличие от группы сравнения, p ≤ 0,05.Методы исследования химического состава (полифенольных соединений) иантиоксидантной активности водного извлечения караганы гривастой. Исследованияпроводились с использованием системы ВЭЖХ Agilent 1100 (Agilent Technologies, США),оснащеннойбинарнымнасосом,дегазатором,термостатируемымавтосамплером,термостатом колонок, диодно-матричным спектрофотометрическим детектором (ДМД)(Agilent 1100 Series Diode Array) и времяпролетным масс-спектрометрическим (МС)детектором (Agilent 6200 TOF LC/MS).
Идентификацию и определение содержанияфлавоноидов проводили по оригинальной методике для анализа флавоноидов в плодахчерникиобыкновенной,арониичерноплодной,смородинычернойикалиныобыкновенной (Перова И. Б., 2014).Антиоксидантную активность раздельно приготовленныхобразцов водныхизвлечений караганы гривастой определяли по торможению ими окисления люминола,которое индуцировали водорастворимыми пероксильными радикалами, образующимисяпри термическом разложении 2,2’-азобис(2-амидинопропан) дигидрохлорида (АБАП)(Чехани Н.Р., Тесёлкин Ю.О., 2012).Методы токсикологического исследования ЛВИК.
Исследование остройтоксичности водного извлечения караганы гривастой при пероральном введении инакожном нанесении определяли на белых мышах – самцах согласно «Руководству попроведению доклинических исследований лекарственных средств» (2012 г.), ГОСТ 326442014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека.Острая пероральная токсичность – метод определения класса острой токсичности» иГОСТ 32373-2013 «Методы испытаний по воздействию химической продукции наорганизм... испытаний по оценке острой токсичности при накожном поступлении».Раствор ЛВИК испытывали в дозах 626, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000 и 7000 мг/кг.Методы исследования дерматотропной активности ЛВИК. Исследованияпротивовоспалительной активности ЛВИК проведены на белых крысах – самцах линииWistar с использованием модели контактного дерматита при накожном и пероральномприменении (табл.
1). Для индукции контактного дерматита использовали стандартныйаллерген–2,4-динитрохлорбензол(Sigma-Aldrich,США).Продолжительностьисследования составляла 12 суток: 4 из них – аппликация 2,4-ДНХБ и 8 – нанесениеисследуемых препаратов. В ходе эксперимента для оценки эффективности ЛВИК былииспользованы следующие данные: балльная оценка проявления контактного дерматита(Смирнов. В.
С., Саватеева-Любимова Т. Н., 2013), толщина кожной складки в очаге9воспаления в мм, гематологические показатели крови подопытных крыс. По результатамизмерений в конце эксперимента рассчитывали индекс ингибирования воспалительнойреакции по формуле (Ершик В. М., Голубцов, В. В., 2012): ИИвр=0 −0× 100 % , где d0 –толщина кожной складки до начала лечения, мм, d – толщина кожной складки послелечения,мм.ЧембольшепротивовоспалительноебылдействиепоказательИИ,применяемоготемболеепрепарата.выраженобылоДополнительнымикритериями были показатели гистологических исследований, а также активностьмиелопероксидазы (МПО) в кожном лоскуте животных в области очага контактногодерматита как одного из маркеров воспаления.Таблица 1Схема исследования противовоспалительной активности ЛВИК№группыНазваниегруппы1Интактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=10234Сравненияn=101Интактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=1023ИсследованияОписание группыНакожное применение ЛВИКУ крыс не вызывали контактный дерматит и не наносилиисследуемые препаратыКрысам с контактным дерматитом наносили аппликациидистиллированной водойКрысам с контактным дерматитом наносили аппликации ЛВИКв дозе 10 мг в виде 10%-ного раствора, разведенногодистиллированнойводой,чтосоответствуетотвару,приготовленному в соотношении 1:10 (Телятьев В.В., 1976)Крысам с контактным дерматитом наносили аппликации крема«Акридерм» (бетаметазон) (АО «Акрихин», Россия) в дозе 1 гПероральное применение ЛВИКУ крыс не вызывали контактный дерматит и не вводили имисследуемые препаратыКрысам с контактным дерматитом внутрижелудочно вводилидистиллированную водуКрысам с контактным дерматитом внутрижелудочно вводилираствор ЛВИК, разведенного дистиллированной водой, вэкспериментальной дозе 51,4 мг/кг (в пересчете на сухойостаток)ранозаживляющейактивностиЛВИКбылипроведенысиспользованием модели линейной раны на белых крысах – самцах линии Wistar (табл.
2).Для оценки эффективности ускорения восстановительных процессов после нанесениялинейной раны были использованы морфологические показатели заживления раны(формирование рубца, воспалительная инфильтрация в области раны), длина раневойповерхности в мм, оценка скорости эпителизации раны в баллах (Костырко Я.А., Алексеев10К.В., 2014) и показатели тензиометрии раневого рубца. Продолжительность исследованиясоставляла 8 суток с ежедневным нанесением исследуемых препаратов.Таблица 2Схема исследования ранозаживляющей активности ЛВИК№группы123НазваниегруппыИнтактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=10Сравненияn=104Описание группыКрысы не подвергались хирургическому вмешательству, и им ненаносили исследуемые препаратыКрысамслинейнойранойнаносилиаппликациидистиллированной водойКрысам с линейной раной наносили аппликации ЛВИК в дозе 10мг в виде 10%-ного раствора, разведенного дистиллированнойводой, что соответствует отвару, приготовленному всоотношении 1:10 (Телятьев В.В., 1976)Крысамслинейнойранойнаносилиаппликацииметилурациловой мазью («Нижфарм», Россия) в дозе 1 гИсследования капилляропротекторной активности ЛВИК проведены на белыхкрысах – самцах линии Wistar на модели ксилоловых петехий, где регистрировали времяпоявления первых петехий и их отчетливого окрашивания в области депилированнойбрюшной стенки крыс (табл.
3). Интенсивность и скорость появления окраскипораженного участка отражала степень поражения капилляров.Схема исследования капилляропротекторной активности ЛВИК№группы1234НазваниегруппыИнтактнаяn=10Контрольнаяn=10Опытнаяn=10Сравненияn=10Таблица 3Описание группыКрысам не вызывали поражения капилляров и не вводилиисследуемые препаратыКрысам на фоне поражения капилляров внутрижелудочновводили дистилированную водуКрысам на фоне поражения капилляров внутрижелудочновводили раствор ЛВИК, разведенного дистиллированной водой,в экспериментальной дозе 51,4 мг/кг (в пересчете на сухойостаток)Крысам на фоне поражения капилляров внутрижелудочновводили водный раствор измельченных таблеток «Аскорутина»(аскорбиновая кислота+рутозид) («Вифитех», Россия) в дозе 100мг/кгМетоды исследования гепатопротекторной активности ЛВИК.
Исследованиягепатопротекторной активности лиофилизированного водного извлечения караганыгривастой были проведены на белых крысах – самцах линии Wistar (табл. 4) сиспользованиеммоделиострогогепатита,индуцированногопарацетамолом.11Продолжительность исследования составила 14 суток. Введение исследуемых веществживотным проводили по схеме «профилактика + лечение».
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
