Диссертация (1139970), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Исходя из этогопредположения, использование ТФР представляется полезным в клиническойпрактике,посколькуэтоспособствуетбыстромуизлечиваниюсвосстановлением полноценной ткани и обеспечивает быстрое и безопасноевозвращение к неограниченной деятельности. Богатая тромбоцитами плазма(PRP) является простым, экономным и минимально инвазивным способомполучения естественной концентрации аутологических факторов роста.
Внастоящее время широко проводятся эксперименты в различных областяхмедицины для выявления ее способности стимулировать регенерацию тканис низким заживляющим потенциалом. Области применения: спортивнаямедицина,ортопедия,стоматология,дерматология,офтальмология,пластическая и челюстно-лицевая хирургия и т.д. [126, 187].Также было замечено, что, хотя секреция ТФР происходит главнымобразом в течение первого часа, тромбоциты остаются жизнеспособными втечение 7 дней и продолжают генерировать факторы роста.
Соответственнобылосделанопредположение,чтооднаединственнаяинъекциявповрежденную ткань могла бы быть достаточным лечением в большинствеклиническихслучаев.Былосделанопредположение,чтоданныйперспективный инновационный подход следует применять как можно шире вклинической практике. Однако существующие данные по использованиюОТА (PRP) в доклинических и клинических исследованиях оказалисьспорными. Если литература о роли изолированных факторов роста прирегенерации ткани широко представлена, то исследований на животных иклинических исследований, демонстрирующих реальный потенциал PRP,30способствующийвосстановлениюразличныхтканей,оказалосьнедостаточно [72].Тромбоциты обычно известны своей ролью в гемостазе.
Также онииграют ключевую роль как промежуточное звено в процессе заживленияповрежденной ткани за счет способности выделять из своих α-гранулфакторы роста [159, 198]. Тромбоциты содержат пулы хранения факторовроста, включая полученный из тромбоцитов фактор роста (PDGF),трансформирующий фактор роста (TGF-b), тромбоцитный эпидермальныйфактор роста (PDEGF), сосудистый фактор эндотелиального роста (VEGF),инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1), фибробластический фактор роста(FGF) и эпидермальный фактор роста (EGF) [125, 126, 128, 187] (табл. 1).Таблица 1 – Факторы роста α-гранул тромбоцитовФакторЭпидермальный фактор роста(PD-EGF)Трансформирующий ростовойфактор бета (TGF-b1 и b2)Тромбоцитарный фактор роста(PDGF A+B)Инсулиноподобные факторыроста (IGF-I,II)Васкулоэндотелиальныефакторы роста (VEGF, ECGF)Основной фактор ростафибробластов (bFGF)ФункцииАктивация пролиферации эпидермальных иэпителиальных клеток, закрытие кожной раны,стимулирование ангиогенеза.Регуляция метаболизма костной ткани, апоптоз,усиление синтеза белков межклеточного матриксаАктивация фибробластов и миоцитовгладкомышечной ткани, клеточного роста,стимуляция синтеза коллагена игликозаминогликанов, усиление образованиягрануляционной ткани, формирование матриксаколлагена и кости с участием костныхморфогенетических белков, стимулированиеангиогенезаСтимуляция пролиферации клеток костной ихрящевой тканей, активация ангиогенеза, стимуляциязаживления мышечной тканиСтимуляция роста новых кровеносных сосудов,антиапоптозСтимуляция ангиогенеза и пролиферациифибробластов, экспрессия в костной ткани,улучшение заживления мышечной тканиАльфа-гранулы являются также источником цитокинов, хемокинов имногих других белков [95], по-разному вовлеченных в стимулированиехемотаксиса,пролиферациюклетокисозревание,модуляциюподстрекательских молекул и привлечение лейкоцитов.
Кроме того,31тромбоциты хранят антибактериальные и фунгицидные белки, способныепредотвращать инфекции и протеазы, такие как металлопротеаза-4 и факторыкоагуляци [95]. Помимо альфа-гранул тромбоциты содержат плотныегранулы, которые хранят и выделяют после активации АДФ, ATФ ионыкальция, гистамина, серотонина и допамина [168]. Также тромбоцитысодержат лизосомные гранулы, которые могут секретировать кислотныегидролазы, катепсин D и E, эластазы и лизозим [97, 193], и, наиболеевероятно, другие, пока еще недостаточно хорошо изученные молекулы, ролькоторых в процессе восстановления ткани нельзя недооценивать.
Тот факт,что тромбоциты секретируют факторы роста и активные метаболиты,означает, что их прикладное использование может иметь положительноевлияние в клинических ситуациях, требующих быстрого эффекта ирегенерации ткани [97].ОТАявляетсяминимальноинвазивнымметодомполученияконцентрата тромбоцитов и, соответственно, факторов роста и многих другихбиологически активных молекул, а их применение в форме тромбоцитногогеля могло бы в дальнейшем стать преимуществом, которое в виде клейкойпленки обеспечивало бы дальнейшую их секрецию в нужном месте [97].ОТАопределяетсякакпроизводноекровисболеевысокойконцентрацией тромбоцитов по сравнению с исходной кровью, полученноедифференциальным центрифугированием аутологической цельной крови[19].
Более детально элементы ОТА единообразно в литературе описаны небыли. ОТА – это плазма, концентрация тромбоцитов в которой превышаетнормальную в 3-3,5 раза. В норме концентрация тромбоцитов в среднем220 000 клеток на 1 микролитр. Клинически эффективной считаютконцентрацию ОТА имеющей приблизительно 400% тромбоцитов от ихуровня в периферической крови, т.е.
она должна содержать ≥1 миллионовтромбоцитов на мкл [162, 163]. Однако в литературе сообщается о большейвариабельности концентрации ОТА [112] и о том, что клиническая32эффективностьОТАбылапродемонстрированадажеприменьшихконцентрациях [112].Различные способы полученияОТА, различные концентрациитромбоцитов, возможность присутствия лейкоцитов в тромбоцитарномконцентрате и многие другие факторы, искажая результаты исследований,усложняют как доклинические исследования в этой области, так иклиническую оценку эффективности этого подхода для ускорения процессоврепарации тканей.Перечисленные эндогенные факторы роста находятся в определенномсоотношении. Эндоцеллюлярное количество определено на генетическомуровне, сферой их воздействия являются рецепторы клеточных мембранстволовых клеток, где они проявляют высокую степень аффинности, вызываяих пролиферацию.
Данные субстанции (PDGF, VEGF, TGF и др.) обладаютолигопептидной структурой и принадлежат к группе «факторов роста» ккоторым также относятся: эпидермальный фактор роста, инсулин инекоторые другие, отличительной чертой которых является повышеннаястепень аффинности и продолжительное время начального воздействия нарецепторы [169].СферавоздействияТФРвотличиеотистинныхмутагенов(ионизирующее излучение, канцерогены, недоокисленные радикальныегруппы и прочие) имеет свои особенности. Факторы роста не воздействуютна наследственный хромосомный аппарат клетки, а влияют на мембранныеклеточные рецепторы I и II типа, что способствует ускорению роста идифференцировкездоровыхклеток-предшественников.Основнымрезультатом исследований в этом разделе остеологии является обширноеприменение ОТА в лечении дефектов кости челюстно-лицевой области , аименно – вживление имплантатов [201].ТФР является основным фактором (митогеном) для определенныхгрупп клеток: фибробластов, клеток гладкой мускулатуры и других типовклеток.
ТФР занимает играет одну из ведущих ролей в эмбриогенезе и33регенерацииповрежденныхтканей.Выявленоидоказаноегохемоаттрактантное и пролиферативное влияние на все клетки, принимающиеучастие в раневом процессе. Также было отмечено его выраженное влияниена клетки мезенхимального происхождения. Активированные тромбоцитыявляются главным источником ТФР. Изначально ТФР был обнаружен всыворотке крови, однако он отсутствует в свободной от клеток плазме крови[84, 136]. Синтез ТФР происходит не в тромбоцитах, его синтезосуществляетсявмегакариоцитахизапасаетсявα-гранулах.Приразрушении одного тромбоцита высвобождается примерно 1200 молекулPDGF [16].
Общая концентрация всех изоформ ТФР в сыворотке кровиподдерживается на постоянном уровне и составляет 50-60 нг/мл. Известно,что межклеточный коллагеновый матрикс связывает ТФР [119, 197].Поскольку в организме клетки контактируют с плазмой и тканевойжидкостью местная секреция ТФР играет значимую роль в регуляции ихпролиферации [207]. В процесс заживления раны вовлекаются клетки,находящиеся непосредственно в зоне повреждения. Активация и распадтромбоцитов являются стартом для процесса заживления ран. ТФРиндуцирует направленное перемещение (хемотаксис) основных клеточныхтипов, принимающих участие в процессе репарации: лейкоциты, макрофаги,фибробласты [85, 207].
В различных типах клеток при стимуляции ТФРповышается уровень экспрессии генов PDGF, а также происходит секрецияPDGF-подобных медиаторов [144].Тромбоциты содержат плотные гранулы с биологически активнымимолекулами, они не являются ростовыми факторами, но принимают участиев биохимических и обменных процессах организма, в том числе ввоспалительных и регенеративных реакциях [7].ОТА получают путем центрифугирования цельной крови [7, 163].Большинство специалистов используют инъекционный способ введения [ 7,122, 161].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
