Диссертация (1139886), страница 9
Текст из файла (страница 9)
При этом силу корреляцию в зависимости от50коэффициента корреляции (r) считали слабой при r ≤ 0,25, умеренной – при0,25 < r < 0,75, сильной - при r ≥ 0,75.Сопоставлениевыборокпациентовподинамикеразличныхпоказателей спермы после проведенного лечения проводили с применениемметода Вилкоксона.Вклад различных показателей спермы на вероятность наступлениябеременности у половых партнерш в результате ЭКО определяли с помощьюодно- и многофакторного регрессионного анализа с вычислением показателяотношения шансов (ОШ) с 95% ДИ для каждого изучаемого параметра. Приэтом ОШ определяли как отношение вероятности исхода ЭКО (наступлениебеременности) в одной группе пациентов к вероятности такого же исхода вдругой группе.ОШ вычисляли по формуле: ОШ=(A/B)/(C/D), где A и B – числослучаев наступления и отсутствия беременности в результате ЭКОсоответственно в одной группе, C и D - число случаев наступления иотсутствия беременности в результате ЭКО соответственно в другой группе.При всех вариантах статистических процедур различие междусравниваемымипоказателямисчиталистатистической значимости (p) < 0,05.достовернымприуровне51ГЛАВА 3.
РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЧАСТИИССЛЕДОВАНИЯ3.1. Результаты электронно-микроскопического исследованиясеменников крыс контрольной группыПри светооптическом исследовании семенника крыс паренхиматозныйкомпонент органа был представлен извитыми семенными канальцами,образующими основную массу семенника и находящимися на разныхстадиях сперматогенного цикла. В просвет извитого канальца выходятобразованные спермии. Семенные канальцы отделены друг от друганеравномерными участками интерстициальной соединительной ткани, всостав которой входят сосуды, обычные соединительнотканные элементы иинтерстициальные клетки (клетки Лейдига), продуцирующие половыегормоны (тестостерон и его производные) (рисунок 4).Рисунок 4 - Поперечный срез семенных канальцев (увеличение 200):1 – сперматогенный эпителий; 2 – сперматозоиды в просвете извитогоканальца; 3 – интерстициальная ткань; 4 – сперматогонии; 5 – клеткиСертоли; 6 – миоидные клеткиПриэлектронно-микроскопическомисследованииотмечено,что52собственная оболочка канальца в контрольной группе состоит из базальногослоя, включающего в себя базальную мембрану миоидных клеток, котораяконтактирует с базальной мембраной сперматогенного эпителия; миоидногослоя – тесно прилегающих друг к другу клеток, похожих на миоциты;волокнистогослоя,состоящегоизколлагеновыхволоконифибробластоподобных клеток (самый наружный слой) (рисунок 5).Рисунок 5 - Фрагмент семенного канальца (увеличение 14000):1 - фибробластоподобная клетка; 2 – наружный неклеточный слой; 3 –миоидная клетка; 4 – базальный слой; 5 – фрагмент клетки Сертоли; 6 –сперматогонийПервыйнаружныйслойсперматогенногоэпителиясоставляютлежащие на базальной мембране сперматогонии с темным оптическиплотным ядром и узким ободком цитоплазмы.
Между сперматогониямивидны клетки Сертоли, в цитоплазме которых определяются многочисленныемитохондрии, имеющие электронно-плотный матрикс и большое количествокрист.Гладкаяканальцами.эндоплазматическаяКомплексЦитоплазматическаярасположилисьГольджимембранасперматоцитысетьумереннообразуетипредставленагипертрофирован.углубления,сперматозоидынебольшимив(рисункикоторых6и7).Ультраструктура последних не изменена и соответствовала стадиям53развития. Основания клеток Сертоли лежат на базальной мембране междусперматогониями. Апикальная часть клетки обращена к просвету семенногоканальца и имеет треугольную или пирамидальную форму.
Ближе к центруканальца располагаются сперматоциты. Это крупные клетки с большимядром и широким ободком цитоплазмы. Они имеют округлую или овальнуюформу. Нарушения внутриклеточных мембранных структур отсутствуют.Рисунок 6 - Клетка Сертоли (1) и сперматоцит (2) (увеличение 9000)Рисунок 7 - сперматида на поздних этапах сперматогенеза, окруженнаяцитоплазмой клетки Сертоли (увеличение 14000)Интерстициальные эндокриноциты (клетки Лейдига) располагаютсяоколо кровеносных сосудов (рисунок 8).54Рисунок 8 - Клетка Лейдига (увеличение 14000)Вцитоплазмеопределяетсяхорошоразвитаягладкаяцитоплазматическая сеть, представленная канальцами с мелкодисперснымсодержимым, митохондрии мелкие с осмиофильным матриксом и хорошовыраженными кристами.
Капилляры мелких и средних размеров имеютобычное строение эндотелия (рисунок 9).Рисунок 9 - Капилляр в интерстициальной соединительной ткани(увеличение 12000)3.2. Результаты электронно-микроскопического исследованиясеменников крыс основной группыЧерез 2 дня после 10 сеансов ГБО ультраструктурная организацияклеток Сертоли, Лейдига и клеток сперматогенного ряда не отличалась от55ультраструктурыклетоквконтрольнойгруппеживотных.Винтерстициальной ткани обнаруживали капиллярные почки с щелевиднымпросветом,различимымтолькоприэлектронно-микроскопическомисследовании. Визуально капилляров было больше, чем в контрольнойгруппе. Различные структуры ткани яичка на 2-й день после ГБО показаны врисунках 10-14.Рисунок 10 - Поперечный срез семенного канальца (увеличение 200)Рисунок 11 - Сканирующая электронная микроскопия (увеличение 2000):поперечный скол извитого семенного канальца, элементы сперматогенногоэпителия находятся в просвете канальца56Рисунок 12 - Капилляр с щелевидным просветом, окруженный перицитом(увеличение 12000)Рисунок 13 - Неизмененное строение стенки семенного канальца (увеличение9000): темная клетка – клетка Сертоли; светлая – сперматоцит57Рисунок 14 - Сперматида на поздних этапах сперматогенеза(увеличение 12000)Через месяц после 10 сеансов ГБО отмечается увеличение количествакапилляров в интерстициальной ткани по сравнению с контрольной группойживотных.
Обращает на себя внимание преимущественная локализациякапилляров и сосудистых почек непосредственно у стенки семенногоканальца (рисунки 15-17).Рисунок 15 - Капилляры в интерстициальной ткани (увеличение 9000)58Рисунок 16 - Интерстициальная ткань. Капилляр, клетка Лейдига, стенкасеменного канальца (увеличение 6000)Рисунок 17 - Сперматиды (увеличение 9000)Таким образом, через 2 дня после 10 сеансов ГБО не отмеченоультраструктурных признаков деструкции в клетках Сертоли, Лейдига,капиллярах и клетках сперматогенного ряда.
Через месяц после 10 сеансовГБО таковых негативных последствий воздействия данного физическогофактора также не выявлено, а, наоборот, обнаружены признаки улучшениямикроциркуляция в интерстициальной ткани за счет новообразованныхкапилляров. Эти данные указывают на возможность и обоснованностьприменения ГБО для улучшения различных показателей спермы, в том числеи фрагментации ДНК сперматозоидов.593.3. Результаты гистологического исследования семенников крысСеменники крыс контрольной группы имели типичное строение:семенные извитые канальцы в поперечном и косом сечении разделены междусобой интерстициальной соединительной тканью содержащей сосуды иодиночные или формирующие группы клетки Лейдига. В канальцахнепосредственно на базальной мембране первым слоем лежат крупныесперматогонии, между которыми располагаются клетки Сертоли с болеесветлыми ядрами. Далее располагаются сперматоциты, отличающиеся отсперматогоний более широким ободком цитоплазмы. Внутренний слойсоставляют более мелкие клетки – сперматиды, лежащие в несколько рядов.Сформированные сперматозоиды располагаются группами по всему контурупросвета, длинные хвосты заполняют просвет канальца (рисунок 18).Рисунок 18 - Семенник крысы контрольной группы(окраска гематоксилин-эозин, увеличение 200)Через 2 дня и месяц после 10 сеансов ГБО в количественном икачественном соотношении клетки сперматогенного эпителия не отличалисьот контрольной группы.
В ряде канальцев просвет был заполненотслоившимися сперматогенными клетками (рисунки 19 и 20).60Рисунок 19 - Семенник крысы через 2 дня после проведения 10 сеансов ГБО(окраска гематоксилин-эозин, увеличение 200)Рисунок 20 - Семенник крысы через месяц после проведения 10 сеансов ГБО(окраска гематоксилин-эозин, увеличение 200)Через 1 месяц после 10 сеансов ГБО в ряде канальцев отмеченоувеличенное количество сперматид (рисунок 21).61Рисунок 21 - Семенник крысы через месяц после проведения 10 сеансов ГБО:увеличение количество сперматид в канальце (окраска гематоксилин-эозин,увеличение 200)На основании полученных в ходе данной экспериментальной частиисследования результатов можно утверждать, что применение ГБО неприводит к нежелательным количественным и качественным изменениямструктурных элементов семенников животных.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
