Диссертация (1139875), страница 8
Текст из файла (страница 8)
онтрольные сро и50- до опера ии;- 2 недели после опера ии;- 1 / 3 / 6 и 12 меся ев после опера ии.льтразву овые исследования были выполнены нафуниональнои ультразву оводиагности и в Ф Бнаучном ентре ирургии им. а ад. Б. . етровс огодатчи ами c частотос анирования 12-13ветового допплеровс ого артирования (вафедреосси с омлине ными-режиме и режиме) на аппарате «GE ( Ш )Voluson E8 Expert».З мяг и т ане в области онтурно деформа ии проводили попредварительноразмет е в области планируемоили выполненноаутотранспланта ии жирово т ани в онтрольные сро и.в лючало в себя о ен у выраженности под ожно жировосследованиелетчат и вре ипиентно области до опера ии и ачества пересаженно жировоаутот анипослеирургичес оговмешательства,диагности упослеопера ионны липоне розов ( исуно 2.8).Рисунок 2.8.
ел ие анэ огенные в лючения (участ и липоне роза) в жировомаутотрансплантате (обозначен стрел ами).51Гистологическое исследование мягких тканейистологичес ое исследование было выполнено в лабораторииэ спериментально. . еченовапатоморфологии,Бервыимениинздрава оссии.ля о ен и эффе тивности аутотранспланта ии жирово т ани, попредварительному согласию, па иент ам из онтрольно и основно группбыла выполнена ин изионная биопсия жировыаутотрансплантатов вонтрольные сро и исследования.ервым этапом диагностичес и забор жировы аутотрнасплантатовпроводили под местноанестезиеметодомирургичес ого иссеченияучаст а жирово т ани диаметром 1 см в донорс о области до опера ии.торым этапом ин изионную биопсию выполняли в послеопера ионныеонтрольные сро и из ре ипиентно области аутотранспланта ии жировот ани.олученные фрагменты жировот ани фи сировали в 10 %формалине в течение 4 суто , затем заливались парафином.срезы толщино4-5 мо рашивалиарафиновыегемато силином и эозином.росматривали срезы в универсальном ми рос опе LEICA DM 4000 BLED, фотографировали видео амеророме стандартносветовоLEICA DFC 7000 T ( исуно 2.9).ми рос опии срезы изучали на фазово-онтрастно ми рос опии, ми рос опии темного поля и поляриза ионноми рос опии.52Рисунок 2.9.и рос оп LEICA DM 4000 B LED, с видео амеро LEICA DFC 7000а же были приготовлены маз и из исследуеможировот ани.сследуемы материал распределяли тон им слоем по все повер ностиорошо обезжиренного предметного сте ла и фи сировали в 90 градусномспирте, на протяжении 30-60 се унд, с последующим высушиванием навозду е, в течение 20 мин.риготовленныамоновс ому- имза.53мазоо рашивался поЛАВА 3.ЕТОДИКА АУТОТРАНСПЛАНТАЦИИ ЖИРОВОО О А3.1.ЕННОТКАНИПРЕПАРАТА И АОТТехнология получения препаратов аутоплазмыобогащенной тромбоцитамидобровольныобразом в асептичес ило теводоноров заборусловиярови проводили следующимпро едурного абинета набирали извены 9 мл рови в стерильные ва уумные пробир и объемом9 мл, содержащие по 0,5 мл Na3C6H5O7 ( итрата натрия) 3,8% ( исуно3.1).Рисунок 3.1.
Забор рови в стерильные ва уумные пробир и 9 мл c 0,5 мл Na3C6H5O7( итрата натрия) 3,8%дальне шем пробир и с у азанным биологичес им материаломподвергалиентрифугедву ратномуентрифугированию(налабораторно-20, Andreas Hettich GmbH & Co, ермания – рисуно3.2).54Рисунок 3.2. ентрифуга-20, Andreas Hettich GmbH & Co, ерманияа первом этапе пробир иентрифугировали со с оростью 2500оборотов в минуту в течение 5 минут, в результате чего проис одилоразделение рови на три слоя вер ни- бедная тромбо итами плазма,нижни – эритро иты и средни сло , («buffy coat»), содержащи основноеоличество тромбо итов и лео иты (рисуно 3.3).Рисунок 3.3. ри слоя после первого этапа ентрифугирования55ля получения Чпроизводили забор вер него слоя (рисуно 3.4),Рисунок 3.4.
риготовление Ч. Забор вер него слоя после 1 этапа ентрифугирования.а в случае приготовленияЛ – вер него и среднего слоя (рисуно3.5), в стерильные ва уумные пробир и объемом 6 мл для второго этапаентрифугирования при с орости 4000 оборотов в течение 3 минут.Рисунок 3.5. риготовлениеентрифугирования.Л. Забор вер него и среднего слоя после 1 этапаосле второго ентрифугирования из стерильны пробиро удаляливер нислобеднотромбо итами плазмы до нижнего слоя плазмы(рисуно 3.6-а, 3.7-а) объем оторого составил 1,0 мл (рисуно 3.6-б, 3.7-б).56абРисунок 3.6. риготовление препаратов Ч. а - забор вер него слоя, после 2 этапаентрифугирования, б - 1 мл готового препарата.абРисунок 3.7. риготовление препаратовЛ. а - забор вер него слоя, после 2этапа ентрифугирования, б -1 мл готового препарата.аза лючительномэтапепроизводилиаутоплазмы, обогащенно тромбо итами (Чаль иялорида в соотношении 1 10.а тива июипрепаратовЛ), 10 % растворомолученные препаратынабирали в одноразовые шпри ы, объемом 2,5 или 5 мл для последующегоприменения в аутотранспланта ии жирово т ани.573.2.Техника аутотрансплантации жировой тканипера ии проводили в условияпа иентообщеанестезии.оложениена опера ионном столе – лежа на спине или на животе, взависимости от выбора донорс и зон.осле стандартнообработ и опера ионного поля растворамиантисепти ов производили про олы ожи и под ожно-жировопо предварительноинфильтра ионныразмет е в донорс олетчат изоне, через оторые вводилираствор (NaCl 0,9 % + раствор адреналина 0,1 %).ведение раствора выполняли вручную с помощью тупоанюли снес оль ими отверстиями Colemana (Byron, USA), присоединеннуюшпри у объемом 20, 50 мл ( исуно 3.8).Рисунок 3.8.
нфильтра ия жирово т ани в донорс о областиосле э спози ии в течение 10 мин выполняли забор жирово т анииз донорс иобласте , применяя аспира ионную шпри евую те ни улипосаля забора жировоии.т ани использовали тупуюColemana (Byron, USA), с от рытым на онечни ом, диаметром отанюлю2,4 –2,7 мм и длино 15 и 23 см или анюлю типа Mrcedes (Byron Medical inc.Arizona, USA) диаметром 2 мм, присоединеннуюLuer-Lockобъемом 10 мл ( исуно583.9).шпри у с на онечни омосле завершения этапаэ страии жирово т ани на ладывали узловые швы на про олы ожи вдонорс о области, используя не рассасывающи ся шовны материал.Рисунок 3.9.
Забор жирово т ани из донорс о областидальне шем, для эффе тивно отчист и жирово т ани, шпри ы сжиром помещали вентрифугу иентрифугировали со с оростью 1300об/мин в течение 1,5 мин ( ентрифуга «Hettich. EVA 20») ( исуно 3.10).Рисунок 3.10. Шпри ы объемом 10 мл с жирово т анью перед этапом ентрифугирования59следствиеентрифугирования, в шпри е образуется три слоявер ни сло - с наименьше плотностью, состоит из вне леточного масла,средни сло - из непосредственно очищенно жирово т ани и нижнисло представляет соборовь и различные водные элементы ( исуно3.11).Рисунок 3.11. ри слоя жирово т ани после ентрифугирования.ер ни и нижни сло удаляются.результате, в шпри е остаетсяусловно чистая жировая т ань, готовая для аутотранспланта иире ипиентную область ( исуно 3.12).Рисунок 3.12.
Чистая жировая т ань после удаления вер него и нижнего слоя.60вз шпри ев, объемом 10 мл, жировую т ань переносили в шпри ы,объемом 1 – 5 мл, для дальне шего введения в ре ипиентно области.основно группе Бполученно жирово т ани добавлялиЛвобъеме от 4 до 30 мл, в зависимости от ло ализа ии ре ипиентно области( исуно 3.13.), в то время а в онтрольно группе– пересаживаличистую жировую т ань.Рисунок 3.13. обавлениеЛ чисто жирово т ани в основно группе Бутотранспланта ию жирово т ани выполняли по те ни е Coleman(ретроградноми рогранулами)ре ипиентно области.поразличножирово3.14.).размет евля введения жирово т ани использовали тупуюанюлю Colemana (Byron, USA)присоединеннуюпредварительнос одним дистальным отверстием,шпри у с на онечни ом Luer-Lock объемом 1 – 5 млдлины и диаметром 1,6 - 2 мм.о всет ани ограничивалось под ожно-жировослучаялетчат овведение( исуноосле завершения этапа аутотранспланта ии на про олы ожи длясведенияраев раны в донорс ообласти на ладывали фи сирующипластырь Steri-Strip.61Рисунок 3.14.ли а.утотранспланта ия жирово т ани, обогащенноЛ в областипослеопера ионном периоде всем па иент ам ре омендовали носитьомпрессионное белье для предотвращения оте ов в донорс о области иназначали урс профила тичес о антибиоти отерапии в течении 3-5 дне .62ЛАВА 4.ИССЛЕДОВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ АУТОПЛАО О АЕННОТРООЦИТА Иданно главе приведены результаты проведенного исследованияоличественного состава тромбо итов и фа торов роста (VEGF, FGF,PDGF-AA, PDGF-BB), в различны препарата аутоплазмы, обогащеннотромбо итами, а та же результаты исследования влияния риообработ и нафа торы роста в препарата4.1.в различные сро и.Результаты исследования тромбоцитов в препаратах аутоплазмыобогащенной тромбоцитамирезультате проведенного анализарови, были определеныследующие по азатели он ентра ии тромбо итов- в ельно- в беднорови в среднем 238 (183-254) × 103/м л;тромбо итами аутоплазме (Б), после 1-го этапаентрифугирования - 500 (400-584) × /103 м л;- в чисто аутоплазме, обогащенно тромбо итами (Ч) - 1138(690-1422) × 103/м л;- в аутоплазме, обогащенно тромбо итами и лео итами (Л) -1900 (1418-2842) × 103/м л.
(рисуно 4.1а)он ентра ия тромбо итов, во всестатистичес и различалась при p < 0,05.исследованныЛ отмечено увеличениеоличества тромбо итов в 1,7 раза больше чем в Ч, что, в своюочередь, является статистичес и значимым (p < 0,05) (рисуно4.1).63группа ,4.1б, табл.Рисунок 4.1а. он ентра ия тромбо итов в неа тивированноТаблица 4.1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
