Автореферат (1139871), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Распределение наблюдений в зависимости от вида аутотрансплантации жировой ткани иих первичного или повторного выполнения.10Перед операцией все пациентки проходили предоперационное обследование с цельюподтверждения диагноза, определения показаний для выполнения аутотрансплантациижировой ткани, определения хирургической тактики, выявления противопоказаний коперации.Неотъемлемымпунктомпредоперационногоосмотрапациентокявляетсяфотографирование.
Снимки делали в пяти стандартных проекциях: правый и левыйпрофиль, анфас, правый и левый полупрофиль. Всем пациенткам проводился полныйспектр лабораторных и инструментальных исследований.Ультразвуковое исследование мягких тканейДля оценки эффективности аутотрансплантации жировой ткани в контрольной«А» и основной «Б» группах, выполняли ультразвуковое исследование мягких тканей вобласти контурной деформации различной локализации. Контрольные сроки: дооперации; 2 недели после операции; 1 / 3 / 6 и 12 месяцев после операции.Ультразвуковые исследования были выполнены на кафедре функциональной иультразвуковой диагностики в ФГБУ Российском научном центре хирургии им.
акад.Б.В.Петровского РАМН линейными датчиками c частотой сканирования 12-13 МГц вВ-режиме и режиме цветового допплеровского картирования (ЦДК) на аппарате «GE(США) Voluson E8 Expert».Гистологическое исследование мягких тканейДляоценкиэффективностиаутотрансплантациижировойткани,попредварительному согласию, пациенткам из контрольной и основной групп былавыполнена инцизионная биопсия жировых аутотрансплантатов в контрольные срокиисследования.Первым этапом диагностический забор жировых аутотрнасплантатов проводилипод местной анестезией методом хирургического иссечения участка жировой тканидиаметром 1 см в донорской области до операции.
Вторым этапом инцизионная биопсиявыполнялась в послеоперационные контрольные срокииз реципиентной областиаутотрансплантации жировой ткани.Полученные фрагменты жировой ткани фиксировали в 10 % формалине в течение 4суток, затем заливали парафином. Парафиновые срезы толщиной 4-5 мк окрашивалигематоксилином и эозином. Просматривали срезы в универсальном микроскопе LEICADM 4000 B LED, фотографировали видеокамерой LEICA DFC 7000 T. Кроме стандартной11световой микроскопии срезы изучали с помощью фазово-контрастной микроскопии,микроскопии темного поля и поляризационной микроскопии.Также были приготовлены мазки из исследуемой жировой ткани.
Исследуемыйматериал распределяли тонким слоем по всей поверхности хорошо обезжиренногопредметного стекла и фиксировали в 90 градусном спирте, на протяжении 30-60 секунд споследующим высушиванием на воздухе, в течение 20 мин. Приготовленный мазококрашивали по Рамоновскому-Гимза.МЕТОДИКА АУТОТРАНСПЛАНТАЦИИ ЖИРОВОЙ ТКАНИ С ДОБАВЛЕНИЕМ ПРЕПАРАТОВАУТОПЛАЗМЫ, ОБОГАЩЕННОЙ ТРОМБОЦИТАМИТехнология получения препаратов аутоплазмы, обогащенной тромбоцитамиУдобровольныхдоноровзаборкровипроводилиследующимобразом:в асептических условиях процедурного кабинета набирали из локтевой вены 9 млкрови в стерильные вакуумные пробирки объемом 9 мл, содержащие по 0,5 млNa3C6H5O7 (цитрата натрия) 3,8%.
В дальнейшем пробирки с указанным биологическимматериалом подвергали двукратному центрифугированию (лабораторная центрифугаЕВА-20, Andreas Hettich GmbH & Co, Германия) по протоколу получения препаратовЧАОТ и АОТЛ. На заключительном этапе производили активацию АОТ (ЧАОТ и АОТЛ)10 % раствором кальция хлорида в соотношении 1:10. Полученные препараты АОТприменяли при аутотрансплантации жировой ткани.Техника аутотрансплантации жировой тканиОперацию проводили в условиях общей анестезии.
После стандартной обработкиоперационного поля производили инфильтрацию в донорской области раствором (NaCl0,9 % + раствор адреналина 0,1 %) .После экспозиции в течение 10 мин выполняли забор жировой ткани из донорскихобластей, применяя аспирационную шприцевую технику липосакции. В дальнейшем дляэффективной отчистки жировой ткани, шприцы с жиромпомещали в центрифугу ицентрифугировали со скоростью 1300 об/мин в течение 1,5 мин (Центрифуга «Hettich.EVA 20»).В основной группе Б к полученной жировой ткани добавляли АОТЛ в объеме от 4 до30 мл, в зависимости от локализации реципиентной области, в то время как в контрольнойгруппе А – пересаживали чистую жировую ткань.12Аутотрансплантацию жировой ткани выполняли по технике Coleman (ретроградномикрогранулами) по предварительной разметке в реципиентной области.
Во всех случаяхвведение жировой ткани ограничивалось подкожно-жировой клетчаткой.ИССЛЕДОВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ АУТОПЛАЗМЫ, ОБОГАЩЕННОЙ ТРОМБОЦИТАМИВданномразделеприведенырезультатыпроведенногоисследованияколичественного состава тромбоцитов и факторов роста (VEGF, FGF, PDGF-AA,PDGF-BB), в различных препаратах аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, а такжерезультаты исследования влияния криообработки на факторы роста в препаратах АОТ вразличные сроки.Результаты исследования тромбоцитов в препаратах аутоплазмы, обогащеннойтромбоцитамиВ результате проведенного анализа крови, были определены следующиепоказателиконцентрациитромбоцитов:вцельнойкровивсреднем3238 (183-254) × 10 /мкл; в бедной тромбоцитами аутоплазме (БТА), после 1-го этапацентрифугирования - 500 (400-584) × /103 мкл; в чистой аутоплазме, обогащеннойтромбоцитами (ЧАОТ) - 1138 (690-1422) × 103/мкл; в аутоплазме, обогащеннойтромбоцитами и лейкоцитами (АОТЛ) - 1900 (1418-2842) × 103/мкл.
(Рис.5).3500300025002000150010005000цельн.кровьБТАнеактЧАОТнеактАОТЛРисунок 5. Концентрация тромбоцитов в периферической крови, БТА, неактивированнойЧАОТ и неактивированной АОТЛ.Концентрация тромбоцитов во всех исследованных группах, статистическиразличалась при p < 0,05. В АОТЛ отмечено увеличение количества тромбоцитов в 1,713раза больше, чем в ЧАОТ, что, в свою очередь, является статистически значимым (p <0,05).Результаты исследования факторов роста в препаратах аутоплазмы, обогащеннойтромбоцитамиПоказатели фактора роста FGFПо результатам исследования концентрация FGF в среднем составила: внеактивированной ЧАОТ - 47,4 пг/мл; в неактивированной АОТЛ - 52,9 пг/мл. Такиерезультаты, в данном случае, указывают на отсутствие значимых статистическихразличий между ними (p > 0,05).
Концентрация FGF в активированной АОТЛ в среднемсоставила 88,8 пг/мл, что в 1,6 раз выше, чем в активированной ЧАОТ - 57,2 пг/мл и этоявляется статистически значимым различием (p < 0,05).Показатели фактора роста VEGFИтоговые данные концентрации VEGF в неактивированной АОТЛ в среднемсоставили 18 пг/мл, что в 1,9 раз выше, чем в неактивированной ЧАОТ - 9,3 пг/мл, но этиполученные данные статистически незначимы (p > 0,05). Показатели концентрации VEGFв активированной АОТЛ в среднем составили 17,9 пг/мл, что в 1,5 раз выше, чем вактивированной ЧАОТ - 11,8 пг/мл, однако эти данные также статистически незначимы (p> 0,05).Показатели фактора роста PDGF-AAКонцентрация PDGF-AA в неактивированной АОТЛ в среднем составила 1089,9г/мл, что в 1,8 раз выше, чем в неактивированной ЧАОТ статистическизначимымразличием(p<0,05).614,7 пг/мл и являетсяКонцентрацияжеPDGF-AAвактивированной АОТЛ в среднем составила 1134,3 пг/мл, что в 1,5 раз выше, чем вактивированной ЧАОТ - 742,5 пг/мл и также является статистически значимым различием(p<0,05).Показатели фактора роста PDGF-BBВыявленная концентрация PDGF-BB в неактивированной АОТЛ в среднемсоставила 3493,2 пг/мл, что в 2,9 раз выше, чем в неактивированной ЧАОТ - 1651,7 пг/мл.Полученныйпоказательявляетсястатистическизначимымразличием(p<0,05).Концентрация PDGF-BB в активированной АОТЛ в среднем составила 4029,1 пг/мл, что в1,8 раз выше, чем в активированной ЧАОТ - 2262,1 пг/мл и является статистическизначимым различием (p<0,05).14Результаты исследования влияния криообработки на факторы роста в препаратахчистой аутоплазмы, обогащенной тромбоцитамиПоказатели фактора роста FGFПо результатам исследования, концентрация FGFв неактивированной ЧАОТ,статистически достоверно возрастает (p<0,05) через 2 недели и через 2 месяцауменьшается до исходного уровня.
В активированной плазме концентрация FGFстатистически значимо уменьшается (p<0,05) со второй недели до второго месяцазаморозки.Показатели фактора роста PDGF-AAПо результатам исследования, концентрация PDGF-AA в неактивированной ЧАОТстаистически достоверно (p<0,05) резко увеличивается через 2 нед и через 2 мес остаетсяна том же уровне. Концентрация PDGF-AA в активированной ЧАОТстатистическизначимо не меняется (p>0,05), хотя недостоверно возрастает ко 2 месяцу после заморозки.Показатели фактора роста PDGF-BBПо результатам исследования, концентрация PDGF-BB в неактивированной ЧАОТ,статистически достоверно (p<0,05) резко увеличивается на 2 нед. после заморозки и через2 мес. остается на том же уровне.
Концентрация PDGF-BB в активированной плазмедостоверно не изменяется (p>0,05).Показатели фактора роста VEGFПо результатам исследования, концентрация VEGF в неактивированной плазмедостоверно возрастает (p<0,05) через две недели и остается на том же уровне.Концентрация VEGF в активированной плазме статистически возрастает (p>0,05) совторой недели до второго месяца после заморозки.Результаты исследования влияния криообработки на факторы роста в препаратахаутоплазмы, обогащенной тромбоцитами и лейкоцитамиПоказатели фактора роста FGFПо результатам исследования, концентрация FGF в неактивированной АОТЛдостоверно возрастает (p<0,05) через 2 недели и через 2 месяца остается на том же уровне.Концентрация FGF в активированной плазме достоверно не изменяется (p>0,05).Показатели фактора роста PDGF-AAПо результатам исследования, концентрация PDGF-AA в неактивированной АОТЛдостоверно возрастает (p<0,05) через 2 недели и через 2 месяца остается на том же уровне.Концентрация PDGF-AA в активированной плазме также статистически значимовозрастает (p<0,05) через 2 недели и через 2 месяца остается на том же уровне.15Показатели фактора роста PDGF-BBПо результатам исследования, концентрация PDGF-BB в неактивированной АОТЛстатистически достоверно возрастает (p<0,05) через 2 недели и на сроке 2 месяца послезаморозки уменьшается, но остается выше исходного уровня.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
