Автореферат (1139779), страница 2
Текст из файла (страница 2)
В.А. Рахманова лечебногофакультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России20 октября 2015 года.Личный вклад автораЛичноавторомосуществлентщательныйанализотечественнойизарубежной литературы по проблеме онихомикозов. Проведен набор 80пациентов с диагнозом онихомикоз стоп и их глубокое клинико-анамнестическоеобследование. Автор лично контролировал и участвовал в проведениилабораторных и экспериментальных исследований пациентов с онихомикозомстоп. Автором была создана база данных, содержащая информацию о 80пациентах, произведена статистическая обработка данных, интерпретация иизложение полученных результатов, формулировка выводов и практическихрекомендаций.
Опубликованные научные статьи и основные результатыисследования,представленныенанаучно-практическихконференциях,подтверждают личный вклад автора в научно-исследовательскую работу.Внедрение в практику результатов исследованияПолученные результаты исследования лазерной терапии онихомикозов стопс применением Q - Switched 1064/532 нм и Nd:YAG 1064 нм используются влечебной деятельности клиники кожных и венерических болезней им.
В. А.Рахманова УКБ № 2 ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова МинздраваРоссии, а также используются в учебном процессе кафедры кожных ивенерических болезней им. В.А. Рахманова лечебного факультета ГБОУ ВПОПервый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России.8ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, из них 3 в изданиях,утверждённых перечнем ВАК РФ.Объём и структура работыДиссертация изложена на 141 страницах компьютерного текста, состоит извведения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований,результатов собственных исследований, заключения, выводов, практическихрекомендаций и библиографического указателя, содержащего 240 источников, изних 118 отечественных и 122 зарубежных. Работа иллюстрирована 1 схемой, 25рисунками, 32 таблицами и 9 фотографиями.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиДиссертация соответствует шифру научной специальности: 14.01.10 –кожные и венерические болезни.
Кожные и венерические болезни – областьмедицинской науки, изучающая кожный покров, его придатки, видимыеслизистые оболочки в норме и патологии. Основное внимание уделяетсяэпидемиологии, этиологии, патогенезу, диагностике, лечению, профилактикеболезней и инфекций, передаваемых половым путем. Диссертация соответствуетформуле специальности и области исследований согласно пункту 4.СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериалы и методы исследованияВ нашем исследовании участвовало 80 пациентов с подтвержденнымдиагнозом онихомикоз стоп на базе клиники кожных и венерических болезней им.В. А. Рахманова ГБОУ ВПО Первый МГМУ им.
И.М. Сеченова МинздраваРоссии в период с 2012 по 2015 гг.Для контроля над исследованием был разработан протокол наблюдениябольных.Методыобследованиявключали:клиническоеобследование;дерматологический статус с оценкой состояния ногтевых пластин стоп;определение клинического индекса оценки тяжести онихомикозов Сергеева(КИОТОС); оценка дерматологического индекса качества жизни (ДИКЖ);лабораторное обследование – микроскопическое исследование, культуральный9методимолекулярно-биологическийлабораторных условиях был проведенметодДНК-диагностики(ПЦР).эксперимент in vitro – поВпрямомувоздействию лазеров на колонии грибов при посеве на среду Сабуро в чашкахПетри.В связи с поставленными задачами нами было проведено открытоеконтролируемое исследование. Все больные находились в возрасте от 20 до 80лет, были разделены на две группы по 40 пациентов: основную и контрольную.Основная группа больных онихомикозом стоп получала новый метод лечения –лазерную терапию с применением Q -Switched 1064/532 нм и Nd:YAG 1064 нм.Контрольная группа больных получала системную противогрибковую терапию.Местная терапия была одинакова в обеих группах.Клиническое обследование пациентов начиналось с подробного сборажалоб и анамнеза больных.
Из анамнеза устанавливались сопутствующиезаболевания, длительность заболевания, возможные пути заражения. При осмотребольных оценивалась толщина, цвет, прочность, целостность ногтевой пластины,глубина поражения ногтя, локализация процесса, степень гиперкератоза,определялся КИОТОС. По клинической картине онихомикоз стоп у пациентовоценивался с помощью зарубежной (N. Zaias) и отечественной классификации.Больным была проведена оценка дерматологического индекса качества жизни(ДИКЖ) с помощью анкеты-опросника собственной модификации.
Пациентыобеих групп отвечали на вопросы анкеты до лечения, через 6, 9, 12 месяцев отначала лечения. Были проведены лабораторные методы: микроскопический,культуральный и ПЦР - диагностика.Сбор материалаПередвзятиемобрабатывалась70%патологическогомедицинскимматериаласпиртом.Приповерхностьногтяповерхностнойформеонихомикоза выполняли соскобы скальпелем с поверхности ногтя в пораженнойобластидослоевнепораженныхгрибами.Придистально-латеральнойподногтевой форме онихомикоза материал брали скальпелем и кусачками,который включал срез ногтевой пластины и соскоб с ногтевого ложа из-под10пластины. При проксимальной подногтевой форме забор патологическогоматериала брали с помощью стоматологической кюретки и скальпеля.
Собранныйматериал помещался в закрытые пробирки, с датой сбора материала, фамилией иинициалами пациента. Далее пробирки отправлялись в лабораторию.Микроскопический и культуральный методы диагностикиВзятый материал от больного направлялся на культуральное исследованиедля идентификации грибов-возбудителей до рода и вида. Вначале проводилосьмикроскопическое исследование материала. Образцы помещали на стекло вкаплю 20% щелочи (КОН), закрывали покровным стеклом и проводилиисследование после экспозиции. Далее производился посев исследуемогоматериала на питательную среду Сабуро с добавлением хлориндремикса. Втермостате проводилась инкубация при 27°С.
Рост колоний грибов дерматофитовопределялся на 7 – 14 день, а дрожжеподобных грибов рода Candida и плесневыхгрибов на 2 – 4 день культивирования. При появлении колоний грибовпроизводился их подсчет и замер. Культуры просматривались под микроскопом вдистиллированной воде, в смеси спирта с глицерином. По характеру роста и видуколоний, а также при микроскопии определялся тип грибов.Молекулярно-биологический метод ДНК диагностикиВыявление ДНК из патологического материала для полимеразной цепнойреакции (ПЦР) проводили на «Реамикс» с инкубацией в течение 2 часов притемпературе 37°С в лизирующем растворе. Амплификация с праймерамипроводилась на наборе «ТрифАм», где одна пара праймеров специфична дляфрагмента генома гриба T.rubrum размером 925 пар нуклеотидов, а вторая пара –для фрагмента генома гриба T.mentagrophytes var.
interdigitale, 392 парнуклеотидов. Процесс амплификации состоял из повторяющихся цикловтемпературнойденатурациикомплементарнымиДНКгрибовпоследовательностямиииотжигапраймеровпоследующейсдостройкойполинуклеотидных цепей с этих праймеров ДНК – полимеразы. Детекция ПЦРпроводилась в агарозном геле методом электрофореза.
Окрашенную ДНКэтидиум бромидом в геле просматривали под ультрафиолетовым светом. О11результатах ПЦР судили по наличию в образцах специфических фрагментовразмером 925 и 392 пары нуклеотидов. Чувствительность анализа составляет неболее 1000 копий/мл генома гриба T.rubrum и не более 1000 копий/мл грибаT.mentagrophytes var. interdigitale.В основную группу больныхвходило 40 пациентов (17 мужчин, 23женщины), которые получали лазерную терапию на мультитехнологическойплатформе системы Harmony XL компании Alma Lasers (Израиль, США), спомощью лазерных насадок или модулей Q - Switched 1064/532 нм и Nd:YAG1064 нм. Сначала сухие, чистые (без лака) ногтевые пластины обрабатывалисьсалфетками, пропитанными 70% медицинским спиртом.
Перед процедурой напациента и врача одевались специальные защитные очки. Процедура начиналась сподключения модуля Q - Switched 1064/532 нм с плотностью энергии – 900мДж/см², диаметром рабочего пятна – 3 мм, длительностью импульса – 20наносекунд, с частотой – 2 Гц. Затем подключался модуль с Nd:YAG 1064 нм сплотностью энергии 200 мДж/см², диаметром рабочего пятна – 1 ммдлительностью импульса менее 10 миллисекунд, с частотой – 20 Гц. Пораженнаяногтевая пластина обрабатывалась в виде спирали двумя видами лазеров, по всейплощади ногтя, от 2 до 5 проходов, с перерывами в 30 – 60 секунд. Всем больнымпроводилась лазерная терапия по нашей методике – 1 процедура каждые 2 недели,в течение 6 месяцев.
Местно пациенты на ногтевые пластины наносили лакциклопирокс 8% (Батрафен) 2 раза в неделю в течение 6 месяцев. Дляпрофилактики микоза стоп на кожу наносился крем эконазола нитрат 1%(Экодакс) 1 раз в день в течение 2 недель.В контрольную группу больных входило 40 пациентов (21 мужчин, 19женщин). Все больные этой группы получали пероральный итраконазол(Орунгал) по методу пульс-терапии по 400 мг в сутки, то есть 200 мг 2 раза в деньв течение недели, перерыв в лечении 21 день – курс лечения 3 месяца.Местно применяли лак циклопирокс 8% (Батрафен) 2 раза в неделю втечение 6 месяцев на ногтевые пластины стоп.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
