Захарова Н.Г. Полифункциональные биосовместимые материалы на основе магнетита и пектина (1006298), страница 20

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 20)

Динамику опухолевого роста (на7 и 14 сутки от начала лечения) отслеживали периодически, измеряя размерыопухоли штангенциркулем в трех взаимно перпендикулярных направлениях, ивычисляли объем опухолевых узлов в см3.Торможение роста опухоли (Ki) оценивали по формуле:Ki Vконтроль  VопытVконтроль 100%(4.8)где Vконтроль – среднее значение объема опухоли в группе контрольныхживотных (см3), Vопыт – среднее значение объема опухоли в группе опытныхживотных (см3).Увеличение продолжительности жизни ∆τ рассчитывали по формуле:  контроль   опыт 100% контроль(4.9)где τконтроль – средняя продолжительность жизни в контрольной группе (дни),τопыт – средняя продолжительность жизни в опытной группе (дни).140Таблица 4.7. Терапия Уокера W256 пектином в дозе 45 мг/кгДень измеренияГруппа7-ой день14-ый деньКонтрольная группа1,5 ± 0,65,7 ± 1,1Опытная группа0,9 ± 0,53,4 ± 1,3Ki, %4040,4> 0,05> 0,05pВ связи с низкой противоопухолевой активностью пектина (Таблица 4.7) вследующих сериях экспериментов разовая доза вводимого препаратаувеличена до 1/10 от LD100, т.е.

400 мг/кг в соответствии с существующимирекомендациями по скринингу противоопухолевых препаратов.4.3.5. Терапия лимфосаркомы Плисса пектином в дозе 400 мг/кг Контрольная группа состояла из 8 животных, опытная – из 6. Опухольтрансплантировали в область бедра задней лапы. Препарат вводили зондомper os 1 раз в сутки в дозе 400 мг/кг в течение 10 дней. На 7 и 14 дниэксперимента произведены замеры опухоли (Таблица 4.8). Фиксироваласьпродолжительность жизни каждого животного (Таблица 4.9).Таблица 4.8.

Размеры опухоли через 7 и 14 дней№КонтрольРазмеры(l×m×h)1234567832х22х1830х24х1832х24х1820х24х1620х25х1535х25х2520х20х1822х24х1612345643х34х3031х32х2536x36x2647x36x3737x49x4043x42x32ОпытV№Размеры (l×m×h)Размеры опухоли через 7 дней6336120х23х156480218х18х156912320х20х173840418х18х163750520х21х1510938622х20х1636004224Размеры опухоли через 14 дней21930137×35×3012400212×39×3016848342×35×3031302432x38x2836260539x40x39288966V345024303400259231503520194257020220501702430420141Таблица 4.9.

Противоопухолевая активность пектина по отношению климфосаркоме ПлиссаКонтрольнаяsxsxх  sx  , см3х  sx  , см3группа7 день14 день5,76 ± 0,822,3424,60 ± 3,408,32Опытная группа3,09 ± 0,170,4219,19 ± 3,397,58Ki, %p46,322,0Проверка нулевой гипотезыкритериемВилкоксонаМанна-Уитни показала, чторазница между результатамиопыта и контроля оказаласьстатистически достоверна (p<0,01).Разница между результатами опытаи контроля статистически недостоверна(p>0,05,критерийВилкоксонаМаннаПродолжительность жизни животных при тестировании препарата пектина налимфосаркоме Плисса показана на диаграмме (рис. 4.11).Рисунок 4.11.

Диаграмма продолжительности жизни животных притестировании препарата пектина на лимфосаркоме ПлиссаПродолжительность жизни х  sx  составила в контрольной группе –17,0 ± 1,01 дня при sx = 2,87; в опытной – 21,3 ± 1,10 дня при sx = 2,69.Увеличениепродолжительностижизнисоставляло20,2%.Разницапродолжительности жизни между контролем и опытом статистическидостоверна (р < 0,01, критерий Вилкоксона-Манна-Уитни).1424.3.6. Терапия Уокера W256 и лимфосаркомы Плисса композитамиРезультаты экспериментов по терапии W256 и Плисса представлены втаблицах 4.10-4.12 и на рисунке 4.12.Таблица 4.10. Размеры опухоли при терапии Уокера W256 композитами№Контрольs, ммV, см31234567824х30х2128х29х2242х42х4727х30х2318х15х1528х28х3029х22х1526х26х201234540х43х3047х42х3836х35х3256х35х3344х36х457,568,9341,459,322,0311,764,796,7627,7437,5120,1632,3435,64Pec22х16х1612х18х127х7х712х12х817х16х1616х12х12Fe3O4-PecV, см3s, ммV, см3через 7 дней2,82001,29000,1716х15х111,320,5822х20х183,962,1810х10х60,301,1615х17х131,6645х35х3040х45х3052х45х45через 14 дней23,63 35х30х3027,00 20х25х1552,65 24х22х15s, мм15,753,753,96Fe3O4-PecCas, ммV, см325х30х2022х21х1516х15х1016х19х1014х9х1212х18х1432х34х3835х35х3546х30х3530х31х27* s, мм - размеры опухоли (l×m×h, мм)Таблица 4.11.

Параметры противоопухолевого действия препаратовОбразецКонтрольная группаPecFe3O4/PecFe3O4/PecCaКонтрольная группаPecFe3O4/PecFe3O4/PecCaРазмер опухоли, см37-й день14-й деньW25611,6 ± 4,131,0 ± 2,81,3 ± 4,120,7 ± 8,81,6 ± 0,54,7 ± 2,22,4 ± 0,719,2 ± 2,4Pliss2,11 ± 0,5123,37 ± 2,380,63± 0,1416,71 ± 0,20,57± 0,2113,18 ±2,530,36 ±0,197,48 ± 0,177-й деньKi, %14-й день88,291,079,532,784,736,869,772,082,928,543,667,95,753,471,21,520,761,5120,6721,4424,1512,56143Рисунок 4.12. Диаграмма продолжительности жизни животных притестировании препарата пектина на лимфосаркоме ПлиссаТаблица 4.12. Продолжительность жизни животныхОбразец∆τ*, %sxх  sx  , дниКарциносаркома W256Контрольная группа16,38± 1,38Pec25,5 ± 6,3Fe3O4/Pec25,8 ± 6,25Fe3O4/PecCa23,5 ± 6,3Лимфосаркома ПлиссаКонтрольная группа17,0 ± 0,58Pec20,5 ± 0,92Fe3O4/Pec20,3 ± 0,76Fe3O4/PecCa22,5 ± 1,263,9015,415,315,454,357,543,520,619,5932,4Как видно из представленных данных в таблицах 4.11 и 4.12, у крыс,получавших Pec, Fe3O4-Pec10 и Fe3O4-PecCa0,15, отмечено статистическидостоверное торможение роста опухоли на 7 сутки с начала лечения, но на 5сутки после окончания «лечения» статистически достоверная разницасохранилась только у крыс, получавших Pec и Fe3O4-Pec10.

Торможение ростаопухоли, которое развилось в процессе лечения, в итоге проявилось в видестатистическидостоверногоувеличенияпродолжительностиживотных, получавших пектин, Fe3O4-Pec10 и Fe3O4-PecCa0,15.жизни1444.3.7. Терапия карциносаркомы Уокера W256 пектином ициклофосфаномОсновная часть работ по изучению противоопухолевого действияпектинов содержит сведения о влиянии пектинов на рост основногоопухолевого узла, реже – метастазов и почти не изучается возможностьувеличения эффективности цитостатической терапии, хотя для этих целейприменениемодификаторовбиологическогодействиясчитаетсяцелесообразным.

С целью установления эффекта модификации пектиномконвенциальной химиотерапии были проведены следующие исследования.Эксперименты проводили согласно существующим рекомендациям[211].Содержаниеэкспериментальныхживотныхосуществлялосьвстандартных условиях вивария. Исследования проводились по правилам,принятым 18 марта 1986 в Страсбурге на Европейской Конвенции о защитепозвоночных животных, используемых для экспериментов и в иных научныхцелях. Опыты проведены на 250 крысах линии Вистар обоего пола массой160-200 г, прошедших карантин в течение 14 суток. Крысы содержались наобычном рационе при свободном доступе к воде и пище, в условияхнормального температурного и светового режимов.

В качестве критериевморфологической оценки терапевтических эффектов выбраны апоптозопухолевыхклетокСтатистическаяиобработкаихлекарственныйрезультатовпатоморфозпроведена[212,213].непараметрическимиметодами [210].Перевиваемая опухоль Уокера трансплантировалась под кожу бедра вобъеме 0,2 мл и разведении 1:1 средой 199. Лечение начинали через 72 часапосле перевивки. Разведенный водой пектин вводили зондом per os 1 раз всутки в дозе 60 мг/кг в течение 10 дней. На 7 и 14 дни от начала леченияштангенциркулем производили замеры трех перпендикулярных размеровопухоли. Результат (объем в см3) выражался в произведении этих величин,145деленноенадва.Такжеучитывалипродолжительностьжизниэкспериментальных животных.На 7-е сутки эксперимента объем опухоли в контроле составлял 3,03 ±0,7 см3, а в опытной группе 1,11 ± 0,2 см3.

На 14-е сутки этот показатель вконтрольной группе составлял 10,93 ± 2,8 см3, в опытной 4,14 ± 2,0 см3.Разница в объемах достигала статистически значимого уровня: на 7-е сутки p< 0,01, на 14-е сутки p < 0,05 (Критерий Вилкоксона- Манна-Уитни).Незначительное увеличение темпов роста опухоли в опытной группе противконтрольной отразилось на таком показателе, как торможение ее роста.

Еслина 7-сутки он составлял 77,4, то на 14-е сутки снизился до 62,1 %.Таким образом, терапия пектином перевиваемой опухоли Уокера внескольких сериях экспериментов стабильно вызывала торможение ее ростаот 60 до 80 %. Как правило, большие величины этого показателя былихарактерны для начального этапа эксперимента, затем по мере увеличениясроков этот показатель уменьшился. Хотя основная масса животных,получавших пектин, погибла от прогрессирования заболевания, у 27,8 ± 8,9 %опухоль регрессировала.

Это отразилось на средней продолжительностижизни, которая была в контрольной группе 19,3 ± 1,9, а в опытной 38,56 ± 5,3суток. Увеличение продолжительности жизни составляло 99,8 % (р < 0,01,критерий Вилкоксона–Манна-Уитни), соответственно. Несмотря на то, чтопродолжительность жизни животных опытной группы была существенновыше, чем в контроле, экспериментальная картина, как зеркало, отражалареальное положение дел в практической онкологии. У части больныхпротивоопухолевая терапия оказывает должный эффект в виде регрессииопухоли, однако у значительной части она вызывает лишь частичный,временный эффект.Одновременно с оценкой действия исследуемого препарата на развитиепервичногоопухолевогоузлапроводилиизучениееговлияниянаэффективность цитостатической химиотерапии.

Цитостатики вводили врежиме, вызывающем умеренное торможение опухолевого процесса (30–60 %146торможения роста первичной опухоли и метастазов). В качестве основногохимиотерапевтическогосредстваиспользовалиоднократноевнутрибрюшинное введение циклофосфана в дозе 25 мг/кг, на 5 сутки послеперевивки. Пектин вводился зондом через желудок, со 2-ых по 13-ые суткипослетрансплантацииопухоли.Вкаждойсерииэкспериментовизподопытных животных формировали следующие группы: контрольная,получающая соответствующие растворители (воду); группа, получавшаятолько цитостатик, группа, получавшая цитостатик в сочетании с пектином.Данные эксперимента представлены на рисунке 4.13.Рисунок 4.13. Кинетика роста опухоли Уокера W256: 1 – контроль,2 – циклофосфан, 3 – пектин + циклофосфанВ период с 10-го по 12-ый дни разница между размерами опухоли вгруппах животных, получавших пектин с циклофосфаном и циклофосфанбыла минимальной.

На 10-й день в группе «пектин+ циклофосфан» размерыопухоли составляли 0,53 ± 0,19 см3, а в группе «циклофосфан» - 1,75 ± 0,56см3. На 14-й день соответственно 0,59 ± 0,27 см3 и 1,88 ± 0,73 см3. Однако этаразница достигала статистически значимой величины р < 0,05 (критерийВилкоксона–Манна-Уитни).Продолжительность жизни в контрольной группе составляла 17,4 ± 1,99дней, в группе «циклофосфан» - 30 ± 0,97 дней. Торможение роста опухоли147составило 72,4 % (р < 0,01).

Характеристики

Список файлов диссертации