Автореферат (Роль нарушения оксидативного статуса у больных системной красной волчанкой в развитии факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний)

На правах рукописиСМИРНОВАЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНАРоль нарушения оксидативного статуса у больных системнойкрасной волчанкой в развитии факторов риска сердечно-сосудистыхзаболеваний14.01.04 – внутренние болезниАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква – 2018Работа выполнена на кафедре внутренних болезней Факультета фундаментальной медициныФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова».Научный руководитель:доктор медицинских наук, профессор,академик РАНМухин Николай АлексеевичОфициальные оппоненты:Профессор кафедры клинической фармакологии и терапииФГБОУ ДПО «Российская медицинская академиянепрерывного профессионального образования»Министерства здравоохранения Российской Федерации,доктор медицинских наук, профессорВедущий научный сотрудникФГБНУ «Научно-исследовательский институтревматологии имени В.А.

Насоновой»Российской академии медицинских наук,доктор медицинских наукГиляревский Сергей РуджеровичБекетова Татьяна ВалентиновнаВедущая организация: ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательскиймедицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения РоссийскойФедерации.Защита состоится «» _____________ ____ года в _________ часов на заседаниидиссертационного совета Д 212.203.18 при ФГАОУ ВО «Российский университет дружбынародов» (117292, г.

Москва, ул. Вавилова, д.61; ГБУЗ ГКБ имени В.В. Виноградова ДЗМ).С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбынародов (117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.6).Автореферат разослан «__» ___________ 2018 года.Учёный секретарь диссертационного совета,доктор медицинских наук, профессорКиякбаев Гайрат Калуевич3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность работыВведение в терапевтическую практику современных иммуносупрессивных средствзначительно изменило течение системной красной волчанки (СКВ), поэтому в настоящее времяважную роль среди причин смертности при СКВ играют отдаленные осложнения, связанные сранним развитием атеросклероза.

В исследовании (Manzi S. и соавт., 1997) было обнаружено,что частота инфаркта миокарда среди больных СКВ женского пола в возрасте от 35 до 44 летболее чем в пятьдесят раз выше, чем в популяции женщин аналогичного возраста; по данныммета-анализа десяти популяционных исследований частота ОНМК у больных СКВ в 2,53 разапревышала таковую в общей популяции (Holmqvist M. и соавт., 2015); также у больных СКВбыли отмечены более частые субклинические проявления атеросклероза (толщина комплексаинтима-медиа и количество атеросклеротических бляшек в сонных артериях) (Chuang Y.W.

исоавт., 2015, Wu G.C. и соавт., 2016), при этом наличие традиционных факторов риска неспособно в полной мере объяснить подобное явление. Среди возможных причин ускоренногоразвития атеросклероза обсуждают персистирующее воспаление и нарушение оксидативногостатуса, приводящие к дисфункции и повреждению эндотелия.Нейтрофилы являются одним из основных источников активных форм кислорода (АФК)и, соответственно, оксидативного стресса, в организме человека.

На мышиных моделяхатеросклероза ApoE-/-/LDLR-/-, нокаутных по генам аполипопротена Е и рецептора ЛПНП,было обнаружено, что ингибирование ферментов, обеспечивающих образование АФК в ходереспираторного взрыва: НАДФН-оксидазы и миелопероксидазы (МПО)– подавляетпрогрессирование атеросклероза (Liu C. и соавт., 2012, Kinkade K. и соавт., 2013). Висследовании (Vuilleumier N. и соавт., 2013) уровень МПО сыворотки крови был значимымпредикторомтяжелыхсердечно-сосудистыхосложнений.Посовременнымданным,нейтрофилы участвуют в патогенезе СКВ, а также играют важную роль в развитииатеросклероза благодаря способности образовывать нейтрофильные внеклеточные ловушки(НВЛ) в ходе нетоза, одного из механизмов клеточной смерти, характерного для нейтрофилов.Megens R.T.

и соавт. было показано, что нестабильность атеросклеротических бляшеккоррелирует с уровнем нетоза нейтрофилов, инфильтрирующих бляшки. Knight J.S. и соавт. намышиныхмоделяхатеросклерозаApoe−/−,нокаутныхпогенуаполипопротеинаЕ,продемонстрировали, что подавление образования нейтрофильных внеклеточных ловушек(НВЛ) уменьшает атеросклеротическое поражение сосудов. Белки S100A8, A9, A8/9 и A12(выделяемые активированными нейтрофилами, и связанные с воспалением и атеросклерозом),повышение уровня которых является прогностическими факторами развития ССЗ в общей4популяции.

предложены в качестве возможных биомаркеров раннего атеросклероза при СКВ,тем не менее, этот факт требует дальнейшего подтверждения.Негативное действие оксидативного стресса при СКВ связывают с образованиемокисленных форм белков и ДНК, повреждением липидных мембран (Shah D. и соавт., 2013). Висследовании (Lopez L.R. и соавт., 2005) было продемонстрировано, что повышенный уровеньокисленных липопротеинов низкой плотности является фактором риска развития сердечнососудистых заболеваний у больных СКВ. Также существуют данные о влиянии оксидативногостресса на индукцию апоптоза и нетоза при СКВ, образование аутоантигенов и повреждениетканей (Kurien B.T.

и соавт., 2008, Kumagai S. и соавт., 2003).О нарушениях оксидативного статуса при СКВ в литературе имеются отрывочныесведения, а комплексное изучение не проводилось. Наличие ассоциаций оксидативныхнарушений при СКВ с нарушением липидного обмена и частоты развития сердечно сосудистыхосложнений не исследовалось. Учитывая сложный патогенез заболевания целесообразноизучение выраженности нарушения оксидативного статуса, в том числе как риска раннегоразвития атеросклероза.Цель исследованияИзучить особенности оксидативного статуса у больных СКВ и оценить их взаимосвязь сриском развития сердечно-сосудистых осложнений.Задачи исследования1. Определить показатели функциональной активности нейтрофилов как источниковактивных форм кислорода и уточнить выраженность оксидативного стресса по долеокисленного альбумина в группе больных СКВ и группе здоровых доноров.2. Оценить антиоксидантную активность плазмы крови в группе больных СКВ издоровых доноров; в группах больных СКВ, получавших и не получавших лечениецитостатиками.3.

Изучить взаимосвязь выраженности иммуновоспалительной реакции и висцеритов снарушением оксидативного статуса в группах больных активным волчаночнымнефритом (ВН), неактивным ВН и больных без поражения почек; у больных СКВ сразличной выраженностью активности заболевания, оцененной с помощью индексаSLEDAI; с различной выраженностью повреждения органов, оцененного с помощьюиндекса SDI; в группах больных СКВ, получавших активную иммуносупрессивнуютерапию, и больных, получавших поддерживающее лечение.4.

Сравнить хемилюминесцентный ответ нейтрофилов на воздействие цитокинов: ИЛ-1β5и ГКС-Ф в группе больных СКВ и группе здоровых доноров.5. Выявить частоту сердечно-сосудистых заболеваний и развития гиперлипидемии вгруппе больных СКВ.6. Изучить взаимосвязь нарушения оксидативного статуса у больных СКВ с рискомразвития сердечно-сосудистых осложнений и гиперлипидемией.Научная новизнаВпервые была изучена функциональная активность нейтрофилов больных СКВ,связанная с образованием свободных радикалов с применением хемилюминесцентных методикс двухстадийной стимуляцией и регистрацией кинетической кривой хемилюминесценции.Показано, что нейтрофилы больных СКВ находятся в активированном и праймированномсостоянии по сравнению с нейтрофилами здоровых доноров, активированное и праймированноесостояние нейтрофилов при СКВ индуцированы провоспалительными цитокинами, вчастности, интерлейкином-1β (ИЛ-1β).Впервые показано, что показатели функциональной активности нейтрофилов: удельнаяинтегральная и пиковая активности нейтрофила коррелируют с уровнем общего холестеринасыворотки,аудельнаяинтегральнаяактивностьнейтрофилаявляетсяпредикторомгиперлипидемии.Впервые показано, что при СКВ не происходит значительной окислительноймодификации альбумина, что свидетельствует о сохранности третичной структуры белка.Показано, что концентрация ЦИК при СКВ опосредовано может быть оценена с помощьюизмерения триптофановой флуоресценции.Комбинациятерапиицитостатическимипрепаратамиприводиткповышениюантиоксидантной активности плазмы.Практическая значимостьПолученные данные расширяют представления о роли оксидативного стресса при СКВ имогут служить основой для дальнейшего изучения вклада нарушения оксидативного статуса впатогенез самого заболевания и развитие сердечно-сосудистых осложнений.Предложены новые методы оценки оксидативного стресса в крови больных СКВ:определение антиоксидантной активности плазмы и функциональной активности нейтрофиловс помощью кинетической люминол-активированной хемилюминесценции с двухстадийнойстимуляцией, определение содержания окислительной модификации альбумина с помощьюспектрофлуориметрии.Данные методики могут быть использованы в дальнейших исследованиях клинического6значения нарушения оксидативного статуса в развитие сердечно-сосудистых осложнений убольных СКВ.Применениеудельнойинтегральнойактивностинейтрофила,отражающейегофункциональную активность, имеет клиническое значение для прогнозирования раннегоразвития атеросклероза, и, следовательно, для своевременной компенсации гиперлипидемии ипредупреждения возникновения сердечно-сосудистых осложнений.Повышение антиоксидантной активности плазмы крови при назначении цитостатиковсвидетельствует об их протективном эффекте в отношении развития гиперлипидемии и,следовательно, сердечно-сосудистых осложнений.Основные положения, выносимые на защиту1.

У больных СКВ, по сравнению со здоровыми донорами, отмечается активациянейтрофильного звена оксидативного стресса.2. При СКВ не нарушается транспортная функция альбумина поскольку не отмеченасистемная окислительная модификация его молекулы.3. Антиоксидантная активность плазмы крови больных СКВ повышена, при этом еёуровень коррелирует с лечением цитостатическими препаратами.

Комбинированнаятерапияцитостатикамиикортикостероидами,посравнениюсмонотерапиейкортикостероидами, повышает антиоксидантную активность плазмы крови, что являетсяаргументом в пользу самостоятельного влияния цитостатиков на антиоксидантныесвойства плазмы крови.4. Показатели оксидативного статуса отражают выраженность воспалительных реакций:коэффициент затухания респираторного взрыва нейтрофилов коррелирует с уровнемСОЭ, удельная спонтанная активность нейтрофила снижается по мере возрастанияактивности процесса у больных с поражением почек.5. ИЛ-1β определяет активированное и праймированное состояние нейтрофилов приСКВ.6.