Диссертация (Влияние сплавов титана на состояние полости рта у пациентов с различными ортопедическими конструкциями), страница 10

Лабораторные методы исследованияЛабораторные методы исследования, использованные в работе,представлены в таблице 4.58Таблица 4- Лабораторные методы и объем исследования№ п/п Методы исследованияКол-вообследованных1.Микробиологические исследования852.Потенциалометрия853.Исследование зубодесневой жидкости854.PH-метрия слюны855.Растровая электронная микроскопия и энерго- 60дисперсионная спектрометрия.2.2.2.1. Микробиологические исследованияПри обследовании пациентов проводился анализ материала намикробную флору: соскобов со слизистой оболочки полости рта, слюны исодержимого зубодесневых карманов. Полученный от пациентов материал втечение одного часа доставлялся в лабораторию. Посев материала напитательную среду с дальнейшей идентификацией полученных колониймикроорганизмов и подсчетом их числа.

Принцип метода заключался вследующем: биоматериал без предварительной обработки засевали напитательную среду и инкубировали при 37°С в течение 7 дней, после чегоподсчитываличислоколониеобразующихединиц(КОЕ).Особенноуделялось внимание при проведении бактериологических исследованияхтаким бактериям, как Leptothrix buccalis, их инкубировали на питательнойсреде в течении 14 дней, с целью дифференциальной диагностики. Именноэти бактерии, проявляют такую симптоматику в полости рта, как жжение,сухость во рту, першение в горле, сухость красной каймы губ. Так же,59внимание обращали на характер микрофлоры с целью идентификации спор имицелия дрожжеподобных грибов при культивировании их на питательнойсреде агар Сабуро.Окончательная идентификация микроорганизмов и анализ полученныхданных проводился с помощью микробиологического анализатора «WalkAway 96 Plus» (Siemens, Германия), (рис.11).Рисунок 11-Фото.

Анализатор «mini API»2.2.2.2. Метод измерения разности потенциалов в полости ртаДля проведения потенциалометрии был разработан прибор дляизмерения электрохимических потенциалов в полости рта (патент наполезную модель № 173379 рис.12, 13).Устройство содержит вольтметр, диапазон измерения напряжениякоторого составляет от 30 мкВ до 100 В, к нему с помощью кабеля Signalподключены измерительные металлические электроды на + и (щуп зажимпрямой и щуп крючкообразный Oral). При этом кабель, соединяющиймилливольтметр разделен на две части, свободные концы которых соединенымежду собой через дополнительный переходник, содержащий штепсель игнездо, имеющие возможность соединения друг с другом. Сами электродыимеют удобную форму в виде щупа зажима и щупа крючкообразного, чтонаиболее удобно для работы в полости рта как пациенту, так и врачу.

Так жеесть возможность применения щупов в разных парах: для нестандартныхситуаций использования в паре щуп зажим и щуп зажим, другой вариант60щуп крючкообразный и щуп крючкообразный, что повышает вариабельностьиспользования у разных пациентов. Электроды могут отсоединяться отосновного кабеля, что дает возможность проводить их стерилизацию послекаждогопациентаэлектрохимическихипозволяетпотенциаловбыстропровестиортопедическихизмерениеконструкцийидиагностировать заболевания полости рта.Устройство работает следующим образом. Перед началом работыобязательно проверяем целостность рабочей цепи аппарата, замкнувактивный и пассивный электроды между собой, на экране дисплея стрелкабудет активна. В полость рта вводим два электрода: металлический щупзажимдля осуществления контакта с металлическими включениями;крючкообразный щуп для осуществления контакта со слизистой оболочкойили с другими металлическими включениями.На шкале прибораотображаются значения электрохимических потенциалов ортопедическихконструкцийполостиртаотносительноэлектрода,измеряемыевмилливольтах.Рисунок12- Схема.

Устройство для измеренияпотенциалов в полости рта, общий вид.электрохимических611-вольтметр2- кабель3- щуп крючкообразный4 –щуп зажим5-переходникиРисунок 12-Фото. ПотенциалометрС помощью аппарата можно проводить диагностику гальванизма ипрогнозировать эффективность лечения пациентов с ортопедическимиконструкциями в комплексе с другими методами диагностики, выявлятьриски рецидива после протезирования.2.2.2.3. Исследование зубодесневой жидкостиВ нашем исследовании изучение свойств зубодесневой жидкостипроводилось как элемент мониторинга пародонтологического статусапациента.62Зубодесневую жидкость для исследования получали с помощью«внутрижелобкового» метода Brill и Krasse (1958) с использованиемфильтрованной бумаги.

Перед введением полосок фильтровальной бумагидесну и зубы осторожно протирали ватными тампонами для удалениязубного налета и слюны из устья десневой щели, тщательно изолировали отслюны ватными тампонами. Стандартные полоски фильтровальной бумагиразмером 4х15мм вводили в десневую щель заостренным концом ипродвигалина1ммпонаправлениюкэпителиюзубодесневогоприкрепления. Длительность забора жидкости составляла около 5 мин.Каждую полоску фильтровальной бумаги взвешивали на электронныхдемпферных весах до и после взятия зубодесневой жидкости. Количествополученной жидкости определялось по разнице массы образца до и послевысушивания в термостате при температуре 85ºС до постоянной массы.2.2.2.4.

Определение рН ротовой жидкостиДля определения pH ротовой жидкости использовали портативный pHметр АТС производитель HANNA INSTRUMENTS c диапазоном измерения0,0 - 14,0 pH, погрешность измерения составила ± 0.01 pH (рис.14). Приборсам корректирует показания в зависимости от температуры жидкости вдиапазоне от 0 до 50 °C, поэтому не потребовалось производить замер при25°C и пересчитывать. Для этого смешанную (не стимулированную) слюнусобирали натощак утром (до проведения местных фармакотерапевтическихмероприятий) в количестве 20 мл в пробирку.63Рисунок 14- Фото.

Электронный рН-метр «ATC»2.2.3. Методы исследования сплавов титана2.2.2.5. Применение растровой электронной микроскопии иэнергодисперсионной спектрометрии сплавов ортопедическихконструкций.Исследования проводились с использованием методов растровойэлектронной микроскопии и энергодисперсионной спектрометрии.Вкачествеинструментаизмеренийиспользовалсярастровыйэлектронный микроскоп JSM6480LVфирмы JEOL(Япония) с приставкой дляэнерго дисперсионной спектрометрии INCAENERGY Dry Cool фирмыOXFORD INSTRUMENTS (Великобритания) (рис.15).

Так же, былирассмотренымикроструктурыортопедических конструкций,поверхностейстарыхнетитановыхи сделанных нами из сплавов титана.Поскольку применяемый для исследованияприборJSM-6480LV фирмыJEOL с приставкой для энерго-дисперсионной спектрометрии INCAENERGY Dry Cool фирмы OXFORD INSTRUMENTS имеет ряд преимуществсреди растровых электронных микроскопов, благодаря которым возможно64наиболееинформативнопроводитьизмерения,какмикроструктурыповерхности исследуемых образцов, так и определение элементного составас проведением количественного анализа.

Большая аналитическая камера ссистемой видеонаблюдения позволяет исследовать образцы с габаритнымиразмерами до 150мм (не требуется предварительно готовить образцы –резать, скалывать), а также быстро и точно выбирать область анализа взаданнойточкеобразца.Самиортопедическиеконструкции,безпредварительных распилов были помещены в камеру.Рисунок 15-Фото. Растровый электронный микроскоп JSM6480LV сприставкой для энергодисперсионной спектрометрии.Данный прибор имеет ряд преимуществ, среди растровых электронныхмикроскопов,благодарякоторымвозможнонаиболееинформативнопроводить измерения, как микроструктуры поверхности исследуемыхобразцов,такиопределениеэлементногосоставаспроведением65количественного анализа. Большая аналитическая камера с системойвидеонаблюдения позволяет исследовать образцы с габаритными размерамидо 150мм (не требуется предварительно готовить образцы – резать, скалыватьи т.п.), а также быстро и точно выбирать область анализа в заданной точкеобразца.

Разрешение растрового электронного микроскопа составляет 3 нм (врежиме низкого вакуума – 5нм), что позволяет достаточно информативноисследовать микроструктуру рельефа поверхности образцов (в частности,пористость). Режим низкого вакуума, реализованный в данном приборе,позволяет нейтрализовать зарядовые состояния на поверхности образца,возникающие вследствие взаимодействия пучка первичных электронов споверхностью, что особенно актуально при исследованиях диэлектриков иполупроводников.Разрешение энергодисперсионного спектрометра INCAENERGY DryCool составляет 133эВ, что позволяет проводить измерения элементногосостава без наложения пиков характеристического рентгеновского спектра.Возможность проведения измерений элементного состава при ускоряющемнапряжениипотокапервичныхэлектронов,равном20кВ,создаетблагоприятные условия для достаточного возбуждения рентгеновскогоизлучения уровней атомов элементов от В до U без искажений спектрахарактеристического рентгеновского излучения, что особенно важно припроведенииколичественногоанализа.Пределобнаруженияметодаэнергодисперсионной спектрометрии составляет 0,2 весовых процентов.Относительная погрешность измерений равна 10% для основных элементов.Спектрометр позволяет также проводить измерения элементного состава сполучением распределения элементов вдоль линии и по заданной площади,что особенно важно для определения толщины и состава эпитаксиальныхслоев.