Диссертация (Изучение высвобождения лекарственных веществ в биорелевантных средах), страница 9

Последовательный отбор пробпроводили через 10,15, 20, 30, 45 и 60 мин по 5 мл, причем такой же объемсоответствующего буферного раствора добавляли в среду растворения длясохранения объема. Полученные пробы фильтровали через бумажныйфильтр «синяя лента». Для получения статистически достоверных результатов исследование проводили 6 раз для каждого препарата.3.3.2.

Количественное определениеКоличественный анализ проводили методом ВЭЖХ на жидкостномхроматорафе Waters Alliance 2695 с диодно-матричным детектором 2998.Условия хроматографирования: хроматографическая колонка LiChrospher100 RP-18, 5 мкм, 250 x 4,6 мм; комнатная температура; подвижная фаза:0,075 M раствор KH2PO4, значение pH доводят до 3,0 ортофосфорной кислотой (85%) – ацетонитрил (1:1); скорость потока – 1,2 мл/мин; детектированиепри 214 нм; время анализа 8,5 мин. Время удерживания урсодезоксихолиевойкислоты по данной методике составляло около 7 мин.

Параллельно анализировали стандартные растворы урсодезоксихолиевой кислоты с концентрацией 0,5 мг/мл в соответствующей среде.623.4. Оценка полноты высвобождения действующего вещества в фармакопейных и биорелевантных средах.Согласно проекту ОФС 42-0135-09 «Растворения для твердых дозированных лекарственных форм» Государственной фармакопеи РФ XII изд., количество лекарственного вещества, высвободившегося в среду растворения,имеющую температуру (37 ± 0,5) °С, в течение 45 минут при указанной скорости вращения лопастной мешалки, должно составлять не менее 75 % от заявленного содержания.Для принятия решения о рациональности использования биорелевантных сред как сред растворения в исследованиях кинетики растворения препаратов II класс БКС было рассмотрено высвобождение препаратов в фармакопейной среде, высвобождение препаратов в доступных биорелевантныхсредах, а так же произведен расчет факторов сходимости и факторов различия для каждого препарата между выбранными средами.3.4.1.

Оценка полноты высвобождения действующего вещества препаратов нифедипина в фармакопейных и биорелевантных средах.Все препараты нифедипина показывали низкий уровень высвобождениядействующего вещества в фармакопейной среде 0,1 М HCl pH 1,2. Такой женизкий уровень растворения был характерен и для среды blank FaSSIF pH 6,5,который, по сути, представляет собой аналог фосфатного буферного раствора. В то же время, использование биорелевантных сред приводило к увеличению уровня высвобождения нифедипина из лекарственных форм, причемнаиболее близкий профиль растворения к биорелевантной среде FaSSIF pH6,5 был отмечен для 0,1% SLS pH 6,5.63Таблица 15Процент высвобождения действующего вещества из изучаемых ЛС нифедипина для временной точки 45 минПрепаратВысвобождение нифедипина, %0,1 М HClblank FaSSIFFaSSIFSLS 0,05%SLS 0,1%Коринфар22,9120,6933,9228,3338,63Кордафлекс32,5932,4957,6350,1267,64Кордипин42,0010,9541,074,2915,543.4.2.

Сравнительная кинетика растворения препаратов нифедипинаПолученные в результате статистической обработки значения величиныстандартного отклонения, начиная с временной точки 15 минут, ни в одномиз случаев не превышали 20% для всех последующих временных точек.64Таблица 16Кордафлекс 10 мг, 0.1 M HCl pH 1,2% высвобождения субстанции№010152030451019,6221,4529,2829,2030,822019,3521,9828,4928,9133,473019,0621,1829,8126,7826,314019,1222,2430,0831,8234,805018,8222,3828,2234,4832,156019,3521,3229,0232,0931,887019,0922,5129,5526,5035,068018,5621,7130,3426,5234,539019,6222,1129,0229,7032,4110018,5621,7127,6931,8335,3311018,8221,0527,9632,3536,1212019,0920,9228,7526,5228,17Xсред019,0921,7129,0229,7232,59σ200,130,290,707,688,94Σ01,413,177,7484,4498,38Ст.

откл.00,360,540,842,772,99RSD, %01,872,472,899,329,18Норма RSDне более 10не более 2065Таблица 17Кордафлекс 10 мг, blank FaSSIF pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451020,0023,3126,8632,5432,622020,1023,7327,1132,9931,793020,2623,2327,3935,1929,974020,6323,4727,6434,3129,145020,3723,1327,6534,3934,216020,1023,5728,4330,3433,387020,4723,0527,6529,8932,628019,8323,3428,3033,7831,799020,5323,8727,6529,8932,8810019,8323,7128,1735,6431,7911019,7323,3127,5727,2335,2712019,8323,7327,6427,6834,44Xсред020,1423,4527,6731,9932,49σ200,090,070,218,373,14Σ01,040,792,3092,0234,58Ст.

откл.00,310,270,462,891,77RSD, %01,531,141,659,045,46Норма RSDне более 10не более 2066Таблица 18Кордафлекс 10 мг, FaSSIF pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451031,2335,1641,8446,8856,012030,6339,2345,5446,3560,413028,5838,1842,8949,5358,664027,9837,1138,6549,0063,075030,7037,6539,1846,0853,366030,1036,5842,3645,5557,637031,7638,1838,9247,6856,818031,1635,7842,8947,1457,509031,2337,3943,4246,3557,6010030,6336,3139,7245,8258,2911033,8835,0036,5344,2357,0712033,2933,9240,2443,6955,11Xсред030,9336,7141,0146,5257,63σ202,762,396,502,916,09Σ030,3226,3171,4731,9967,04Ст. откл.01,661,552,551,712,47RSD, %05,374,216,213,674,28Норма RSDне более 10не более 2067Таблица 19Кордафлекс 10 мг, SLS 0.05% pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451040,5242,7243,4944,3849,872038,4240,6241,3942,2747,933036,3238,5239,2940,1748,354044,7346,9347,7048,5854,075042,6344,8345,6046,4851,976041,1543,1443,0744,8050,297041,5843,5644,7545,2250,718042,0043,9844,1245,6451,309040,3142,5143,2846,0651,5510040,1042,0942,2342,2747,3411040,7342,9343,7043,9548,1412040,9443,1443,9144,1749,87Xсред040,7942,9143,5544,5050,12σ204,324,264,384,913,86Σ047,5046,9148,2153,9942,50Ст.

откл.02,082,072,092,221,97RSD, %05,104,814,814,983,92Норма RSDне более 10не более 2068Таблица 20Кордафлекс 10 мг, SLS 0.1 pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451046,2454,2962,9765,2667,092048,5856,6365,3167,5969,423050,9158,9669,9869,9371,754049,2854,9963,6865,9670,125043,9151,9660,6462,9264,756045,0853,1362,2764,5666,397046,2454,2962,9765,2667,098046,0154,0662,7465,0366,859045,7853,8362,5164,7966,6210046,2454,2962,9765,2667,0911046,4854,5363,2165,4967,3212046,3454,3963,0765,3567,20Xсред046,7654,6163,5365,6267,64σ203,683,065,242,953,55Σ040,4533,6757,6132,4839,06Ст. откл.01,921,752,291,721,88RSD, %04,103,203,602,622,79Норма RSDне более 10не более 2069Таблица 21Коринфар 10 мг, 0.1 M HCl pH 1,2% высвобождения субстанции№010152030451015,7316,2019,5221,2822,842016,0016,4719,7921,5423,113016,2616,7320,0521,8123,374015,8616,3419,6521,4122,975015,4715,9419,2621,0122,576015,7916,2619,5721,3322,897015,7116,1819,4921,2522,818015,7616,2319,5521,3022,879015,8116,2819,6021,3622,9210015,7516,3119,5321,2922,8511015,7316,2019,5021,2722,8412015,7516,2319,5421,3022,86Xсред015,8016,2819,5921,3522,91σ200,040,040,040,040,04Σ00,390,390,400,390,39Ст.

откл.00,190,190,190,190,19RSD, %01,201,160,970,890,83Норма RSDне более 10не более 2070Таблица 22Коринфар 10 мг, blank FaSSIF pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451012,4613,1515,7017,5820,23209,2810,8116,0617,0520,483012,7213,4115,9617,8520,504010,3411,8717,1218,1121,545012,1912,8815,4317,3219,976010,8712,4017,6518,6422,077012,4613,1515,7017,5820,238011,1412,1317,3918,3721,819012,4613,1515,7017,5820,2310011,4012,1317,3918,3721,8111012,4613,1515,7017,5820,2312011,6712,1317,3918,3719,15Xсред011,6212,5316,4317,8720,69σ201,120,570,750,250,81Σ012,296,308,202,728,94Ст.

откл.01,060,760,860,500,90RSD, %09,096,045,252,784,36Норма RSDне более 10не более 2071Таблица 23Коринфар 10 мг, FaSSIF pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451016,1222,6726,1529,5733,372016,3823,4324,7931,3633,063014,6123,1625,1929,5734,504016,6523,2026,4131,6233,905016,9123,4625,3230,3633,606014,8823,6925,4631,0934,767015,1423,2026,6830,1034,168015,8522,9024,2530,8232,539015,4123,4625,9931,1635,2910015,9424,4927,4732,4234,6911015,5922,1323,9929,0432,2712015,0123,5625,5931,4934,89Xсред015,7123,2825,6130,7233,92σ200,530,331,011,000,94Σ05,853,6511,1311,0310,32Ст.

откл.00,730,581,011,000,97RSD, %04,642,483,933,262,86Норма RSDне более 10не более 2072Таблица 24Коринфар 10 мг, SLS 0.05% pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451011,0817,8622,3826,7128,332010,8717,6522,1726,5028,123011,2918,0722,5926,9228,544011,5018,2822,8027,1328,755011,0817,8622,3826,7128,336011,1817,8622,3828,8130,437011,2217,9924,4926,7128,338011,1417,8626,5929,0230,649011,2017,8622,3826,7128,3310011,4318,4924,9129,4429,8011011,6915,7620,2824,6026,2312010,6517,4421,9626,2827,91Xсред011,1917,7522,9427,1328,65σ200,080,472,691,821,42Σ00,835,1329,5719,9915,61Ст. откл.00,270,681,641,351,19RSD, %02,453,857,154,974,16Норма RSDне более 10не более 2073Таблица 25Коринфар 10 мг, SLS 0.1% pH 6,5% высвобождения субстанции№010152030451020,1628,3830,4837,0438,632019,9328,1430,2536,8138,403020,4028,6130,7137,2738,864020,6328,8430,9537,5139,105020,5128,7330,8337,3439,686020,7526,0432,8139,3740,977020,2829,5431,6538,2139,338020,1628,3830,4837,0438,639020,5129,0831,1837,7439,3310020,3329,3131,4137,9739,5711020,3029,6431,5337,3438,9812021,1028,7031,2737,1138,75Xсред020,4228,6131,1337,5639,19σ200,090,880,480,490,47Σ01,049,635,295,415,18Ст.

откл.00,310,940,690,700,69RSD, %01,513,272,231,871,75Норма RSDне более 10не более 2074100% высвободившегося ЛВ908070Коринфар6050Кордафлекс403020100051015202530354045время (мин)Рисунок 6. Усредненные профили высвобождения (n=12) действующего вещества из препаратов нифедипина, 0.1 М HCl рН 1,2Среда растворения:Значение факторасходимости f20.1 М HCl рН 1,2Нормы55,62от 50 до 100Согласно требованиям Методических Указаний МинздравсоцразвитияРоссии «Оценка биоэквивалентности лекарственных средств», приложение 4,2008 г, руководства по экспертизе лекарственных средств, том 1, 2013 г, итом 3, 2014 г, профили растворения считаются эквивалентными, если факторсходимости f2 принимает значения от 50 до 100.