Автореферат (Иммуногенетические маркеры прогнозирования эффективности программ экстракорпорального оплодотворения у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием)

На правах рукописиЛАПШТАЕВА АННА ВАСИЛЬЕВНАИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ПРОГНОЗИРОВАНИЯЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОГРАММ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГООПЛОДОТВОРЕНИЯ У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМБЕСПЛОДИЕМ14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергологияАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква - 2019Работа выполнена в федеральном государственном автономном образовательномучреждении высшего образования «Первый Московский государственныймедицинский университет имени И.М.

Сеченова» Министерства здравоохраненияРоссийской Федерации (Сеченовский Университет)Научные руководители:доктор медицинских наук, доцентЕвсегнеева Ирина Валентиновнадоктор биологических наук, профессорНовиков Виктор ВладимировичОфициальные оппоненты:Колесникова Наталья Владиславовна  доктор биологических наук, профессорФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» МинздраваРоссии, кафедра клинической иммунологии, аллергологии и лабораторнойдиагностики ФПК и ППС, профессор кафедры;Лавров Вячеслав Федорович  доктор медицинских наук, профессор, ФГБНУ«Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.

Мечникова».лабораториея диагностики вирусных инфекций, заведующий лабораториейВедущаяорганизация:ФГБОУВО«Российскийнациональныйисследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова» МинздраваРоссииЗащита диссертации состоится « »______________2019 г. в ___ на заседанииДиссертационного Совета Д.208.040.08 ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу: 119992, г.Москва, ул. Трубецкая, д.8, строение 2.С диссертацией можно ознакомиться в ЦНМБ ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М.

Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу: 119034,г. Москва, Зубовский бульвар, д.37/1 и на сайте организации: www.sechenov.ruАвтореферат разослан «_____»________20__г.Ученый секретарь диссертационного советадоктор медицинских наук, профессорКалюжин Олег Витальевич2ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность научного исследованияБесплодный брак – одна из наиболее значимых медико-социальных,социальных и экономических проблем современности. По данным ВОЗ, вэкономически развитых странах мира за последние 20–30 лет регистрируетсяувеличение доли бесплодных супружеских пар до 2530 % (Бюллетень ВОЗ,2010; Попович Л.

и др., 2011; Harlow D., Сampbell M.R., 2014). В РоссийскойФедерации бесплодием страдают 78 млн женщин детородного возраста,состоящих в браке, что существенно снижает репродуктивный потенциал нации(Абашидзе А.А., Аракелян В.Ф., 2016). Низкая эффективность методоввосстановления естественной фертильности женщин стимулировала развитиеметодов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). В настоящее времядля многих супружеских пар, ранее обреченных на бездетность, методы ВРТ единственноерешениепроблемыбесплодия,чтоподтверждаетсярегистрируемым ежегодным ростом их использования во всем мире.

Одним изнаиболее популярных и достаточно эффективных методов лечения бесплодияявляется экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) (Русанова Н.Е., 2013).Однако,оцениваятерапевтическуюэффективностьЭКО,приходитсяконстатировать, что более половины начатых циклов все еще являютсянерезультативными: лишь в 31,5 % случаев цикл ЭКО приводит к наступлениюбеременности, а в 22,8 % завершается родами (Корсак В. С., Смирнова А. А.,Шурыгина О. В., 2016).Учитывая высокую стоимость и относительно низкую эффективностьпроцедуры ЭКО, в последние годы уделяется все большее внимание уделяетсяпоиску новых современных прогностических критериев, использование которыхна преконцептивном этапе позволит прогнозировать исход процедуры с цельюрешения проблемы неэффективного лечения бесплодия.

Выявление молекулярногенетических маркеров, указывающих как на благоприятный исход ЭКО, так и наего неудачу, несомненно, повысит результативность использования данного3метода,оптимизируетпроцесслечениябесплодияи,вероятно,снизитэкономическую нагрузку на систему здравоохранения в целом.Механизм наступления беременности во многом обусловлен согласованнымвзаимодействием двух факторов  функционально полноценного эмбриона ирецептивного эндометрия, что является определяющим в создании оптимальныхусловий для имплантации.

Реализация этого процесса осуществляется за счетгенетических и молекулярных преобразований, регулируемых экспрессией рядаиммунныхфакторов, в том числе интерлейкинов, факторов роста, молекуладгезии, хемокинов, простагландинов и их рецепторов. Все это, в итогеопределяет эффективность процессов дифференцировки, адгезии и инвазиитрофобласта.Степень разработанности темыНесмотря на достаточное количество работ по изучению цитокиновойрегуляции плацентации, родовой деятельности и некоторых осложненийбеременности (Кадырова Л.

В., 2014; Крылова Ю. С., 2015; Сеидова Л. А., 2010;Мотовилова Н. О., 2010; Сельков С. А., 2010; Соколов Д. И., 2012; Сотникова Н.Ю., 2014), данные о роли иммуногенетических факторов в наступлении ЭКОиндуцированной беременности единичные, а их результаты часто противоречатдруг другу (Мотовилова Н.О. и др., 2012; N.-Z. Ma и др., 2017). Это можнообъяснитькакособенностямидизайнаисследований,такиполифункциональностью изучаемых показателей. В связи с этим не достигнутоединойточкизренияоценностивыявленияцитокинов,являющихсяоптимальными маркерами прогнозирования исхода процедуры ЭКО. В данномнаправлении поиски активно продолжаются. Следует также отметить, что,вероятнее всего, использование какого-то одного маркера для прогнозированияэффективности процедуры ЭКО недостаточно как ввиду сложного механизмаимплантации эмбриона, так и индивидуальных особенностей гомеостаза,участвующих в программе ЭКО пациенток.

Таким образом, исследования поизучению иммуногенетических факторов и связанных с ними молекулярныхмеханизмов регуляции являются весьма актуальными.4Цель исследованияОпределить роль цитокинов и их генов в качестве предикторов наступлениябеременности в программах ЭКОу женщинструбно-перитонеальнымбесплодием с целью разработки персонифицированного подхода к лечению и дляповышения эффективности процедуры.Задачи исследования1.Сравнить содержание IL-1α, IL-1β, IL-1Rа, M-CSF в сыворотке кровипациенток с различными исходами процедуры ЭКО.2.Выявить концентрации IL-1α, IL-1β, IL-1Rа, M-CSF в сывороткекрови женщин, ассоциируемые с благоприятным исходом программы ЭКО.3.Изучить распределение частот генотипов полиморфных маркеровrs1800587 (C/T) гена IL-1α, rs2234663 (2/4) гена IL-1Rа, rs386693509 (CA/TC) иrs3216780 (del/G) гена CSF1R у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием,участвующих в программе ЭКО.4.Выявить ассоциацию полиморфных вариантов генов IL-1α, IL-1Rа иCSF1R с эффективностью процедуры ЭКО.5.Провести анализ содержания IL-1α, IL-1Rа, M-CSF в сыворотке кровив зависимости от носительства полиморфных вариантов rs1800587 (C/T) генаIL-1α, rs2234663 (2/4) гена IL-1Rа, rs386693509 (CA/TC) и rs3216780 (del/G) генаCSF1R соответственно у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием,участвующих в программе ЭКО.6.Установить оптимальное сочетание изучаемых маркеров, обладающеемаксимальной прогностической ценностью исхода ЭКО у женщин с трубноперитонеальным бесплодием.Основные положения, выносимые на защиту1.Определение в сыворотке крови женщин IL-1α в концентрациях от28,7 до 85,1 пг/мл и M-CSF от 265,8 до 322,1 пг/мл на 3-й день менструальногоцикла, предшествующего протоколу ЭКО указывает на возможность успешногопроведения процедуры ЭКО.52.Распределение частот генотипов полиморфных маркеров rs386693509(CA/TC) гена CSF1R, rs3216780 (del/G) гена CSF1R, rs1800587 (C/T) гена IL-1αотличается у женщин с различными исходами программы ЭКО.3.Генетическими маркерами благоприятного исхода процедуры ЭКОявляются генотип Т/Т rs1800587 гена IL-1α, генотип ТС/СА rs3693509 и генотипdel/G rs3216780 гена CSF1R.4.Полиморфизм rs1800587 (C/T)гена IL-1α носит функциональныйхарактер и оказывает свое влияние на исход ЭКО через детерминированностьуровня синтеза белковых продуктов.5.Предикторная роль M-CSF связана, как правило, с полиморфизмомгена его рецептора, определяющего чувствительность CSF1R.Научная новизнаУстановлены основные различия концентраций IL-1α в сыворотке крови на3-й день менструального цикла, предшествующего протоколу ЭКО, у женщин сразличными исходами процедуры.

Впервые в сыворотке крови пациентоквыявлены концентрации IL-1α и M-CSF, которые на преконцептивном этапеассоциированы снаступлениембеременности вциклах ЭКО.Впервыеустановлено распределение носительства генотипов полиморфных маркеровrs1800587 (C/T) гена IL-1α, rs2234663 (2/4) гена IL-1Rа, rs386693509 (CA/TC) иrs3216780 (del/G) гена CSF1R у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием,участвующих в программе ЭКО.

Впервые показано, что для женщин с трубноперитонеальнойформойбесплодияпрогностическизначимымивпланенаступления беременности в циклах ЭКО являются полиморфные варианты Т/Тrs1800587 гена IL-1α, ТС/СА rs3693509 и del/G rs3216780 гена CSF1R. Впервыеустановлена ассоциация генотипа ТС/ТС полиморфного маркера rs3693509 генаCSF1R с повышенным содержанием M-CSF в сыворотке крови. Изученыкорреляционные связи между цитокинами IL-1α, IL-1β, IL-1Rа, M-CSF междусобой, а также с гипофизарными и яичниковыми гормонами.6Теоретическая и практическая значимостьРасширены и дополнены представления о роли цитокинов в реализациирепродуктивных функций. Впервые определены иммуногенетические показатели,обладающие наибольшей информативностью для прогнозирования наступлениябеременности в результате процедуры ЭКО.Материалыдиссертациивошливучебныерабочиепрограммыииспользуются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедрФГАОУ ВО Первый МГМУ им.