Автореферат (Исследования по разработке и стандартизации комплексного урологического растительного средства), страница 4

В качестве стандартногообразца был использован лютеолин-7-гликозид, который с алюминием хлоридом имеетаналогичную кривую и близкий максимум поглощения в одной области 402±5 нм смаксимумом поглощения флавоноидов сбора с тем же комплексообразователем (рис. 4).Рисунок 4 – Спектры поглощениякомплексов флавоноидов изучаемогосбора (1) и СО лютеолин-7-гликозида салюминием хлорида (2)Для выбора оптимальных условий методики было изучено влияние рядапараметров: характер экстрагента, измельченность сырья, соотношение сырья иэкстрагента, время и кратность экстракции. Экспериментально было установлено, чтооптимальными условиями анализа являются: экстрагент – 70% спирт, соотношениесырья и экстрагента – 1:10, измельченность сбора – 2 мм, двухкратная экстракция по60 минут.Валидацию разработанной методики проводили по параметрам: правильность,прецизионность (сходимость и воспроизводимость), специфичность, линейность.

Наосновании полученных результатов разработанную методику можно считатьпрошедшей валидацию.Изучение показателей доброкачественности сбораВ соответствии с требованиями ГФ XI изд. и ГФ РФ XIII изд. в изучаемом сборебыли определены показатели качества (табл. 7) и показатели безопасности (табл. 8).19Таблица 7Минеральная, %ПримесиОрганическая, %Частиц, непроходящихчерез сито 7 мм, %Частиц,проходящих черезсито 0,18 мм, %ИзмельченностьЗола, нерастворимая в10% НС1, %Зола общая, %№п/пВлажность, %Экстрактивныевещества,извлекаемые водой, %Результаты изучения показателей качества изучаемого сбора(n=5, р=0,95)1234521,28,1312,573,164,53,81,430,8723,77,3611,654,255,03,31,230,9121,16,5610,373,883,63,91,320,8122,77,8512,543,755,14,51,370,9523,19,4512,634,994,84,01,490,97среднее 22,36±1,44 7,87±1,32 11,95±1,20 4,01±0,84 4,6±0,75 3,9±0,5 1,37±0,12 0,9±0,08В соответствии с полученными данными в проект НД на сбор «Фитоурол»предложено включить следующие показатели: экстрактивных веществ, извлекаемыхводой, не менее 21%; золы общей не более 14%; золы, нерастворимой в 10% растворехлористоводородной кислоты, не более 5%; влажность не более 12%; частиц, непроходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, не более 5%; частиц,проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, не более 5%; органическойпримеси не более 1,5%; минеральной примеси не более 1%.Содержание радионуклидов цезия-137 (от 1,2 до 1,67 Бк/кг) и стронция-90 (0,98 до1,6 Бк/кг) находится в пределах допустимых норм.Таблица 8Результаты определения микробной обсемененности изучаемого сбора№п/п123Испытанияна микробиологическую чистотуОбщее число аэробныхмикроорганизмов в 1 гОбщее число дрожжевых иплесневых грибов в 1 гEscherichia coli в 1 гРезультатиспытанийРекомендуемыетребования (нормы)2,5·105не более 107 КОЕ3,5·103не более 105 КОЕотсутствиене более 102 КОЕВ проект НД раздел «Микробиологическая чистота» рекомендовано включитьоценку сбора «Фитоурол» на соответствие требованиям по категории 4А.20Изучение состава БАВ экстракта сухого и его стандартизацияВ качестве экстрагента была выбрана вода очищенная, так как целью былополучение водного экстракта.Для получения водного экстракта сухого из разработанного сбора были подобраныоптимальные параметры экстрагирования: экстрагент – горячая вода (70°С);соотношение сырья и экстрагента – 1:10; измельченность сырья – 2 мм; кратность ивремя экстракции – трехкратно, 60 мин.

Сухой экстракт получали путем удалениярастворителя на ротационном испарителе при температуре 60С и давлении 0,1 кгс/см2.Полученный экстракт сухой представляет собой аморфный порошок от светлокоричневого до темно-коричневого цвета со специфическим запахом, горьковатогослегка вяжущего вкуса. Гигроскопичный и слегка комкуется. Потеря в массе привысушивании не превышает 5,0%.Изучение качественного состава экстракта сухого проводилось с помощьюкачественных реакций, методами УФ-спектрофотометрии, ТСХ и ВЭЖХ. В результатенами подтверждено наличие в экстракте: флавоноидов (рутин, гиперозид, лютеолин,кверцетин, лютеолин-7-гликозид, нарингенин), фенолкарбоновых кислот (галловая,эллаговая кислоты), гидроксикоричных кислот (хлорогеновая, феруловая, цикориевая,кофейная, неохлорогеная, коричная кислоты), свободных сахаров (сахароза, глюкоза,фруктоза, рамноза), фенологликозида (арбутин), органических кислот (янтарная,щавелевая кислоты), производные дубильных веществ (эпикатехин, катехин,эпигаллокатехингаллат); кумаринов (о-метоксикумарин, дикумарин), полисахаридов(инулин), аскорбиновой кислоты.Согласно полученным результатам, содержание БАВ в полученном экстрактесухом соответствует по качественному и количественному составу БАВ в исходномсборе.

Этот факт подтверждает рациональность разработанной схемы его получения(табл. 9) и обеспечивает требуемую фармакологическую активность.21Таблица 9Количественное содержание БАВ в экстракте сухом изучаемого сбора(n=5, р=0,95)Суммаполисахаридов(инулин)СуммадубильныхвеществСуммаорганическихкислот12345среднееАрбутин№СуммафлавоноидовСодержание, %2,833,052,953,072,882,96±0,134,034,144,064,174,214,12±0,093,603,893,743,643,893,75±0,173,933,984,094,113,954,01±0,112,011,932,101,962,042,01±0,08Идентичность качественного состава экстракта сухого и сбора, позволилапровести стандартизацию экстракта по содержанию флавоноидов и арбутина, всоответствии с методиками, разработанным для исходного сбора.

В качественорматива предложено установить содержание суммы флавоноидов в пересчете налютеолин-7-гликозид не менее 2,8%, содержание арбутина – не менее 4,0%.ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1. Проведеноинформационно-аналитическоеисследованиеурологическихлекарственных средств. Установлена перспективность использования в качествелекарственного растительного сырья: листьев брусники, травы хвоща полевого, корнейлопуха, плодов укропа огородного, травы полыни обыкновенной.2. На основании полученных экспериментальных данных обоснован и предложеноптимальный состав сбора: листья брусники – 30%; трава хвоща полевого – 30%; корнилопуха – 15%; плоды укропа огородного – 15%; трава полыни обыкновенной – 10%.3. Проведено фармакогностическое исследование сбора «Фитоурол».

Изучены иустановлены морфолого-анатомические признаки изучаемого сбора. Полученыфотографии внешних признаков и микроскопии, которые могут быть использованы какиллюстративный материал разделов нормативной документации, регламентирующейкачество сырья. Определен состав и содержание БАВ в изучаемом сборе: флавоноидов220,47±0,01%, арбутина 1,4±0,07%, полисахаридов (инулина) 1,78±0,07%, дубильныхвеществ 3,37±0,05%, органических кислот 1,06±0,04%, эфирных масел 0,34±0,02%,кумаринов, свободных сахаров.4.

Получен экстракт сухой на основе изучаемого сбора. Подобраны оптимальныеусловия экстрагирования сбора, обеспечивающие максимальный выход действующихвеществ: экстрагент – горячая вода (70°С), соотношение сырья и экстрагента – 1:10,измельченность сбора – 2 мм, кратность и время экстракции – трехкратно, 60 мин.Определены параметры сушки экстракта сухого на ротационном испарителе:температура 60С и давлении 0,1 кгс/см2. Проведено изучение состава БАВ экстрактасухого и установлено содержание: флавоноидов 2,9±0,13%, арбутина 4,12±0,09%,полисахаридов (инулина) 3,75±0,17%, дубильных веществ 4,01±0,11%, органическихкислот 2,0±0,08%, определены кумарины, аскорбиновая кислота.5.

Разработаны и валидированы (по параметрам: правильность, прецизионность(сходимостьивоспроизводимость),специфичность,линейность)спектрофотометрические методики количественного определения суммы флавоноидовв пересчете на лютеолин-7-гликозид в сборе (включена в проект НД на сбор«Фитоурол») и экстракте сухом.6. Определены показатели качества сбора (экстрактивные вещества, извлекаемыеводой, влажность, измельченность, зола общая, зола, нерастворимой в 10% растворехлористоводородной кислоты, органическая и минеральная примеси) и экстрактасухого (описание, потеря массы при высушивании), установлены их нормы;разработаны характеристики подлинности (внешние и микроскопические признаки,качественные реакции, ТСХ, УФ-спектр).7.

Проведено фармакологическое изучение комплексного урологического сбора.Установлено, что водное извлечение сбора «Фитоурол» обладает мочегонным,противовоспалительным, антиоксидантным действием. Определено, что превентивнокурсовое введение лабораторным животным отвара изучаемого сбора в объеме 10мл/кг на фоне экспериментального уролитиаза, индуцированного внутрижелудочнымвведением витамина Д2, сопровождается снижением выраженности процессакамнеобразования и явлений воспалительного процесса в паренхиме почек.8. Разработан проект НД на комплексный урологический сбор «Фитоурол».23Практические рекомендации.

По результатам экспериментальных данныхразработаныметодики,которыецелесообразноиспользоватьвконтрольно-аналитических лабораториях для контроля качества многокомпонентных средств наоснове фармацевтических субстанций растительного происхождения. Результатыполученных исследований могут быть рекомендованы к использованию в учебномпроцессе студентов по дисциплинам фармакогнозия, фармацевтическая химия.Результаты фармакогностических и физико-химических исследований включены впроект НД на комплексный урологический сбор «Фитоурол».Перспективы дальнейшей разработки темы заключаются в клиническомисследовании предложенного растительного сбора.

Также представляет интересдоклинические и клинические исследования экстракта сухого, полученного изразработанного сбора. Разработка инструкции по медицинскому применению иприготовлению отвара из сбора для лечения и профилактики мочекаменной болезни,что является, в настоящее время, перспективным направлением в клиническойпрактике.СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1. Smyslova, O.A. Characteristics of the new comprehensive herbal medicine for the treatment andprevention of urolithiasis / O.A. Smyslova, A.A.

Markaryan, O.V. Evdokimova, I.U. Glazkova, M.A.Yaroshenko // Biology and Medicine. – 2015. – Vol. 7, № 2.2. Smyslova, O.A. Study of chemical composition of the new urolithic herbal tea / O.A. Smyslova,A.A. Markaryan, M.A. Yaroshenko // Biology and Medicine. – 2015. – Vol. 7, № 2.3. Смыслова, О.А.

Хроматографическое исследование фенольных соединениймногокомпонентного растительного сбора для лечения и профилактики мочекаменнойболезни / Смыслова О.А. // Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. – 2015. –№1 (6). – С. 14-19.4. Смыслова, О.А. Новое перспективное комплексное растительное средство для терапии ипрофилактики мочекаменной болезни / О.А. Смыслова, А.А.

Маркарян, И.Ю. Глазкова //Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. – 2015. – №1 (6). – С. 31-36.5. Смыслова, О.А. Разработка и фитохимическое изучение растительной композиции длялечения и профилактики мочекаменной болезни / О.А. Смыслова, А.А. Маркарян, И.Ю.Глазкова // Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. – 2015. – №1(6). – С. 44-47.6. Смыслова, О.А. Исследования по идентификации и определению содержания арбутина вуролитическом растительном сборе / О.А.