Автореферат (Исследования по разработке и стандартизации комплексного урологического растительного средства), страница 2

В работе использовалось современноесертифицированное оборудование, экспериментальные исследования проводились вдостаточном числе повторностей. Разработанные методики были валидированы, чтопозволило получить достоверные и воспроизводимые результаты. Проведеннаяэкспертная оценка подтвердила достоверность первичных материалов.Апробация результатов исследованияОсновные результаты исследований доложены на XLI международной научнопрактическойконференции«Современнаямедицина:актуальныевопросы»(Новосибирск, 2015 г.), XXXVI международной заочная научно-практическойконференции«НаучнаяМеждународнойдискуссия:вопросынаучно-практическоймедицины»конференции(Москва,«Актуальные2015г.),вопросыиперспективы развития медицины» (Омск, 2015 г.), Международной научнопрактической конференции «Проблемы медицины в современных условиях» (Казань,2015 г.), 6th European Conference on Biology and Medical.

«East West» (Vienna, 2015).Апробацияконференцииработысостоялась наИнститутаМультидисциплинарногофармациицентрамежкафедральнойиклиническихучебно-методическойтрансляционнойимедицинскихмедициныисследованийМеждународной школы «Медицина будущего» ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) (30.05.2017 г., Москва).Личный вклад автораАвтору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования,постановкецелейэкспериментальныхизадач,выбореисследований,объектаобобщениииисследования,статистическойпроведенииобработкеполученных результатов. Автором лично проведена разработка, валидация методикопределения суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-гликозид методомдифференциальнойспектрофотометрии,арбутинаметодомйодометрическоготитрования в сборе и экстракте сухом.

Автором подобраны условия разделения БАВлекарственного растительного сырья для качественной оценки сбора и экстракта8сухого методом ВЭЖХ. Вклад автора является определяющим на всех этапахпроводимого исследования: начиная от постановки цели и задач до их практическойреализации, обсуждения результатов исследования в научных публикациях инепосредственного внедрения в практику.Внедрение результатов исследованияРезультаты научной работы внедрены в учебный процесс кафедры фармацииФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М.

Сеченова Минздрава России (СеченовскийУниверситет) (акт от 31.05.2017). Материалы исследования внедрены в практикуработы испытательной лаборатории ГБУЗ «Центр лекарственного обеспеченияДепартамента здравоохранения г. Москвы» и используются в технологическомпроцессе получения сухих экстрактов из растительного сырья (акт от 05.06.2017) и дляконтроля качества многокомпонентных средств на основе фармацевтическихсубстанций растительного происхождения (акт от 05.06.2017).Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения, изложенные в диссертационной работе, соответствуютпаспорту специальности 14.04.02 – «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», аименно, пунктам 2, 3, 6 областей исследования.Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 233 страницах машинописного текста с приложениями исостоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы.

Библиографическийуказатель содержит 192 наименования (из них отечественных – 138, иностранных – 54).Приведено 72 таблиц и 62 рисунка.ПубликацииОсновное содержание, результаты исследования и выводы отражены в 15публикациях, в том числе 4 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК МинобрнаукиРФ, из них 3 статьи – в зарубежных изданиях, индексированных в международной базеданных Scopus.9ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериалы и методы исследованияОбъектами исследования являлись:1.

Сбор, состоящий из лекарственного растительного сырья:Листья брусники (Folia Vaccinii vitis-idaeae) – ГФ XI изд., ст. 27, стр. 278;Хвоща полевого трава (Equiseti arvensis herba) – ГФ РФ XIII изд., ФС.2.5.0045.15;Лопуха корни (Arctii radices) – ГФ РФ XIII изд., ФС.2.5.0025.15;Укропа огородного плоды (Anethi graveolentis fructus) – ГФ РФ XIII изд., ФС.2.5.0043.15;Трава полыни обыкновенной (Herba Artemisiae vulgaris) – ФС 42-2094-83.Для составления сбора были использованы промышленные образцы ЛРС,приобретенные в аптечных организациях г.

Москвы. Изучаемый сбор изготавливалсяв лабораторных условиях в соответствии с методикой ОФС «Сборы», ГФ XI изд., вып.1и ГФ РФ XIII изд., ОФС.1.4.1.0020.15.2. Экстракт сухой – лабораторный образец, полученный из сбора воднойэкстракцией и с последующей сушкой на ротационном испарителе.Изучение внешних и анатомо-диагностических признаков сбора, показателейкачества и безопасности сбора и экстракта сухого проводили в соответствии с ОФС ГФXI изд., ОФС ГФ РФ XII изд. и ОФС ГФ РФ XIII изд.Изучение анатомо-диагностических признаков сбора проводили на микроскопеМБИ-3 (при увеличении 7×8; 7×20; 7×40; 10×10). Результаты документировали спомощью фотоаппарата «Canon PowerShot G16» и микрофотонасадки МФН-12.Экстрактивные вещества, извлекаемые водой, определяли по методике ГФ РФ XIIIизд., ОФС.1.5.3.0006.15.Количественное определение арбутина проводили методом йодометрическоготитрования по ГФ XI изд., вып.

2, ст. 27.Анализ БАВ в сборе и экстракте сухом проводили методом ТСХ на пластинах«Kieselgel 60 F254», TLC Silicagel 60 F254 (Merck, Германия) размером 20×20 см, 15×20см. Величины Rf идентифицированных веществ являются средними из пяти измерений.Компонентный состав эфирных масел, полученный из сбора, проводили методомГЖХ на хроматографе «Кристаллюкс-4000М» (Мета-хром, Россия) с последующейкомпьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы«NetChrom, V2.1» для «Windows». В качестве неподвижной фазы использовалась10кварцевая капиллярная колонка HP-5MS (30 м × 0,25 мм × 0,25 мкм), заполненная 5%фенил-95%-метилполисилоксаном.

В качестве подвижной фазы использовался азот.Скорость потока 1 мл/мин, температура: испарителя – 200°С, детектора – 250°С.Исходная температура термостата на момент начала анализа 100°С. В процессеэксперимента она изменяется со скоростью 5 град/мин и достигает 150°С. Детекторпламенно-ионизационный. Время анализа 10 мин. Объём пробы 1 мкл раствора сразделением потока 1:27.ВЭЖХ анализ фенольных соединений, органических кислот, сахаров и арбутинапроводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Gilson» (Gilson,Франция) с ручным инжектором «Rheodyne», модель 7125 (Rheodyne, США) споследующей компьютерной обработкой результатов с помощью программы«Мультихром» для «Windows». В качестве неподвижной фазы для фенольныхсоединений и арбутина была использована металлическая колонка «Kromasil С18»размером 4,6 × 250 мм, 5 мкн; для сахаров и органических кислот – металлическаяколонка «Altech OA-1000 Organic Acids» размером 6,5 × 300 мм.

В качестве подвижнойфазы для фенольных соединений и арбутина: метанол – вода – фосфорная кислота(конц.) (400:600:5); для сахаров и органических кислот: 0,005 М раствор сернойкислоты. Исследование проводили при комнатной температуре. Скорость подачиэлюента и продолжительность анализа для фенольных соединений и арбутина – 0,8мл/мин и 70 мин; для сахаров и органических кислот – 1 мл/мин и 20,38 мин. Объемпробы 50 мкл.

Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «Gilson»UV/VIS модель 151, при длине волны для фенольных соединений и арбутина – 254 нм;для сахаров и органических кислот – 190 нм.Спектрофотомерическийанализфенольныхсоединений,фруктозановифруктозидов проводили на саморегистрирующем спектрофотометре «Helios Alfa»(Spectronic Unicam, Великобритания). Кювета с толщиной слоя 10 мм. Валидационнуюоценкуспектрофотометрическихметодикдополнительнопроводилинаспектрофотометрах «Cary100 Scan» (Varian, США) и «Schimadzu UV-1800»(Schimadzu, Япония).При проведении методик качественного и количественного определения БАВ былииспользованы стандартные образцы (СО) фирмы Sigma-Aldrich: лютеолин-7-гликозид(CAS № 5373-11-5), арбутин (CAS № 84380-01-8), рутин (CAS № 207671-50-9),11кверцетин (CAS № 6151-25-3), кофейная кислота (CAS № 331-39-5), галловая кислота(CAS № 5995-86-8), хлорогеновая кислота (CAS № 327-97-9), лютеолин (CAS № 49170-3), кемпферол (CAS № 520-18-3), апигенин (CAS № 520-36-5), гиперозид (CAS №482-36-0), фруктоза (CAS № 57-48-7).Валидационная оценка методик в соответствии с ОФС ГФ РФ XIII изд., согласноГОСТу и методическим указаниям была проведена по критериям: правильность,прецизионность (сходимость и воспроизводимость), специфичность, линейность.Исследование фармакологической активности изучаемого сбора проводили набелых крысах линии Wistar обоего пола (масса 180-200 г) в осенне-зимний период.Содержание животных соответствовало «Правилам лабораторной практики» (GLP),Приказу МЗ РФ № 708Н от 23.08.2010 г.