Диссертация (Влияние плазменных факторов микроциркуляции на состояние суммарного поверхностного заряда мембраны эритроцитов у больных метаболическим синдромом), страница 8

Клиническаяхарактеристика обследованных групп представлена в таблице 1.37Полученные данные нашли подтверждение и в работах Guerrero-Romeoet al., которые выявили выраженную гипомагниемию у лиц с МС, посколькуданное состояние связано с повышенной концентрацией С-реактивного белкаи TNF-α в сыворотке крови [95].Гипомагниемия также способствуетуменьшениюэкспрессиииактивности антиоксидантных ферментов, таких как глутатионпероксидаза(GPx), супероксиддисмутаза (SOD) и каталаза (CAT), а также концентрациюантиоксидантов в клетках и тканях, что вызывает изменения составаклеточных мембран, в том числе Эр и меняет их электрический заряд [110].Мо(молибден)–хроническаяинтоксикацияМовызываетфункциональные изменения печени, повышение содержания мочевойкислоты в сыворотке крови, а в дальнейшем при избыточном содержании Моразвиваются снижение числа Эр, гипотония, анемия.

Многие профпатологисчитают, что ряд заболеваний суставов также связан с избыточнымпоступлением в организм Мо. По данным ряда авторов, антагонистическиевзаимодействия между Mo и Cu могут быть связаны с развитием осложненийпри СД [83].Fe (железо) рассматривается как один из возможных факторов рискаразвития сердечно-сосудистых заболеваний. В исследованиях некоторыхавторов отмечено, что повышенное содержание сывороточного ферритинасвязано с увеличением числа компонентов, составляющих МС (71,91).В исследовании Fleming D.G.

была выявлена прямая зависимостьчастоты случаев СД и ИБС при насыщении организмаFe от 4 до 10 г, чтониже уровня, необходимого для проявления клинически выраженногогемохроматоза. Аналогичные данные находят подтверждение и в другихпубликациях, где доказана роль повышенного накопления Fe в развитииинсулинорезистентности как компонента МС [71,136].С этими результатами согласуются и другие исследования зарубежныхавторов, согласнокоторым применениехелатовFe и ограничениеупотребления продуктов, являющихся источниками гемового железа,29Больные МСГруппа контроляI ст18%III ст16%II ст39%I ст45%Без ОЖ68%II ст12%III ст2%Рисунок 2. Распространенность степеней ожирения у больных МС ив группе контроля.Сопутствующие заболевания отмечались у 52% больных с МС и 70%пациентов, составлявшихконтрольную группу (p<0,05).Намоментисследования вся сопутствующая патология находилась в стадии ремиссии.Распространенность и структура сопутствующей патологии представлена втаблице 2.39Таблица 2.Структура сопутствующих заболеваний в основной и контрольнойгруппахСопутствующиеОсновная группаГруппа контроля3268Мочекаменная болезнь,%1722Хронический3151536Дорсопатия шейного отдела 1934заболевания, ремиссияПатологияпищеварительного тракта,%пиелонефрит,%Желчекаменная болезнь,%позвоночника,%2.2 Методы обследования больных2.2.1.

Антропометрические методыВсемпациентампроводилосьизмерениеантропометрическихпоказателей (масса тела, рост, ОТ, с расчетом ИМТ (индекс Кетле)).Индекс Кетле рассчитывался по формуле: ИМТ=масса тела, кг/ рост, м 2.Нормальные показатели ИМТ – 18,5- 24,9кг/м2; избыточная масла тела –25,0 – 29,9 кг/м2, ожирение I степени – 30-34,9 кг/м2, ожирение II степени –35-39,9 кг/м2, ожирение III степени > 40 кг/м2[28].ОТ измерялась на уровне середины расстояния между нижним ребром иподвздошным бугром.

Измерение производилось стоя без обуви, на выдохе,при упоре на обе стопы с руками, свободно висящими вдоль туловища.Измерение выполняли 3 раза и регистрировали с точностью до 0,1 см.Измерение АД проводили непрямым методом Короткова после 15минутного отдыха в положении сидя при помощи ручного сфигмоманометра,трехкратно. САД определялось при появлении 1 тона (1 фаза тонов40Короткова), ДАД – при исчезновении тонов (5 фаза тонов Короткова). Прианализе использовали среднее значение из полученных данных.2.2.2.

Лабораторные и инструментальные методы исследованияПоказатели биохимического анализа крови (глюкоза, триглицериды(ТГ), общий холестерин и его фракции – липопротеиды низкой плотности(ЛПНП),липопротеидывысокойплотностигемоглобин (HbAlc); коагулограммалабораторииУКБ№4.Забор(ЛПВП),гликированныйи др.) определяли в биохимическойкровидлялабораторнойдиагностикипроводился из локтевой вены в период между 8.00 и 9.00 часами утра после12-часового голодания.

При этом основная группа больных была разделенанами по показателям липидного обмена (холестерина, ТГ, ЛПНП) на двеподгруппы по условной степени их изменений (умеренная и выраженная).ЭКГ выполнялось на аппарате “Shciller Cardiovit AT 101” фирмы SchillerAG” согласно стандартной методике проведения ЭКГ-исследования.Для исключения хронической сердечной недостаточности (ХСН)пациентампроводилосьЭхоКГнааппаратеAlokaSSD2000сиспользованием датчика с частотой импульсов 3,5 МГц. Оценивался М-и Врежим (одномерное и двумерное изображение), а также допплеровскоеисследование трансмитрального кровотока по общепринятой методике [177].ДляоценкисистолическойидиастолическойдисфункцийЛЖизмерялись следующие ЭхоКГ-параметры:• фракция выброса левого желудочка• размеры полостей ЛЖ и левого предсердия• толщина левого желудочка в диастолу• типнаполнения ЛЖ по данным допплеровского исследованиятрансмитрального кровотока2.2.3.

Методика исследования отрицательных зарядов на поверхностиклеток эритроцитовИсследование СПЗМЭр проводилось с помощью положительногокатионного красителя (катионный синий «0»), адсорбирующегося на41поверхности плазматической мембраны Эр до полной нейтрализации ихотрицательногозаряда,поавторскойметодикеВ.И.Захарченко,Т.П.Суриковой.Данный метод позволяет определить число отрицательных зарядов наклеточной поверхности Эр в норме и при патологических состояниях, такихкак МС и СД адсорбционным методом.Исследование СПЗМЭр производилось путем выделения из донорскойкрови Эр, трижды отмытых в изотоническом растворе хлорида натрия приph-7,2.

Для отмывки на 1 мл эритроцитарной массы использовалось 3 млраствора хлорида натрия. После центрифугирования 1 мл эритроцитарноймассы добавлялся к 9 мл красителя катионного синего 0 с концентрациейкрасителя 4,3-27 г/м3 в изотоническом растворе при указанном ph иинкубировался в течение 2-3 ч при температуре 18-22 °С. Затем Эротделялись от раствора центрифугированием. После адсорбции растворфотометрировали на фотоколориметре КФК-2. По значению адсорбциикрасителя проводился расчет числа зарядов на клеточной поверхности Эр,исходя из формулы:N(-)=NА x AmaxnгдеNA – постоянная Авогадо = 6,02х1023N(-) – число отрицательных зарядов на 1 эритроцитAmax – предельная адсорбция красителя, моль\м3n – число Эр в единице объемаДанный способ основан на том, что отрицательный заряд клеточнойповерхности Эр полностью нейтрализуется положительным зарядомкатионного красителя при его предельной адсорбции.422.2.4.

Исследование металлов крови путем атомно-эмиссионнойспектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (АЭС-ИСП)АЭС-ИСП является одним из самых высокочувствительных методовкачественного и количественного определения микроэлементного состава вразличных средах, в том числе и в организме человека.Метод основан на измерении интенсивности излучения света, которыйиспускается атомами, возбужденными индуктивно-связанной аргоновойплазмой (ИСП), на определенных длинах волн. ИСП является плазменнымразрядом, возбуждаемым аргоновым током и в дальнейшем поддерживаетсявоздействием высокочастотного поля на ионизированный аргон.АЭС-ИСПпозволяетопределитькаккачественные,такиколичественные характеристики элементов. Путем измерения интенсивностиспектральных линий атомов возможно определение концентрации данногоэлемента в пробе, а качественную информацию (состав элементов) получаютпутем измерения длины волны испускаемого излучения.Метод АЭС-ИСП:Исследованиепроизводилосьнастационарномэмиссионномспектрометре Искролайн 300 лабораторного класса.Главными составляющими частями прибора являются:– система ввода образца, состоящая из перистальтического насоса,подающего раствор с постоянной скоростью в распылитель;– радиочастотный (РЧ) генератор;–плазменная горелка;– передающая оптика, фокусирующая изображение плазмы на входнойщели спектрометра; радиальная проекция больше подходит для сложныхматриц (щелочи, органические вещества), в то время как осевая проекциядает большую интенсивность и лучший предел определения в случае спростыми матрицами;– дисперсионные устройства, состоящие из дифракционных решеток,призм, фильтров или интерферометров;43– детектор, превращающий энергию излучения в электрическуюэнергию;– блок сбора данных.Схема процесса при атомно-эмиссионном анализе:1.

Объектом исследования являлся образец цельной венозной крови,подающийся с помощью перистальтического насоса в распылитель, где,благодаря потокам аргона превращался в аэрозоль и затем переносился вплазму, а под воздействием последней десольватировался, испарялся и вдальнейшем возбуждался и атомизировался плазмой до состояния атомногопара.2.Атомизированныеатомыилиионыпроизводятхарактерноеизлучение, которое затем собирается специализированным устройством и вдальнейшем сортируется по длинам волн, детектируется в электронныесигналы.3.