Текст отзыва оппонента 2 (Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и экспрессии эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии)

ОТЗЬ1В ОФИЦИАЛЬНОГО ОППОНЕНТАна диссертационную работу Ишуниной Татьяны Александровны на тему «Измененияцитоархитектоники, метаболической активности нейронов и экспрессии эстрогеновыхрецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга человека пристарении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии», представленной на соисканиеученой степени доктора медицинских наук по специальности: 03.03.04 - клеточнаябиология, цитология, гистология.Актуальность избранной темыдиссертационноеисследованиеТ.А.Ишунинойпосвященоизучениюособенностей цитоархитектоники, метаболической активности, экспрессии эстрогеновыхрецепторов в мозге человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистомслабоумии.

Актуальность исследования обусловлена тем, что в настоящее времяпроисходит постоянное увеличение количества больных со слабоумием, нуждающихся впомощи и внимании. Под слабоумием понимают обобщённый термин хронического илипрогрессирующего нарушения корковых и подкорковых функций, приводящего кугнетению познавательнь1х способностей. К проявлениям слабоумия относят нарушениепамяти, настроения, афазию, апраксию, агнозию, расстройство абстрактного мышления,затруднённую адаптацию к изменяющимся ситуациям.

В незначительной степениуказанные отклонения познавательнь1х функций наблюдаются и при нормальномстарении. В данной работе на основе литературных и собственных даннш проведеносравнительноеисследованиедвухнаиболеечастыхформслабоумия:болезниАльцгеймера и сосудистой деменции.В научной литературе очень мало данных о превентивной роли эстрогенов вразвитии нейродегенеративных заболеваний в случае раннего начала заместительнойтерапии, также отсутствуют данные о эстрогеновых рецепторах в ядрах гипоталамуса ипередне-базального мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистомслабоумии. Однако, без учета указанных факторов нельзя понять патогенетическиемеханизмыисоздатьвысокоэффективныеспособыпрофилактикиитерапииразвивающегося слабоумия мозга. Таким образом, актуальность темы, которой посвященадиссертация, сомнений не вызывает, а решение данной задачи имеет большое медикосоциальное значение.1Степеньобоснованностинаучныхположений,выводовирекомендаций,сформулированных в диссертацииОсновные положения и выводы диссертации изложены в 33 печатнь1х работах, 20статей опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

двенадцатьстатей опубликованы в зарубежных изданиях, включённьж в систему цитирования wеЬ ofSсiепсе.достоверность и новизна исследования, полученных результатовдостоверность полученных данных не вызывает сомнений, так как научныеположения, выводы и рекомендации, базируются на достаточном по числу наблюденийматериале. диссертационная работа проведена с использованием комплекса современнь1хметодов исследования (иммуноцитохимия, компьютерный морфометрический анализ,гибридизация «iп Situ», цепная полимеразная реакция) с последующей подробнойстатистической обработкой количественных данных с помощью непараметрическойстатистики Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка, а также с помощью тестовКрускалла-Уоллиса и Манн-Уитни. Материалы исследования докладывался на 6всероссийских и 6 международных научных конференциях.Комплексный подход с помощью иммуноцитохимических и морфометрическихметодов исследования показал изменения метаболической активности нейронов пристарении и болезни Альцгеймера в поле Брока, медиальном мамиллярном итуберомамиллярном ядрах гипоталамуса мозга человека при сосудистом слабоумии.Впервые изучена иммуноцитохимическая экспрессия эстрогеновых рецепторов в ядрахгипоталамуса и передне-базального мозга человека при старении, болезни Альцгеймера исосудистом слабоумии.

Впервые изолирован новый сплайсинговый вариант эстрогеновогорецептора сі МВ1 и изучены особенности его экспрессии, связанные с полом, возрастом именопаузой.Определены изменения иммуноцитохимической экспрессии ключевогофермента биосинтеза эстрогенов - ароматазы в ядрах гипоталамуса и передне-базальногомозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии.Значимость для науки и практики полученных автором результатовНаучнаяипрактическаяценностьработывысока.Полученныеданныедемонстрируют структурно-функциональные изменения ядер гипоталамуса и переднебазального мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии.Пристарениисущественнометаболическаянеизменяется.активностьПричёмнейроно-вувеличениелибоувеличивается,метаболическойлибоактивности2ассоциируется со снижением уровня циркулирующих эскрогенов и андрогенов.

ПриболезниАльцгеймераизмененияметаболическойактивностинейроновносятгетерогенный характер. При сосудистом слабоумии в мозге наблюдается тенденция кснижению метаболической активности нейронов.Полученные автором данные о повышении экспрессии ядерных эстрогеновыхрецепторов а в нейронах ядер гипоталамуса и передне-базального мозга человека можетбыть рекомендованоАльцгеймераввкачествеодногогистопатологическойиз диагностических критериевпрактике.ПовышениеэкспрессииболезниМВівгипоталамусе у женщин в пери- и постменопаузе указывает на необходимость принятияво внимание роли мутантнь1х форм эстрогеновых рецепторов при назначении эстрогенов сзаместительной целью в климактерическом периоде.

Результаты иммуноцитохимическогоисследования ароматазы указывают на локальный дефицит эстрогенов в гипоталамусе приболезни Альцгеймера.достоинство и недостатки в содержании и оформлении диссертациидиссертация вь1полнена в классическом варианте и состоит из введения, обзоралитературы, главы с описанием материала и методов исследования, глав собственныхрезультатовсихобсуждением,выводов,практическихрекомендаций,спискаиспользованньк источников. Работа изложена на 284 страницах машинописного текста,иллюстративный материал представлен 38 таблицами, 40 графиками, 4 диаграммами, 43фотомонтажами, включающими 161 микрофотографию.

Указатель литературы включает107 отечественнь1х и 412 зарубежных источников. Однако следует отметить большуюдолюстарыхлитературныхисточников(более10-15лет)имелкихошибок(грамматических, стилистических, использования знаков тире и дефиса, пробелов).Особенно это заметно в списке литературы.Методы исследования современны и адекватны поставленным задачам. Каждыйполученный факт тщательно анализируется, глубоко обсуждается в тексте с привлечениемлитературы, что, несомненно, говорит об эрудиции автора.

Все данные исследованийпредставлены в количественном варианте. Большое количество цифрового материала длякаждого момента работы объективизируют полученные данные и свидетельствует овысшей степени добросовестности диссертанта как исследователя. Необходимо отметить,что подобный многофакторный анализ и комплексный подход к исследованиюгистологически сходных изменений различных структурных отделов головного мозга довольно трудная задача, сопоставление результатов разлkчных морфологических даннь1хделает работу Т.А.

Ишуниной вполне репрезентативной.3Результаты исс]тедования и их обсуждение хорошо структурированы и имеютклассическое описание. Акцент в диссертации сделан на оценке метаболическойактивности нейронов, используя цитоархитектонические показатели, что позволилосравнить особенности структурно-функциональньн изменений в гипоталамусе и переднебазального мозга при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии. Однако,на мой взгляд основным недостатком работы является отсутствие сравнительного поядрам морфометрического анализа реактивно измененных нейронов (гипохромньж,вакуолизированных и гиперхромнж несморщенных), необратимо измененнь1х нейронов(сморщенныхнейронов,клеток-теней,достоверные измененияапоптозньжтел).диссертантпоказываетобщей численной плотности нейронов, нейроглиальныхотношений, площади сечений перикарионов, но совершенно не затрагивает причины этихизменений.

За счет чего меняется плотность нейронов? Какова при этом роль некроза,апоптоза, ишемических гиперхромнь1х изменений? И как это связано с возрастом, типомнейронов и ядрами? Работа стала бы еще более информативной при проведении тестов нанекроз и апоптоз нейронов, состояние микроциркуляторного русла.Несомненно, украшением работы являются новь1е методы исследования такие как,гибридизация«iпSitu»мРНКвазопрессина,цепнаяполимеразнаяреакция,иммуноцитохимическое окрашивание эстрагеновых рецепторов G и Р, информативныйпоказатель нейроглиального индекса. Каждый из этих показателей в диссертационномисследованиитщательноанализируется,обсуждаетсяспозицийсовременныхпредставлений.

Все исследования представлены в качественном и количественномварианте, но к, сожалению в диссертационной работе отсутствуют современные данныепо нейрогенезу зрелого головного мозга. даже анализ последних литературныхисточников по нейрогенезу мог бы стать украшением диссертационного исследования вплане прогностической ценности найденных структурно-функциональных измененийнейронов и глиальнь1х клеток в мозге при старении, болезни Альцгеймера и сосудистомслабоумии.Все сказанное позволяет вь1соко оценить диссертационную работу Т.А.

Ишуниной.Принципиальных замечаний по работе нет. Содержание автореферата соответствуетосновнь1м положениям диссертации.зАключЕниЕТаким образом, диссертация Ишуниной Татьяны Александровны на тему«Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и экспрессииэстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга4человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии», на соисканиеученой степени доктора медицинских наук является научно-квалификационной работой, вкоторой на основании выполненнь1х автором исследований разработаны теоретическиеположения, совокупность которых можно квалифицировать как научное достижение вразвитии соответствующего научного направления в медицине (клеточной биологии,цитологии, гистологии), имеющей важное народнохозяйственное значение.

диссертациясоответствует требованиям п.9. «Положения о порядке присуждения ученых степеней»,утверждённого постановлением Правительства РФ №842 от 24.09.2013г. (в редакцииПостановления Правительства РФ от 28.08.2017 №1024) предъявляемым к докторскимдиссертациям, а ее автор заслуживает присуждения искомой ученой степени поспециальности: 03.03.04 -клеточная биология, цитология, гистология.Официальный оппонент,Акулинин Виктор Александрович, доктор медицинских наук, доцент, 14.00.15 патологическая анатомия, 03.00.25 -гистология, цитология, клеточная биология, ФГБОУВО«Омскийгосударственныймедицинскийуниверситет»МинздраваРоссии,заведующий кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии.644043, г.Омск, ул. Ленина,12Омский государственный медицинский университетКафедра гистологии, цитологии и эмбриологииЕ-mаil : аkuliпiп@оmsk-оSmа.гuТел.

+7 3812 239298;=--_-: -----------сот. +7 913 9885422.5.