Текст апробации (Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и экспрессии эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии)

Перевод с английского языка на русский язык Нидерландский институт иейрпиаук Мейбергдриф 42 1105 БА Амстердам Нидерланды тел.:т31 20 566 55 00 факс: +31305666121 пм а.'пегаеп1пайп~п1.испат.п1 !ВА14:МЬЗЗ РЕ13т05469000 54 В1С: РЕ13тнь2М Заключение организации, где была выполнена диссертация ЗАКЛЮЧЕНИЕ Нидерландского института нейронаук. Диссертационное исследование Татьяны Александровны Ишуниной «Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и переднебазального комплекса мозга при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии» выполнялось в лаборатории профессора Д.Ф.

Свааба в Нидерландском институте нейронаук. Научный консультант — доктор Д.Ф. Свааб, профессор нейробиологии, возглавляющий научно-исследовательскую группу «Нейропсихиатрические заболевания» при Нидерландском институте нейронаук. По результатам рассмотрения материалов диссертации «Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии» принято следующее заключение: Научная проблема, изученная Т.А. Ишуниной, имеет важное медико- социальное значение, т.к. слабоумие поражает около 5% людей старше 65 лет.

Каждые последующие 4 года этот процент удваивается, достигая 30% в возрасте 80 лет и 50% в 85 лет. После постановки диагноза «слабоумие» средняя продолжительность жизни больных составляет 8 лет. К наиболее частым проявлениям слабоумия относят нарушение памяти, афазию, апраксию, агнозию, расстройство абстрактного мышления, затрудненную адаптацию к изменяющимся ситуациям (Ои8це е1 а1., 2003; ККсЫе апс1 1.о~ейопе, 2002). В незначительной степени указанные нарушения познавательных функций наблюдаются и при нормальном старении.

В связи с этим актуальность настоящей работы продиктована необходимостью изучения возрастных изменений и нейропатологии слабоумия в структурах мозга, отвечающих за познавательные процессы. Рассматриваются две наиболее частые формы деменции: болезнь Альцгеймера (БоАл) и сосудистое слабоумие (СС). Эстрогены оказывают влияние на формирование и функциональную активность нейронов, обеспечивают нейропротективные эффекты (багс1а- Бедняга е1 а1., 2001). Принимая во внимание появившиеся в литературе сведения о превентивной роли эстро гено в в развитии не йродегенеративных заболеваний в случае раннего начала заместительной терапии, следующим этапом работы стало изучение эстроге новых рецепторов в указанных структурах при старении, БоАл и СС. Научная новизна. Впервые с помощью иммуноцитохимических и морфометрических методов описаны изменения метаболической активности нейронов при старении и болезни Альцгеймера в вертикальном ядре диагонального поля Брока, медиальном мамиллярном ядре и туберомамиллярном ядре.

Впервые установлены изменения метаболической активности нейронов гипоталамуса и передне-базального мозга человека при сосудистом слабоумии с использованием в качестве параметров размеров перикарионов, аппарата Гольджи и уровня экспрессии гена вазопрессина. Впервые изучена иммуноцитохимическая экспрессия эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии. Впервые в мозге человека (медиальном мамиллярном ядре) выявлены сплайсинговые варианты эстрогенового рецептора и с помощью цепной реакции полимеразы. Впервые изолирован новый сплайсинговый вариант эстрогенового рецептора а МВ1 и изучены особенности его экспрессии, связанные с полом, возрастом и менопаузой. Впервые определены изменения иммуноцитохимической экспрессии ключевого фермента биосинтеза эстрогенов — ароматазы в ядрах гипоталамуса и передне-базального мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии.

Степень обоснованности научных положений, выводов и рекомендации не вызывает сомнений, так как в работе использован достаточный по числу наблюдений материал. Автором использован комплекс современных методов исследования (иммуноцитохимия, компьютерный морфометрический анализ, гибридизация 1п зпц, цепная реакция полимеразы, включая количественную) с последующей статистической обработкой количественных данных.

Сформулированные автором выводы достоверны и логически следуют из результатов, полученных в ходе исследования. Значение полученных соискателем научных результатов. Это первое комплексное исследование метаболической активности нейронов головного мозга человека, сопоставляюгцее их изменения при нормальном старении и двух наиболее часто встречающихся формах деменции с изменениями уровня эстрогенов и экспрессией эстрогеновых рецепторов. Результаты показывают, что метаболическая активность нейронов или повышается, или не претерпевает значительных изменений при нормальном старении, при болезни Альцгеимера отмечается вариабельность данного параметра в зависимости от структуры головного мозга, при сосудистой деменции метаболическая активность нейронов в изученных структурах чаще снижена.

Уменьшение синтеза вазопрессина в супраоптическом ядре у людей с сосудистой деменцией объясняет наиболее частые симптомы снижения артериального давления и недержания мочи. Увеличение экспрессии ядерных эстрогеновых рецепторов а в ядрах гипоталамуса и передне- базального мозга может быть рекомендовано в качестве нейропатогистологического критерия болезни Альцгеймера. В настоящем исследовании впервые в мозге человека обнаружены мутантные формы эстрогеновых рецепторов.

Более того, автором показано, что экспрессия сплайсинговых вариантов эстрогенового рецептора и с нарушениями функциональной активности увеличивается у женщин после менопаузы. Это частично объясняет противоречивость положительных эффектов заместительнои терапии эстрогенами на когнитивные функции головного мозга. Личный вклад соискателя Т.А. Ишуииной состоит в планировании работы, проведении всех гистологических, морфометрических, иммуногистохимических и молекулярно-биологических экспериментов, проведении статистическои обработки результатов и написания статей.

Автор (Т.А. Ишунина) сформулировала выводы, представила их на международных научных конференциях и опубликовала в авторитетных международных журналах с высоким импактфактором (Ига)п КезеагсЬ, Ехрег1тепта! Ь!еиго1оя!у, 3оигпа! оГС!ппса1 Епс1осг!по!оду апд МетаЬо11яп, )оигпа! оГХецгора1Ьо1оду апд Ехрег!птеп1а! Мецго1о~у, ХеигоЬ1о1оду оГ Афщ). Материалы диссертации в полной мере отражены в 21 международной печатной работе. Диссертационное исследование соответствует специальности «клеточная биология, цитология, гистология». Диссертация Т.А.

Ишуниной «Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии» рекомендуется к защите на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности «клеточная биология, цитология, гистология». Заключение принято на заседании научно-исследовательской группы. Присутствовало !0 человек. Результаты голосования: за - 10 чел., против — нет 07.02.2017).

Директор Нидерландского Института Нейронаук Профессор, доктор наук П.Р. Роелфсема, 1б февраля 2017г. Штамп: Херсенинститут, Нидерланды Мейбергдриф 47 П05 БА Амстердам тел.: 020 566 5500 Текст документа с английского языка иа русский язык переведен мнои, Шкилевой Натальей Игоревиой ~с. 4~хЫддяЗьЗ '~.~.х; ~' с.

Подпись Российская Федерация Город Курск Курской области Российской Федерации. Четвертого июля две тысячи сеницдцатого года. Я, Михнева Эльвира Павловна, временно исполняющий обязанности нотариуса Старостенко Ольги Николаевны Курского городского нотариального округа Курской области, свидетельствую подлинность подписи переводчика Шкилевой Натальи Игоревны. Подпись сделана в моем присутствии. Личность подписавшего документ установлена. Зарегистрировано в реестре: № ~. -~6 У Взыскано государственной пошлины (по тарифу): 100 руб.

00 коп. Уплачено за оказание услуг правового и технического характера 200 руб. 00 коп. Э.П.Михнева р'~г ' 7. '--. кО ~> . ,~ь -~.Ю'ф ~ =.' Х .