Автореферат (Изменения цитоархитектоники, метаболической активности нейронов и экспрессии эстрогеновых рецепторов в ядрах гипоталамуса и передне-базального комплекса мозга человека при старении, болезни Альцгеймера и сосудистом слабоумии), страница 8

УБВ+1наблюдался в ядре и отростках нейронов, например, в дендритах.Немаловажно, что УБВ+1 и ядерные ЭР редко ко-локализуются в одном итом же нейроне. Даже в случае обнаружения в одних и тех же нейронах, ЭРи УБВ+1 находятся в различных компартаментах цитоплазмы. При этомокрашивание УБВ+1 в контрольных случаях либо отсутствует, либозначительно уменьшено.СтимуляциятранскрипционнойактивностиЭРсвязанасубиквитинизацией и протеасомной деградацией рецептора, в то время какблокирование деградации ЭР, индуцированной лигандом, приводит кпролонгированной стимуляции транскрипции ЭР-чувствительных генов(Fan et al., 2004). Для феномена увеличения ядерных ЭР при БоАл этоозначает,чтоЭР-чувствительныегенымогутподвергатьсяпролонгированной стимуляции эстрогенами в случае наличия последних.

С39другойстороны,несвязанныеслигандомЭРтакжеподлежатопосредованному протеасомой кругообороту через другой механизм свовлечением белкового комплекса CHIP (Tateishi et al., 2004). Следуетотметить, что транскрипция ЭР может осуществляться через другоймеханизм с участием протеин киназы А (РКА), не требующий протеасомнойактивности,чтопредотвращаетрецепторотлиганд-опосредованнойдеградации (Tsai et al., 2004). Не исключено, что при БоАл эстрогены могутдействовать и через эту систему, если она не повреждена.Учитывая тот факт, что УБВ+1 экспрессируется в гораздо большейстепени при БоАл, чем в контрольных случаях, мы считаем оправданнымпредположениеотом,убиквитином,егочтопост-трансляционнаяпоследующаядеградациямодификациявЭРпротеасомеитранскрипционная активность ЭР повреждены в гипоталамусе и переднебазальном мозге при БоАл. Однако, дисфункция протеасомы не проясняетдо конца механизм увеличения экспрессии ЭР при БоАл.ВЫВОДЫ1.

Возрастные изменения метаболической активности нейронов ядергипоталамусачеловека,оцениваемойспомощьюцитоархитектонических показателей (размеров аппарата Гольджи иперикарионов),характеризуютсягендернымиособенностямииассоциируются с изменениями экспрессии рецепторов к половымстероидам.Так,метаболическаяактивностьнейроноввентромедиального и туберомамиллярного ядер выше у молодыхженщин по сравнению с молодыми мужчинами и увеличивается свозрастом у мужчин, что свидетельствует об ингибирующем влиянииандрогенов на эти ядра. В то же время метаболическая активностьнейронов медиального мамиллярного ядра возрастает у женщин послеменопаузы,демонстрируяналичиеингибирующихэффектовэстрогенов, опосредуемых через ЭР.

Следует отметить отсутствиетенденциикснижениюметаболической40активностинейроновгипоталамуса и передне-базального мозга при старении. Напротив, вбольшинстве ядер наблюдается возрастная активизация, которая, повсей видимости, связана со снижением уровня циркулирующихэстрогенов и андрогенов.2. При анализе данных согласно возрастной классификации ВОЗувеличение метаболической активности в большинстве изученныхструктур (базальное ядро Мейнерта, туберомамиллярное, медиальноемамиллярное и супраоптическое ядра) установлено в группе пожилыхлюдей в возрасте 60-74 лет. Отмеченные морфометрические изменениямогутноситьпредотвратитьзащитно-адаптивныйилизадержатьхарактер,развитиепозволяющийнейродегенеративныхпроцессов.

В БЯМ, которое в более значительной степени поражаетсяпри болезни Альцгеймера (сморщивание крупных нейронов, наличиезначительного количества нейрофибриллярных клубков и амилоидныхбляшек), эти защитные механизмы включаются раньше, у лиц среднеговозраста 45-59 лет. Следует отметить, что периодизация ВОЗ в данномслучае не только отражает возрастные нормы размеров комплексаГольджи, ядер и перикарионов нейронов, но и указывает наконкретный возрастной период запуска защитно-приспособительныхреакций.3. При болезни Альцгеймера единой закономерности в измененииметаболической активности нейронов ядер гипоталамуса и переднебазального мозга не наблюдается.

В базальном ядре Мейнерта итуберомамиллярном ядре при этой форме деменции выявленоснижение размеров аппарата Гольджи нейронов. В медиальноммамиллярном ядре, туберальном латеральном, супраоптическом ядре инонапептидэргических нейронах паравентрикулярного ядра измененийметаболической активности при болезни Альцгеймера не обнаружено.В вертикальном ядре диагонального поля Брока площадь АГдостоверно больше у пациентов с БоАл, чем у контрольных случаев в41возрасте до 70 лет, а у контрольных случаев старше 70 лет больше, чему людей от 56 до 70 лет.4. Метаболическаяактивностьтуберомамиллярного,нейроновинфундибулярногосупраоптического,ядергипоталамусаибазального ядра Мейнерта передне-базального мозга уменьшается присосудистойдеменции.

Эти изменения могут быть связаны снарушением кровоснабжения головного мозга при этой формеслабоумия.5. Установленные различия в плотности расположения нейронов иглиальныхклетоквструктурахпередне-базальногомозгаигипоталамуса при БоАл и СС свидетельствуют о различной степенипоражения изученных ядер при двух формах деменции и разныхкомпенсаторных механизмах их патогенеза. Наличие глиоза показано вБЯМ, СОЯ, ТМЯ и ММЯ при БоАл и СС. Самая высокая степеньглиоза выявлена в БЯМ, причём при БоАл она выше, чем при СС.Снижение метаболической активности нейронов при БоАл и ССассоциируется с компенсаторным увеличением числа глиальныхклеток.Признакисниженияобъёмаструктурымозгабезнейродегенеративных изменений (сморщивание) показаны для СОЯ иММЯ при БоАл и для БЯМ и СОЯ при СС.

Из всех изученныхструктур гибель нейронов характерна только для БЯМ при БоАл. ПриСС снижения плотности нейроцитов не обнаружено.6. При болезни Альцгеймера в ядрах нейронов гипоталамуса и переднебазального мозга наблюдается увеличение экпрессии эстрогеновогорецептора . Этот феномен может быть рекомендован в качествеодного из диагностических критериев болезни Альцгеймера впатогистологическойпрактике.Увеличениеэкспрессииядерныхэстрогеновых рецепторов  в гипоталамусе и передне-базальном мозгепри БоАл может быть связано с изменениями локального биосинтезаэстрогенов и нарушением деградации рецепторов в протеасоме.42Однако,взаимосвязиэтогофеноменаснейропатологическимиизменениями БоАл (амилоидными бляшками и нейрофибриллярнымиклубками) не установлено.

Достоверного увеличения содержания этогорецептора при СС не выявлено. Изменения экспрессии другогоподтипа эстрогеновых рецепторов - ЭР отчётливой закономерностьюнеотличались.Так,процентноесодержаниенейроновсцитоплазматическими ЭР увеличивалось при БоАл в базальном ядреМейнерта и туберомамиллярном ядре гипоталамуса, тогда как во всехостальных изученных ядрах этот показатель не изменялся.7. ПриболезниАльцгеймеранаблюдаетсяснижениеиммуноцитохимической экспрессии ароматазы (ключевого фермента вбиосинтезе эстрогенов) в ядрах гипоталамуса (супраоптическом,инфундибулярном, медиальном мамиллярном) и её повышение внейронахбазальногоядраМейнерта.Учитываясокращениечисленности крупных нейронов в БЯМ при БоАл, полученныерезультатыпредполагаютлокальныйдефицитэстрогеноввгипоталамусе и передне-базальном мозге при болезни Альцгеймера.При сосудистой деменции наиболее значимые различия в экспрессииароматазы установлены в базальном ядре Мейнерта (увеличение) и всупраоптическом ядре (снижение).

Таким образом, при СС характеризменений в содержании ароматазы, в определённой степени совпадаетс таковым при БоАл.8. В медиальном мамиллярном ядре пожилых людей наблюдаетсявысокий уровень экспрессии доминантно-негативного сплайсинговоговариантаΔ7,характеризующегосявыпадением7-гоэкзона,кодирующего значительную часть домена для связывания с лигандами.НаличиевММЯмутантныхформЭР(Δ7,Δ4,Δ2,МВ1)сповреждениями основных функциональных доменов предполагаетотсутствие или снижение эффективности действия эстрогенов.439. МВ1 – новый сплайсинговый вариант ЭР, изолированный изкаудальногогипоталамуса,характеризующийсявыпадением168нуклеотидов в первом экзоне, соответсвующих экзонному интрону U2.Экспрессия МВ1 увеличивается у женщин в пери- и пост-менопаузе,что свидетельствует о накоплении мутантных форм эстрогеновогорецепторавядрахгипоталамусаприсниженииуровняциркулирующих эстрогенов.Список работ, опубликованных по теме диссертации1. Ishunina T.A., Swaab D.F.

Increased expression of estrogen receptor  and in the nucleus basalis of Meynert in Alzheimer's disease. // Neurobiol.Aging – 2001. – Vol. 22. – P. 417-426.2. Ishunina T.A., Unmehopa U.A., van Heerikhuize J.J., Pool C.W., SwaabD.F. Metabolic activity of the human ventromedial nucleus neurons inrelation to sex and ageing. // Brain Res. – 2001. – Vol. 893. – P. 70-76.3.

Ishunina T.A., Wouda J., Fisser B., Swaab D.F. Sex differences in estrogenreceptor  and  expression in vasopressin neurons of the supraoptic nucleusin elderly and Alzheimer's disease patients: no relationship with cytoskeletalalterations. // Brain Res. – 2002. – Vol. 951. – P. 322-329.4. Ishunina T.A., Kamphorst W., Swaab D.F. Changes in metabolic activityand estrogen receptors in the human medial mamillary nucleus: relation tosex, aging and Alzheimer's disease. // Neurobiol. Aging.

– 2003. – Vol. 24.– P. 817-828.5. Ishunina T.A., Swaab D.F. Increased neuronal metabolic activity andestrogen receptors in the vertical limb of the diagonal band of Broca inAlzheimer’s disease: relation to sex and aging. // Exp. Neurol. – 2003. –Vol. 183. – P. 159-172.6. Ishunina T.A., van Heerikhuize J.J., Ravid R., Swaab D.F. Estrogenreceptors and metabolic activity in the human tuberomamillary nucleus:changes in relation to sex, aging and Alzheimer’s disease. // Brain Res. –2003.