Отзыв на автореферат Ли - к.ф.-м.н. Н.В.Калягиной (Взаимодействие эритроцитов в средах, индуцирующих их агрегацию - исследование с помощью лазерных пинцетов)

В диссертационный совет Д 501.002.11 при Московском государственном университете имени М.В. Ломоносова» ОТЗЫВ на автореферат диссертации Ли Кисун «Взаимодействие эритроцитов в средах, индуцирующих их агрегацию; исследование с помощью лазерных пинцетовц представленной на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук по специальность 03,01,02 — «Биофизика» нр~ь~дуд~д Диссертация посвящена изучениию механизмов взаимодействия отдельных эритроцитов при их агрегации н дезагрегации в различных средах; растворах белков плазмы крови и нейтральных макромолекул (декстранов), а также в цельной плазме и сыворотке крови. Разработана новая методика измерения с помощью лазерных пинцетов, которая позволила с высокой точностью измерить параметры взаимодействия эритроцитовскорость и усилие спонтанной агрегации, площадь локального контакта и впервые описать динамику взаимодействия клеток т по о.

Показаны особенности взаимодействия, характерные для различных растворов. В работе впервые изучена роль отдельных белков плазмы и их сочетания (фибриногена, альбумнна и других компонентов крови) на агрегацию двух одиночных эритроцитов. Впервые показано существенное различие процессов агрегации и дезагрегации эритроцитов.

Силы, развиваемые при спонтанной агрегации эритроцитов, значительно меньше сил, необходимых для дезагрегации уже образованных агрегатов. Показана ключевая роль фибриногена„которая проявляется только в комплексе с другими компонентами плазмы крови. Процесс взаимодействия клеток в плазме и сыворотке отличается от того, что наблюдается в модельных растворах нейтральных макромолекул. В растворах нейтральных макромолекул силы взаимодействия клеток„как при спонтанной агрегации, так и при дезагрегации изменяются пропорционально площади взаимодействия.

Впервые проведено сопоставление результатов измерений на уровне индивидуальных клеток с измерениями на цельной крови. Хорошая корреляция результатов подтвердила применимость предложенной модельной системы двух одиночных эритроцитов и разработанной методики измерения параметров их взаимодействия в исследовательской практике. Отдельная глава диссертации посвящена разработке математической модели образования обратимых агрегатов эритроцитов в растворе высокомолекулярных соединений, базирующейся на двух гипотезах. Первая — гипотеза образования «подвижных мостиков» из белковых макромолекул в зазоре между эритроцитами является усовершенствованной гипотезой «молекулярных мостиков».

Модель «подвижных мостиков» позволяет описать не только агре гацию, но и эффект возрастания силы взаимодействия эритроцитов прн дезагрегации. Вторая гипотеза имеет ( ° ° я Кандидат физико-математических наук, доцент кафедры прикладной механики ФГБОУ ВПО ««Московский государственный технический университет имени Н.Э. Баумана» 105005, г. Москва, 2-я Бауманская ул., д. 5, стр. 1. Тел./факс: +7(499)2б3-б4-87 Е-та11: пабекЬйа 1са1уац1па ®та11.ги Сайт: )зйр://гк5.Ьптзгц,гц/ Калягина Надежда Вячеславовна =~'Р, г/', Х~~/М Подпись Калягиной Н.В.

заверяю ял;а»я к«ЙРов осмотическую природу. Предполагается, что сближение эритроцитов происходит из-за формирования «обеднйнного слоя», содержащего уменьшенную концентрацию макромолекул, тогда сближение эритроцитов создает предпосылки для образования «молекулярных мостиков», которые удерживают агрегат.

На чная и и актическав значимость разработанного метода измерения сил взаимодействия эритроцитов человека с помощью лазерных пинцетов позволит продвинуться в исследовании биофизических механизмов агрегации эритроцитов, как в норме, так и при различных заболеваниях. Он может быть применен для исследования физических закономерностей взаимодействия других живых клеток. Этот метод можно также эффективно использовать для исследования связи микрореологических свойств эритроцитов с параметрами микроциркуляции крови человека в норме и при различных патологиях. Полученные в работе новые данные о характере взаимодействия эритроцитов на уровне одиночных клеток могут быть использованы для разработки новых биофизических моделей взаимодействия клеток. Автором проведена болыпая экспериментальная работа, включающая построение автоматизированной установки, состоящей из двух независимо управляемых лазерных пинцетов и системы компьютерной обработки данных, разработке методики и протокола измерения силы взаимодействия клеток, проведении экспериментов, обработки и интерпретации данных экспериментов, организации сбора крови и подготовки образцов, пригодных для проведения измерений.

Результаты экспериментов усреднялнсь по измерениям на нескольких десятках пар эритроцитов, что обеспечило их точность и дййй(ййй( Акт альность аборты обусловлена тем, что многие заболевания сопровождаются гиперагрегацией эритроцитов с последующим повышением вязкости крови, нарушением микроциркуляции и затруднением транспорта кислорода. Рб Р~~ Ю ж Юйд йюйдй(й Ю фйщи ЮУ семинарах. Публикации отражают содержание диссертации. Представленные резулътаты являются новыми и получены впервые. 3(~УУ й Ц «дд Р~й Р б В дй й Р Рди Р*й индуцирующих их агрегацию: исследование с помощью лазерных пинцетов» с точки зрения научной значимости и практической ценности полностью соответствует требованиям, предъявляемым к кандидатским диссертациям, а ее автор Ли Кисун несомненно заслуживает присуждения ему ученой степени кандидата физикоматематических наук по специальности 03,01.02 — «Биофизика».

.