Диссертация (1174313), страница 6

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 6)

Затем выполняли торакотомию, измеряли редокс-потенциал идиффузионную способность тканей миокарда для кислорода, пункцию коронар-27ной вены, забор крови из нее, затем биопсию тканей миокарда в 5 участках. После этого животное выводилось из опыта введением летальной дозы тиопенталнатрия.Во II и III группах производили внутрисосудистое лазерное облучениекрови двухканальным аппаратом лазерной терапии «Матрикс», использовалисьголовка КЛ-ВЛОК (длина волны 635 нм), одноразовые стерильные световодыКИВЛ-1, мощность излучения на выходе 2 мВт, временем воздействиясоставляло 15 мин.В IV группе в терапию включали внутривенные введения ремаксола(15 мл/кг).Исследованные показатели, принятые за норму (референтные значения),изучены у 10 здоровых беспородных половозрелых собак обоего пола.Исследования проведены в НИЛ кафедры факультетской хирургии Медицинского института ФГБОУ ВО «МГУ имени Н. П.

Огарева» в соответствии сэтическими требованиями к работе с экспериментальными животными («Правилапроведения работ с использованием экспериментальных животных» (приказ МЗСССР № 755 от 12.08.1987 г.), Федеральный закон «О защите животных от жестокого обращения» от 01.01.1997 г., приказ МЗ РФ от 19.06.2003 г.

№ 267 «Обутверждении правил лабораторной практики») и получили одобрение локальногоэтического комитета.В работе оценены: ЭКГ, выраженность эндотоксемии, гипоксии, оксидативного стресса и фосфолипазной активности,расстройства в системе гемостаза (организменный и органный уровень), состояние микроциркуляции, транскапиллярного обмена, редокс-потенциал и диффузионная способность тканей миокарда длякислорода.С этой целью исследовали следующие показатели:– электрокардиограмму регистрировали в стандартных отведениях на электрокардиографе ЭК ЭТ-01-«Р-Д»;– уровень молекул средней массы;– содержание общего и эффективного альбумина (затем расчет резерва свя-28зывания альбумина (РСА) = ЭКА/ОКА и индекса токсичности (ИТ) =ОКА/ЭКА-1(Грызунов Ю. А., Добрецов Г.

Е., 1998).– показатели гемостаза: время свертывания крови по Lee R.J. и White P.D.(1913), время рекальцификации по Bergerhof и Roka (1954), протромбиновое время по Quick A.J. (1966), тромбиновое время по R.M.Biggs и R.G.Macfarlane (1962),антитромбин III по Hensen A., Loeliger E.A. (модификация К.М. Бишевского(1963), эуглобулиновую фибринолитическую активность крови по H. Kowarzyk,L. Buluck (1954).Тканевой экстракт тканей готовили по следующей схеме: кусочки сердечноймышцы многократно промывали 0,89 % раствором хлорида натрия, высушивалифильтровальной бумагой, взвешивали и заливали физиологическим раствором(10-кратно), затем их растирали в ступке до гомогенного состояния, центрифугировали в течении 5 минут при 1500 об/мин.

Для исследования использовали надосадочную жидкость (Скипетров В.П., 1969; Скипетров В.П., Николенко К.К.,1970).– определение диеновых и триеновых конъюгатов в плазме крови и тканяхмиокарда;– определения малонового диальдегида (МДА);– определения активности фосфолипазы А2;– определение активности супероксиддисмутазы;– определение содержания молочной кислоты и пировиноградной кислот;– определениередокс-потенциалатканеймиокарда(окислительно-восстановительного потенциала (ОВП)) на универсальном ионометре ЭВ-74, рабочий электрод платиновый (платина 99,99 %, ГОСТ 85888-64), а электродомсравнения – хлорсеребряный электрод;– определение коэффициента диффузии кислорода (КДК) в тканях миокардана основе учета темпа падения диффузного тока восстановления по уравнению И.М.

Эпштейна (Труфанов Л. А., 1991):29Дt 2 lg1 r I1,I2Дt1 lg1 rгде I1 – сила тока через 5 с; I2 - сила тока через 10 с, ма; r – радиус электрода, мм;– определение вено-венозного градиента по методу Лендиса. Изменениягистогематической проницаемости микрососудов миокарда оценивали по капиллярной фильтрации (F) и потере белка (К) (Чернух А. М. и др., 1984).Математические методы оценки цифрового материала: метод вариационнойстатистики с применением критерия Стьюдента; оценка взаимосвязи посредствомрасчета коэффициента корреляции r.

Для проверки выборок на нормальность распределения использовали критерий Лиллиефорса.30Глава 3. МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ И БИОФИЗИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯМИОКАРДА ПРИ ОКСИДАТИВНО-ТОКСИЧЕСКИХ ЯВЛЕНИЯХПАНКРЕАТОГЕННОГО ПРОИСХОЛЖДЕНИЯКак указано во второй главе нами достаточно полно оценены метаболические и биофизические изменения миокарда. С этой целью изучались показателиЭКГ, выраженность эндотоксемии, гипоксии, оксидативного стресса и фосфолипазной активности, расстройства в системе гемостаза (организменный и органныйуровень), состояние микроциркуляции, транскапиллярного обмена, редокспотенциал и диффузионная способность тканей миокарда для кислорода.Отметим, что модель острого панкреатита оказалась адекватной для решения поставленных задач. У животных возникал отечный панкреатит с выраженными расстройствами гомеостаза и существенными метаболическими и биофизическими изменениями миокарда.Отметим, что заметные явления ЭИ регистрировались уже в первые сутки.В дальнейшем они, несмотря на применение консервативной терапии, прогрессировали.

Изучение выраженности ЭИ в динамике острого панкреатита показалозначительные изменения показателей, регистрирующих этот синдром (табл. 3.1).Таблица 3.1. – Показатели ЭИ в динамике острого панкреатита (M±m)НормаСрок наблюдения (сутки от моделирования)123OKA, г/л39,08±1,2537,78±1,3235,12±1,43*35,46±1,27*EKA, г/л28,23±0,5225,18±0,4320,18±0,38*21,16±0,43*RSA0,72±0,030,67±0,020,57±0,01*0,60±0,02*IT0,38±0,030,50±0,050,74±0,02*0,68±0,03*MSM1, у.е.0,338±0,0420,402±0,0370,573±0,048*0,591±0,052*MSM2, у.е.0,372±0,0290,411±0,0350,550±0,029*0,635±0,038*Примечание здесь и далее:  – достоверность отличия по сравнению с нормой (p0,05)Индекс токсичности превышал норму на 94,7 и 78,9 % (р<0,05) на 2-е и 3-и31сутки соответственно. Уровень МСМ (=254 нм) был увеличен на 69,5 % (р<0,05)на 2-е сутки и на 74,9 % (р<0,05) на 3-и сутки относительно нормы.Как указано выше, уровень токсических продуктов гидрофильной и гидрофобной природы неуклонно возрастал в течение всего срока наблюдения (рис.

3.1,3.2).250200150100500Рисунок 3.1. Показателипродуктов гидрофобнойприроды ИТприОКА токсических ЭКАРСАостром панкреатите.200150100500 Показатели токсических продуктов гидрофильной природы приРисунок 3.2.МСМ(λ=254нм)МСМ(λ=280 нм)остром панкреатите.Явления эндотоксемии сопровождались существенными изменениями в системе гемостаза, что подтверждалось существенными модификациями свертывающей, антикоагулянтной и фибринолитической систем (табл.

3.2).32Таблица 3.2. – Показатели гуморального компонента системы гемостазапри остром панкреатите(Mm)НормаСрок наблюдения (сутки от моделирования)123TS, с307,249,32261,1710,12*243,187,18*248,238,09*TR, с124,227,4597,897,3388,166,4586,127,45*TP, с29,211,8321,160,9517,121,1018,721,23TAT III, %72,09±4,1859,08±2,33*52,16±1,89*56,29±2,23*FE, мин165,23±8,96196,28±7,02*216,21±10,34*202,91±11,46*Отметим, что расстройства в системе гемостаза в течение периода наблюдения прогрессировали на фоне снижения антикоагулянтной активности и угнетения фибринолитической способности (рис.

3.3).Так, через сутки время свертывания укорачивалось на 15,0 % (р<0,05), через2-е суток – на 20,9 % (р<0,05), через 3-е суток – на 19,2 % (р<0,05) относительнонормы.Антикоагулянтная активность крови падала. Уровень антитромбина А IIIснижался по сравнению с нормой на 1-е, 2-е и 3-и сутки на 18,0; 27,6 и 21,9 %(р<0,05) соответственно.12010080604020Рисунок 3.3.0Показатели гуморального гемостаза при остром панкреатите.ВСВРАIIIПВ33Нами получены весьма интересные данные по состоянию тканевой системыгемостаза миокарда.Изучение влияния экстрактов тканей миокарда на показатели системы гемостаза выявило существенные их изменения (табл.

3.3).Таблица 3.3. – Показатели коагуляционно-литического потенциала тканей миокарда при остром панкреатите(Mm)НормаСрок наблюдения (сутки от моделирования)123TR, с36,291,7330,031,5228,781,3431,171,45*TP, с20,721,0114,890,9614,020,7915,530,61*FE, мин153,12±6,98193,12±10,11*208,67±11,04*204,19±9,85*Зарегистрированное существенное их отклонения от референтных значенийсохранялось в течение всего периода наблюдения (рис. 3.4).16014012010080604020Рисунок 3.4.0 Коагуляционно-литические показатели миокарда при остром панкреВРПВЭФатите.При остром панкреатите нами выявлены значительные проявления оксидативного стресса и фосфолипазной активности на фоне угнетения антиоксидантного ферментного потенциала (табл. 3.4).Cодержание диеновых конъюгатов и малонового диальдегида увеличивалось на 1-е, 2-е и 3-и сутки на 45,2; 57,1 и 78,6 % (р<0,05) соответственно.34Таблица 3.4.

– Показатели оксидативного стресса и активности фосфолипазы А2плазмы крови при остром панкреатите, (M±m)НормаDK, усл.ед./мг липидовTK, усл.ед./мг липидовMDA, нМоль/г белкаAFA2, vкмоль/с/гбелкаSOD, у. е.Срок наблюдения (сутки от моделирования)1230,42±0,020,61±0,03*0,66±0,04*0,75±0,03*0,35±0,010,58±0,02*0,61±0,03*0,71±0,04*2,17±0,083,99±0,21*4,17±0,27*4,48±0,23*0,043±0,0030,49±0,04*0,61±0,05*0,55±0,05*2,67±0,112,12±0,08*1,89±0,07*1,78±0,09*Активность фосфолипазы А2 увеличивалась на первые сутки на 1039,5 %(р<0,05), на вторые на 1418,6 % (р<0,05), на третьи на 1179,1 % (р<0,05).Отметим, что максимальные проявления оксидативного стресса были черезтрое суток после моделирования, а активности фосфолипазы А2 – через трое суток(рис.

3.5).1600,001400,001200,001000,00800,00600,00400,00200,000,00Рисунок.3.5. Показатели оксидативного стресса и активности фосфолипазы А 2 вДК панкреатите. ТКМДАФЛА2плазме крови при остромПри этом активность энзимного антиоксидантного потенциала, судя поактивности СОД, неуклонно снижалась к третьим суткам (рис. 3.6).35120100%***806040200норма СОД в плазме1-есутки2-е суткиРисунок 3.6.

Активностькровипри остром панкреатите.3-и суткОтметим, что особенности эксперимента были таковыми, что представиласьвозможным оценить активность вышеуказанных процессов и в тканях сердечноймышцы.Оказалось, что в тканевых структурах миокарда возникали значительныеизменения указанных процессов (табл. 3.5).Таблица 3.5. – Показатели перекисного окисления мембранных липидов и активности фосфолипазы А2 в тканях сердца при остром панкреатите (M±m)НормаСрок наблюдения (сутки от моделирования)123DK, усл.ед./мг липидов0,22±0,020,39±0,03*0,45±0,03*0,38±0,04*TK, усл.ед./мг липидов0,16±0,010,32±0,02*0,36±0,03*0,29±0,03*MDA, нМоль/г белка3,37±0,175,21±0,32*5,43±0,35*5,21±0,32*AFA2, vкмоль/с/г белка1,62±0,084,12±0,18*4,78±0,33*3,89±0,21*SOD, у.

е.12,67±0,657,23±0,41*6,98±0,37*7,82±0,40*Подчеркнем, что максимальные проявления оксидативного стресса и активности фосфолипазы А2 были через двое суток после моделирования (рис. 3.7).Активность фосфолипазы А2 превосходила нормальные показатели на первые сутки на 154,3 % (р<0,05), на вторые сутки – на 195,1 (р<0,05), на третьи сутки – на 140,1 % (р<0,05).36350,00300,00250,00200,00150,00100,0050,000,00Рисунок 3.7. Показателистресса и активностиА2 вДК оксидативногоТКМДА фосфолипазыФЛА2тканях сердца при остром панкреатите.Содержание малонового диальдегида и диеновых конъюгатов было вышенормы на первые сутки на 54,6 и 77,3 %, на вторые сутки – на 61,1 и 104,5 %, натретьи сутки – на 54,6 и 72,7 % (р<0,05) соответственно.Указанные явления происходили на фоне снижения активности антиоксидантного потенциала тканей органа (рис.

Характеристики

Список файлов диссертации